王 靜 李欣然 余曉燕 劉 衛(wèi) 陳小燕 王 華

（揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)江蘇制藥股份有限公司，江蘇 泰州 225321）

磷化鋁是現(xiàn)在使用較多的糧食熏蒸類(lèi)殺蟲(chóng)劑，也為中藥材滅蟲(chóng)使用，因磷化鋁有劇毒性，如熏蒸后通風(fēng)不徹底，殘余的磷化鋁將對(duì)人體造成傷害[1-5]。故我們通過(guò)建立中藥材中磷化物殘留量檢測(cè)方法，控制滅蟲(chóng)后藥材質(zhì)量，待檢測(cè)結(jié)果符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定方可使用。

1 相關(guān)儀器及試劑

1.1 儀器：安捷倫7890氣相色譜儀NPD，型號(hào) XPE205電子天平，型號(hào)HH-S電熱恒溫水浴鍋，20 mL頂空進(jìn)樣瓶，1 mL密封性注射器。

1.2 試劑。磷化鋁：來(lái)源江蘇雙菱化工集團(tuán)有限公司，含量85%；硫酸：GR，來(lái)源 國(guó)藥集團(tuán)有限公司；超純水

2 檢測(cè)條件

頂空條件。平衡溫度：40 ℃；定量環(huán)溫度：50 ℃；傳輸線溫度：65 ℃；平衡時(shí)間：10 min。進(jìn)樣持續(xù)時(shí)間：0.5 min；GC循環(huán)：15 min；樣品瓶體積：20 mL。

氣相色譜條件。色譜柱：毛細(xì)管色譜柱（HP-5，30 m×0.32 mm×0.25 μm）；載氣：高純氮?dú)?；載氣流量：2 mL/min；進(jìn)樣口溫度：150 ℃；柱溫：180 ℃；運(yùn)行時(shí)間：10 min；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比90∶1；檢測(cè)器溫度：250 ℃；氫氣：3 mL/min；空氣：60 mL/min；尾吹氣：30 mL/min。

3 驗(yàn)證方法

3.1 供試品和對(duì)照品溶液配制方法及溶液的制備。樣品配制：用電子天平稱(chēng)取中藥材粉末（過(guò)3號(hào)篩）0.5 g，稱(chēng)取2份樣品，分別置于20 mL頂空進(jìn)樣瓶中，精密加入10%硫酸溶液10 mL，扎蓋密封頂空瓶，將頂空瓶置于40 ℃水浴中持續(xù)振搖10 min，放入頂空樣品盤(pán)中按2.檢測(cè)條件測(cè)定。

對(duì)照品配制：①儲(chǔ)備氣的制備：取磷化鋁10 mg，于20 mL頂空進(jìn)樣瓶中，使用移液槍精密加入10%硫酸溶液10 mL，立即密封頂空瓶，將頂空瓶置于40 ℃水浴中持續(xù)振搖10 min，使其充分反應(yīng)，得貯備氣體。儲(chǔ)備氣體需當(dāng)天制備。②對(duì)照品的制備：再取1 mL氣密性注射器從貯備氣體中抽取0.1 mL注入已精密加入10%硫酸溶液10 mL，并扎蓋封口的20 mL頂空瓶中，（為保證儲(chǔ)備氣體的準(zhǔn)確性，一份儲(chǔ)備氣體只能抽取5次）將頂空瓶置于40 ℃恒溫水浴中持續(xù)振搖10 min，使其充分混勻，得對(duì)照氣體，放入頂空樣品盤(pán)中按設(shè)定條件測(cè)定。

溶液的制備：硫酸溶液：取100 mL硫酸（優(yōu)級(jí)純），緩緩加入900 mL水中，待冷卻后加水至1000 mL。

3.2 專(zhuān)屬性考察：取對(duì)照品溶液一份，供試品溶液一份，空白溶液一份，對(duì)照品供試品混合溶液一份。按測(cè)定方法進(jìn)樣。結(jié)果：空白溶液未出現(xiàn)與對(duì)照品保留一致的峰，對(duì)照品供試品混合溶液峰無(wú)開(kāi)裂。

3.3 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)?；厥章蕵悠啡芤旱闹苽洌喝¤讱し勰┘s0.5 g，精密稱(chēng)定，置于頂空瓶中，平行稱(chēng)取6份，精密加入10%硫酸溶液10 mL至于密封頂空瓶，使用1 mL注射器從對(duì)照品氣體（2）中抽取0.1 mL分別注入上述6個(gè)20 mL頂空瓶中，將頂空瓶置于40 ℃水浴中持續(xù)振搖10 min，得回收率樣品溶液。

取對(duì)照品溶液（2）和回收率樣品溶液，分別進(jìn)樣，記錄色譜圖結(jié)果。計(jì)算回收率樣品溶液的測(cè)得濃度，計(jì)算磷化鋁的回收率。經(jīng)試驗(yàn)，回收率為93%～97%，在藥典規(guī)定70%～150%范圍內(nèi)。計(jì)算：回收率=[樣品實(shí)測(cè)面積-樣品理論面積]/對(duì)照品溶液理論面積×100%。對(duì)照品溶液理論面積為3針對(duì)照品溶液的平均值。見(jiàn)表1。

表1 回收率樣品溶液的制備

3.4 重復(fù)性試驗(yàn)。配制空白溶液。使用1 mL注射器從3.1.對(duì)照品溶液（2）氣體中吸取0.1 mL，分別注入6個(gè)精密加入10 mL 10%硫酸溶液且扎蓋密封的20 mL頂空瓶中，置于40 ℃恒溫水浴中持續(xù)振搖10 min，得重復(fù)性試驗(yàn)溶液。計(jì)算6針對(duì)照品RSD值，RSD為2.9%。見(jiàn)表2。

表2 重復(fù)性試驗(yàn)

3.5 線性關(guān)系驗(yàn)證：使用1 mL注射器從3.1.對(duì)照品溶液（2）氣體中吸取0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL，注入已精密加入10 mL 10%硫酸溶液且扎蓋密封的20 mL 頂空進(jìn)樣瓶中，將樣品瓶置于40 ℃恒溫水浴中振搖10 min，使其充分混勻，得線性對(duì)照品溶液。

將5份對(duì)照品溶液分別按設(shè)定條件測(cè)定，測(cè)定峰面積，以對(duì)照品濃度X（mg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值Y為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。見(jiàn)表3。

表3 線性關(guān)系驗(yàn)證

4 樣品測(cè)定

稱(chēng)取2個(gè)不同批次的中藥材供試品0.5 g，各2份。同法測(cè)定空白一份。測(cè)定樣品中磷化物殘留，測(cè)得磷化物殘留量應(yīng)不得過(guò)0.05 mg/kg。

4.1 未熏蒸樣品檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表4。

表4 未熏蒸樣品檢測(cè)結(jié)果

4.2 第一次熏蒸樣品檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表5。

表5 第一次熏蒸樣品檢測(cè)結(jié)果

4.3 第二次熏蒸樣品檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表6。

表6 第二次熏蒸樣品檢測(cè)結(jié)果

通過(guò)對(duì)上述藥材兩次熏蒸后磷化物殘留進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測(cè)，第一次熏蒸為通風(fēng)第2天開(kāi)始檢測(cè)，因樣品通風(fēng)效果不好，檢測(cè)至第5天時(shí)結(jié)果仍不符合要求。故進(jìn)行第二次熏蒸試驗(yàn)時(shí)，加強(qiáng)通風(fēng)效果，并從熏蒸第3天開(kāi)始連續(xù)監(jiān)測(cè)，第3天時(shí)，檢測(cè)結(jié)果已低于0.05 mg/kg，符合規(guī)定。通風(fēng)效果對(duì)磷化物消散有較大影響，滅蟲(chóng)后應(yīng)保證足夠的通風(fēng)，才能達(dá)到散氣效果。

5 結(jié) 論

經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，中藥材中磷化物殘留量測(cè)定方法，專(zhuān)屬性符合規(guī)定，無(wú)雜質(zhì)干擾供試品，對(duì)照品峰無(wú)開(kāi)裂，準(zhǔn)確度試驗(yàn)回收率為93%～97%，重復(fù)性試驗(yàn)RSD為2.9%，線性范圍R=0.997。且通過(guò)對(duì)12批樣品的檢測(cè)，本方法在上述范圍內(nèi)測(cè)定中藥材中磷化物殘留量的結(jié)果準(zhǔn)確有效，可以用于中藥材滅蟲(chóng)后的磷化物檢測(cè)。