河南省周口市中心醫(yī)院(466000)宋艷芳
腦膠質(zhì)瘤是臨床常見中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性腫瘤,診斷其惡性程度及級別對治療方案的確定具有關(guān)鍵性作用,有助于盡早制定治療方案,控制病情發(fā)展,提高治療效果,降低死亡率[1]。本研究選取37例腦膠質(zhì)瘤患者,以探討β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級的關(guān)聯(lián)性??偨Y(jié)如下。
1.1 一般資料 選取周口市中心醫(yī)院2014年3月~2017年6月腦膠質(zhì)瘤患者37例為觀察組,女17例,男20例,年齡33~63歲,平均年齡(47.86±14.21)歲。另選同期健康體檢者35例為對照組,女16例,男19例,年齡34~62歲,平均年齡(45.67±11.21)歲。兩組性別、年齡等各項差異不明顯(P>0.05),有可比性。
1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn) ①納入標(biāo)準(zhǔn):觀察組均確診為腦膠質(zhì)瘤;兩組均知曉本研究,且簽訂同意書。②排除標(biāo)準(zhǔn):伴有其他惡性腫瘤者。
1.3 方法
1.3.1 β-catenin檢測方法選擇ABclonal公司提供的β-catenin多克隆抗體,采用免疫組化法進(jìn)行檢測,染色采用S-P法(萊爾生物公司的S-P試劑盒),嚴(yán)格按照說明書操作,并進(jìn)行免疫組化光鏡分析,主要由兩名以上醫(yī)師在雙盲前提下采用雙評分半定量法評分,獲取數(shù)據(jù)。
1.3.2 B7-H3檢測方法 于培養(yǎng)箱(56℃)中置入石蠟樣本,融蠟(1h),于二甲苯溶液中置入融蠟后標(biāo)本,脫蠟3次,5min/次,采用從高至低濃度乙醇(100%、100%、90%、80%、70%)清洗,均置入5min,后采用PBS清洗(5min)。于抗原修復(fù)液中置入玻片,維持高壓煮沸(3min),進(jìn)行冷卻,直至完全冷卻后取出,PBS清洗(5min),將過氧化氫(3%)滴于樣本表面,室溫條件下孵育(15min),PBS清洗(3min),去除PBS,于37℃的BSA(5%)培養(yǎng)箱中封閉,持續(xù)1h,去除封閉液,添加稀釋一抗,于4℃保濕水槽中過夜。次日,PBS清洗3次,5min/次,滴加二抗,37℃條件下孵育(30min),PBS清洗3次,5min/次,滴加DAB染液,保持5~15℃室溫,利用顯微鏡,觀察顯色。
1.4 觀察指標(biāo) ①比較兩組β-catenin、B7-H3水平。②分析β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級的關(guān)聯(lián)性。
1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 運用SPSS21.0軟件處理數(shù)據(jù),采用n(%)表示計數(shù)資料,χ2檢驗,P<0.05表明差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 β-catenin、B7-H3水平 觀察組β-catenin陽性表達(dá)率為78.38%(29/37),對照組未出現(xiàn)β-catenin表達(dá);觀察組B7-H3蛋白陽性表達(dá)率為62.16%(23/37);對照組為16.21%(6/35),兩組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ21=38.496,P1=0.000;χ22=15.154,P2=0.000)。
附表 β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級的關(guān)聯(lián)性(n=37,%)
2.2 β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級的關(guān)聯(lián)性 β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級有關(guān)(P<0.05),見附表。
腦膠質(zhì)瘤的病理分級對制定治療方案具有較高價值,低級別腦膠質(zhì)瘤被誤診為高級別腦膠質(zhì)瘤易造成治療過度,反之則治療不足,均可增加死亡率及復(fù)發(fā)率。有研究顯示,腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲與其表面受體分子及其微環(huán)境中細(xì)胞因子的表達(dá)密切相關(guān)[2]。本研究結(jié)果顯示,觀察組β-catenin、B7-H3蛋白陽性表達(dá)率高于對照組(P<0.05);β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級有關(guān)(P<0.05),提示β-catenin、B7-H3蛋白于腦膠質(zhì)瘤組織中均呈現(xiàn)異常高表達(dá)狀態(tài),并隨病情嚴(yán)重程度逐漸升高,二者表達(dá)水平均與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級有關(guān)。
綜上可知,β-catenin、B7-H3蛋白于腦膠質(zhì)瘤組織中均呈現(xiàn)異常高表達(dá)狀態(tài),表達(dá)水平均與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級有關(guān)。