黃 程，雷艷萍，李曉媚，楊文豪，熊 燕

(廣州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣州蛇毒研究所，廣東 廣州 511436)

糖尿病是嚴(yán)重危害人類健康的常見(jiàn)疾病，糖尿病患者易并發(fā)性功能障礙，在男性表現(xiàn)為陰莖勃起功能障礙(erectile dysfunction, ED)，俗稱陽(yáng)痿，嚴(yán)重影響人們的身心健康和生活質(zhì)量[1]。但有關(guān)糖尿病ED的機(jī)制并不清楚，臨床也缺乏有效的防治藥物，因此，闡明糖尿病ED發(fā)病機(jī)制，并研發(fā)有效的防治藥物是醫(yī)學(xué)和藥學(xué)亟待解決的科學(xué)問(wèn)題。

陰莖勃起是由神經(jīng)調(diào)節(jié)的血管活動(dòng)，依賴于海綿體神經(jīng)和內(nèi)皮細(xì)胞合成、釋放一氧化氮(nitric oxide, NO)，通過(guò)活化海綿體平滑肌細(xì)胞鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶，使cGMP增加，促使陰莖海綿體平滑肌舒張，使陰莖充血勃起。當(dāng)性興奮結(jié)束后，海綿體平滑肌細(xì)胞磷酸二酯酶5(phosphodiesterase 5, PDE5)活化，降解cGMP，使勃起終止。大量研究表明，NO-cGMP通路紊亂是導(dǎo)致ED的主要因素[2]。NO是由L-精氨酸在一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)催化下轉(zhuǎn)化而來(lái)。L-精氨酸同系物非對(duì)稱性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine, ADMA)為NOS內(nèi)源性抑制物，可抑制NOS并使之解偶聯(lián)，一方面減少NO合成，另一方面增加超氧陰離子生成，導(dǎo)致氧化應(yīng)激[3]。體內(nèi)ADMA主要是由蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1(protein arginine methyltransferase 1, PRMT1)催化含精氨酸殘基的蛋白質(zhì)甲基化，再經(jīng)蛋白水解作用釋放而來(lái)，并主要由二甲基精氨酸二甲胺水解酶(dimethylarginine dimethylaminohydrolase, DDAH)代謝降解，因此，PRMT1-ADMA-DDAH是體內(nèi)調(diào)節(jié)NO生成的重要信號(hào)通路。

近年研究發(fā)現(xiàn)，衰老大鼠海綿體對(duì)罌粟堿的舒張反應(yīng)降低，并伴有海綿體內(nèi)源性ADMA蓄積，NO與cGMP含量減少[4]。香煙尼古丁致ED兔海綿體ADMA含量也明顯增加，并伴有DDAH活性降低[5]。2型糖尿病ED患者陰莖海綿體內(nèi)皮型NOS(eNOS)和神經(jīng)型NOS(nNOS)解偶聯(lián)，氧化應(yīng)激增加[3]。Meta分析顯示，eNOS基因單核苷酸多態(tài)性與ED呈強(qiáng)相關(guān)[2]。這些研究提示，內(nèi)源性ADMA蓄積導(dǎo)致NOS活性抑制和NO合成減少，不僅與吸煙所致ED和老齡ED密切相關(guān)，也可能參與糖尿病ED的病理生理過(guò)程。

臨床上，PDE5抑制劑西地那非等被廣泛用作各種ED治療的首選藥。越來(lái)越多的文獻(xiàn)報(bào)道，西地那非可明顯改善ED患者和動(dòng)物勃起功能[6]，但糖尿病ED患者對(duì)西地那非的療效明顯低于非糖尿病ED患者[7]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，西地那非并不能改善糖尿病大鼠海綿體eNOS、nNOS、PDE5基因和蛋白表達(dá)[8]。對(duì)以上不同的研究結(jié)果，巴西學(xué)者分別評(píng)估了糖尿病ED和非糖尿病ED患者對(duì)西地那非的反應(yīng)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血中亞硝酸鹽水平與糖尿病ED患者對(duì)西地那非的反應(yīng)呈負(fù)相關(guān)，提示體內(nèi)NO水平與ED患者對(duì)西地那非的療效有關(guān)[9]。由此推測(cè)，糖尿病ED患者對(duì)西地那非療效差的主要原因是由于海綿體NO減少，而不是PDE5過(guò)度活化所致。因此，闡明糖尿病ED海綿體NO缺乏的原因，研發(fā)促NO合成的藥物，對(duì)糖尿病ED防治具有重要意義。

L-精氨酸作為NO合成前體，在ED形成及防治研究中也倍受關(guān)注。最近研究發(fā)現(xiàn)，嚴(yán)重ED和動(dòng)脈性ED患者血清L-精氨酸水平明顯低于輕度ED和非動(dòng)脈性ED患者[10]。體外L-精氨酸孵育可改善老齡大鼠海綿體對(duì)乙酰膽堿(acetylcholine, ACh)或電刺激的舒張反應(yīng)[11]。口服L-精氨酸可改善男性不育患者的精子質(zhì)量和勃起功能[12]。但對(duì)于L-精氨酸能否改善糖尿病ED及其機(jī)制，尚未見(jiàn)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道。因此，本研究擬在2型糖尿病大鼠中，探討內(nèi)源性ADMA在糖尿病ED形成中的重要作用，并觀察L-精氨酸對(duì)糖尿病大鼠ED的治療效果，同時(shí)在體外比較L-精氨酸與西地那非對(duì)糖尿病大鼠海綿體舒張功能障礙的改善作用及其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1試劑苯腎上腺素(phenylephrin, PE)、ACh、ADMA、L-精氨酸、西地那非(sildenafil, SIL)、鏈脲佐菌素(streptozotocin, STZ)、二乙酰單肟、安替比林，均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；抗PRMT1、DDAH1、DDAH2抗體，購(gòu)自Abcam公司；抗PDE5、 NOS1-3、β-actin抗體，購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司；NO含量、NOS活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量、BCA蛋白濃度檢測(cè)試劑盒、RIPA裂解液、ECL發(fā)光試劑盒，均購(gòu)自碧云天生物技術(shù)有限公司；組織ADMA和cGMP ELISA檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自上海研吉公司；其余常規(guī)試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2動(dòng)物模型的制備及分組SPF級(jí)健康♂Sprague-Dawley(SD)大鼠，體質(zhì)量180～200 g，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SYXK(粵)2010-0104。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、糖尿病組、糖尿病+L-精氨酸治療組、L-精氨酸對(duì)照組，每組5只。2型糖尿病大鼠模型制備采用高脂飼養(yǎng)+小劑量STZ(30 mg·kg-1, i.p.)注射方法制備[13]，并連續(xù)3 d檢測(cè)尿糖為～者，再行連續(xù)2次隔日檢測(cè)隨機(jī)血糖≥16 mmol·L-1，則認(rèn)為糖尿病大鼠模型成立，繼續(xù)高脂飼養(yǎng)8周。正常對(duì)照組和L-精氨酸對(duì)照組用基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)4周后，一次性腹腔注射等體積的檸檬酸緩沖液(pH 4.2)，再繼續(xù)用基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)8周。

1.3方法

1.3.1 口服糖耐量的測(cè)定 糖尿病大鼠造模8周后，測(cè)定口服糖耐量以評(píng)價(jià)胰島素敏感性。先將大鼠禁食12 h后，經(jīng)尾靜脈采血測(cè)定空腹血糖值(blood glucose，BG)，然后一次性灌胃給予40%葡萄糖溶液(2 g·kg-1)，分別在灌胃后30、60、90、120 min檢測(cè)血糖值，繪制血糖-時(shí)間曲線，并采用梯形法計(jì)算曲線下面積[13]。

1.3.2 海綿體舒張功能測(cè)定 水合氯醛(300 mg·kg-1，i.p.)麻醉，頸動(dòng)脈插管收集血標(biāo)本后，快速摘取陰莖，按我室已建立的方法，檢測(cè)大鼠離體海綿體對(duì)ACh的舒張反應(yīng)，以反映陰莖勃起功能[13]。并記錄各濃度點(diǎn)海綿體張力變化，并計(jì)算舒張百分率。在體外藥物治療實(shí)驗(yàn)中，記錄第1次海綿體對(duì)ACh的舒張反應(yīng)后，分別用L-精氨酸(3 mmol·L-1)和西地那非(3 μmol·L-1)孵育45 min，再檢測(cè)海綿體對(duì)ACh的舒張百分率；并將藥物孵育前后兩次最大舒張百分率的比值，用以評(píng)價(jià)L-精氨酸和西地那非對(duì)糖尿病大鼠海綿體舒張功能障礙的體外治療作用。

1.3.3 生化測(cè)定

1.3.3.1 血清和組織ADMA水平測(cè)定 采用高效液相色譜法測(cè)定大鼠血清ADMA濃度[13]，通過(guò)比較樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積比值，以及標(biāo)準(zhǔn)品ADMA濃度，計(jì)算樣品ADMA的濃度；采用大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)海綿體組織ADMA含量。

1.3.3.2 DDAH、NOS活性及NO含量測(cè)定 按我室已建立的方法測(cè)定海綿體組織DDAH活性。制備5%海綿體組織勻漿，取其上清50 μL與1 mmol·L-1ADMA反應(yīng)，加入二乙酰單肟和安替比林共孵育100 min，用Epoch全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(美國(guó)BoiTek公司)在466 nm波長(zhǎng)處讀取吸光度值(A466)。計(jì)算L-胍氨酸生成量，以反映DDAH活性，其活性單位定義為每分鐘催化生成1 μmol·L-1的L-胍氨酸所需要的DDAH量(U·g-1Pro)。分別用NOS和NO試劑盒，檢測(cè)海綿體NOS活性及NO穩(wěn)定代謝產(chǎn)物硝酸鹽/亞硝酸鹽含量，反映NO生成[13]。

1.3.3.3 氧化應(yīng)激、cGMP和蛋白含量測(cè)定 用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定海綿體SOD活性，硫代巴比妥酸法測(cè)定MDA含量，反映氧化應(yīng)激[13]。采用大鼠cGMP ELISA試劑盒檢測(cè)海綿體組織cGMP含量。采用雙縮脲法測(cè)定組織蛋白含量，用以標(biāo)化上述生化指標(biāo)[14]。

1.3.4 蛋白表達(dá)檢測(cè) 制備10%大鼠海綿體組織的RIPA裂解液，用Western blot法檢測(cè)PRMT1、DDAH1、DDAH2、eNOS、nNOS、iNOS、PDE5等蛋白表達(dá)[13-14]。每孔上樣30 μg蛋白，經(jīng)電泳分離后，電轉(zhuǎn)至PDVF膜上，室溫封閉1 h后，加一抗(PRMT1、DDAH1、DDAH2 的濃度為1 ∶1 000，eNOS、nNOS、iNOS、PDE5的濃度為1 ∶500)4 ℃孵育過(guò)夜，再加二抗室溫孵育2 h，用ECL化學(xué)發(fā)光試劑顯色，凝膠成像系統(tǒng)(ChemiDocTMXRS+System，Bio-Rad公司)掃描，用Image Pro軟件進(jìn)行圖像分析。

2 結(jié)果

2.1L-精氨酸體內(nèi)治療改善糖尿病大鼠的口服糖耐量如Fig 1所示，糖尿病大鼠空腹血糖明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)，葡萄糖負(fù)荷(2 g·kg-1, i.g.)后，糖尿病大鼠各時(shí)間點(diǎn)的血糖水平及血糖-時(shí)間曲線下面積均明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)，表明糖尿病大鼠糖耐量降低。經(jīng)L-精氨酸(100 mg·kg-1·d-1, i.g.)體內(nèi)治療8周后，既可降低糖尿病大鼠的空腹血糖水平，也可降低糖負(fù)荷后2 h的血糖濃度(P<0.05)，但不影響正常大鼠的空腹血糖和糖負(fù)荷后血糖水平，提示L-精氨酸治療8周可改善糖尿病大鼠的糖耐量降低。

2.2L-精氨酸治療改善糖尿病大鼠海綿體的舒張功能如Fig 2所示，與正常對(duì)照組比較，糖尿病大鼠海綿體對(duì)ACh誘導(dǎo)的最大舒張反應(yīng)明顯降低(P<0.01)，提示糖尿病大鼠ED；L-精氨酸體內(nèi)治療明顯增加糖尿病大鼠離體海綿體對(duì)ACh的最大舒張反應(yīng)(P<0.05)，但對(duì)正常對(duì)照組大鼠離體海綿體的最大舒張反應(yīng)無(wú)明顯影響。將糖尿病大鼠離體海綿體在體外用L-精氨酸(3 mmol·L-1)孵育45 min，也能增加其對(duì)ACh的最大舒張反應(yīng)(P<0.05)；然而，用PDE5抑制劑西地那非(3 μmol·L-1)體外孵育糖尿病大鼠離體海綿體，則不影響其對(duì)ACh的最大舒張反應(yīng)。提示L-精氨酸無(wú)論是體內(nèi)還是體外治療，均能明顯改善糖尿病大鼠海綿體的舒張功能損害。

2.3L-精氨酸對(duì)海綿體ADMA、NO、cGMP含量以及DDAH、NOS活性的影響如Tab 1所示，糖尿病大鼠血清中ADMA濃度明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)，海綿體內(nèi)源性ADMA蓄積增加(P<0.05)，DDAH及NOS活性降低(P<0.05)，NO和cGMP含量均減少(P<0.01)，提示糖尿病大鼠海綿體組織DDAH/ADMA/NOS/NO/cGMP通路紊亂。給予L-精氨酸體內(nèi)治療8周后，糖尿病大鼠血清ADMA濃度明顯降低(P<0.01)，海綿體內(nèi)源性ADMA蓄積減少(P<0.05)，DDAH及NOS活性增強(qiáng)(P<0.05)，NO和cGMP含量增加(P<0.01)，提示L-精氨酸治療可逆轉(zhuǎn)糖尿病大鼠海綿體DDAH/ADMA/NOS/NO/cGMP通路紊亂，但對(duì)正常大鼠海綿體DDAH/ADMA/NOS/NO/cGMP通路無(wú)明顯影響。

2.4L-精氨酸對(duì)海綿體PRMT1/DDAH/NOS/PDE5通路蛋白表達(dá)影響如Fig 3所示，與正常對(duì)照組比較，糖尿病組大鼠海綿體PRMT1蛋白表達(dá)上調(diào)，而DDAH1和DDAH2蛋白表達(dá)下調(diào)(P<0.01)，eNOS和nNOS的蛋白表達(dá)降低，而iNOS蛋白表達(dá)增加(P<0.01)，此外，PDE5蛋白表達(dá)也上調(diào)(P<0.01)。

Fig 1 Treatment with L-arginine for 8 weeks improved the impairment of oral glucose tolerance in diabetic

A: Plasma glucose concentration-time curve; B: AUC of plasma glucose.**P<0.01vscontrol;#P<0.05vsDM.

Tab 1 L-arginine treatment in vivo reversed disorder of DDAH/ADMA/NOS/NO/cGMP pathway

*P<0.05,**P<0.01vscontrol;#P<0.05,##P<0.01vsDM

A: Effect of L-arginine treatmentinvivo; B: Effect of L-arginine treatmentinvitro; C: Effect of sildenafil treatmentinvitro.**P<0.01vscontrol;#P<0.05vsDM.

提示糖尿病大鼠海綿體組織PRMT1/DDAH/NOS/PDE5通路蛋白表達(dá)紊亂。經(jīng)L-精氨酸體內(nèi)治療8周后，基本可逆轉(zhuǎn)以上異常(P<0.05，P<0.01)，但對(duì)正常大鼠海綿體PRMT1/DDAH/NOS/PDE5通路蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響。提示L-精氨酸體內(nèi)治療可改善PRMT1/DDAH/NOS/PDE5通路蛋白表達(dá)的異常。

2.5L-精氨酸降低糖尿病大鼠海綿體氧化應(yīng)激如Fig 4所示，與正常對(duì)照組比較，糖尿病大鼠海綿體抗氧化酶SOD活性降低(P<0.01)，脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量有升高趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示糖尿病大鼠海綿體氧化應(yīng)激增加。用L-精氨酸體內(nèi)治療8周后，不僅能提高糖尿病大鼠海綿體SOD活性，還能降低MDA含量(P<0.01，P<0.05)，提示L-精氨酸體內(nèi)治療可降低糖尿病大鼠海綿體氧化應(yīng)激。

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病大鼠海綿體舒張功能明顯降低，并伴有內(nèi)源性ADMA蓄積和海綿體PRMT1/ADMA/DDAH/NOS/PDE5通路紊亂；經(jīng)L-精氨酸灌胃治療8周，不僅改善糖尿病大鼠海綿體舒張功能障礙，還降低內(nèi)源性ADMA蓄積，并糾正海綿體PRMT1/ADMA/DDAH/NOS/PDE5通路紊亂。為闡明糖尿病ED的發(fā)病機(jī)制及其治療提供了新的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

Fig 3 L-arginine treatment in vivo normalized abnormal protein expression of PRMT1/DDAH/NOS

*P<0.05,**P<0.01vscontrol;##P<0.01vsDM

Fig 4 L-arginine treatment in vivo suppressed oxidative stress in corpus cavernosum of diabetic

A:SOD activity; B: MDA content.**P<0.01vscontrol;#P<0.05,##P<0.01vsDM.

評(píng)價(jià)人類ED的嚴(yán)重性主要采用5項(xiàng)國(guó)際勃起功能指數(shù)(the International Index of Erectile Function, IIEF-5)評(píng)分[1, 6-7, 9-10]。評(píng)價(jià)動(dòng)物ED，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)常采用陰莖海綿體內(nèi)壓(intracavernous pressure, ICP)及其與平均動(dòng)脈壓(mean arterial pressure, MAP)的比值來(lái)反映[4,8]，體外實(shí)驗(yàn)常采用電刺激或藥物如ACh等誘導(dǎo)離體海綿體的舒張反應(yīng)來(lái)反映[5,15]。本研究通過(guò)檢測(cè)離體海綿體對(duì)ACh的最大舒張反應(yīng)來(lái)評(píng)估糖尿病大鼠勃起功能，證明了糖尿病大鼠ED與陰莖海綿體NO/cGMP信號(hào)損害有關(guān)。相似的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也在老齡ED大鼠[4]、注射香煙抽提物致ED兔[5]和動(dòng)脈粥樣硬化ED大鼠等動(dòng)物模型觀察到。來(lái)自陰莖假體移植患者的離體海綿體研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病ED患者海綿體內(nèi)皮依賴性舒張功能和電刺激的舒張反應(yīng)損害均比非糖尿病ED患者嚴(yán)重，海綿體cGMP含量也更低，并且對(duì)PDE5抑制劑誘導(dǎo)的舒張反應(yīng)不明顯[15]。臨床分析發(fā)現(xiàn)，糖尿病ED患者血漿亞硝酸鹽水平與其對(duì)PDE5抑制劑的治療效果呈負(fù)相關(guān)[9]。這些研究結(jié)果均直接或間接支持我們關(guān)于糖尿病ED是由于海綿體NO/cGMP信號(hào)損害所致的實(shí)驗(yàn)結(jié)論。然而，導(dǎo)致糖尿病患者和動(dòng)物海綿體NO/cGMP降低或損害的機(jī)制不完全清楚，深入研究對(duì)糖尿病ED的防治具有重要意義。

最近研究發(fā)現(xiàn)，海綿體內(nèi)源性ADMA蓄積與衰老大鼠ED和香煙尼古丁所致兔ED有關(guān)[4-5]。因此，本研究檢測(cè)糖尿病ED大鼠血清和海綿體ADMA水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，糖尿病ED大鼠不僅血清ADMA濃度明顯升高，海綿體內(nèi)源性ADMA也明顯蓄積，還伴有海綿體NOS活性抑制，eNOS和nNOS表達(dá)降低。依據(jù)這些結(jié)果，我們提出“海綿體內(nèi)源性ADMA蓄積及其所致的NOS活性抑制、eNOS和nNOS表達(dá)下調(diào)，是導(dǎo)致糖尿病ED海綿體NO/cGMP信號(hào)降低的重要原因”的觀點(diǎn)。已知ADMA抑制NOS，可使其解偶聯(lián)，不僅減少NO生成，還增加氧自由基產(chǎn)生[3]，因此，本研究檢測(cè)了海綿體SOD活性及MDA含量以反映氧化應(yīng)激。結(jié)果證明，糖尿病ED大鼠海綿體氧化應(yīng)激的確增加。雖然已知DDAH和PRMT1與內(nèi)源性ADMA生成與代謝有關(guān)，本研究揭示了糖尿病ED大鼠海綿體ADMA蓄積不僅是由于DDAH活性及表達(dá)降低所致，也與PRMT1表達(dá)增加有關(guān)。海綿體ADMA蓄積與DDAH和NOS活性降低的相似結(jié)果，也在老齡ED大鼠[4]、注射香煙抽提物所致ED兔[5]和動(dòng)脈粥樣硬化ED大鼠觀察到，這些結(jié)果均間接支持了我們的觀點(diǎn)。

為了進(jìn)一步驗(yàn)證我們的觀點(diǎn)，并尋找治療糖尿病ED的更好藥物，本研究觀察了NO合成前體L-精氨酸體內(nèi)治療8周對(duì)糖尿病大鼠ED的療效。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，L-精氨酸體內(nèi)治療不僅能降低糖尿病大鼠內(nèi)源性ADMA蓄積，還明顯改善糖尿病ED，并可糾正糖尿病大鼠海綿體PRMT1/DDAH/ADMA/NOS/PDE5信號(hào)通路紊亂和氧化應(yīng)激。不僅如此，L-精氨酸體外孵育糖尿病大鼠海綿體也能明顯改善其舒張功能障礙，而用PDE5抑制劑西地那非體外孵育則不能。這些結(jié)果進(jìn)一步證明，內(nèi)源性ADMA蓄積導(dǎo)致NO缺乏是糖尿病大鼠ED的主要原因，而不是PDE5過(guò)度活化所致。基礎(chǔ)和臨床研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病ED病人和動(dòng)物對(duì)PDE5抑制劑治療效果不佳[7-8]，有研究推測(cè)這可能與糖尿病時(shí)血中NO水平降低，以及PDE5抑制劑不能改善海綿體NOS表達(dá)、活性與NO合成有關(guān)[8-9]。因?yàn)槟茉黾覰OS表達(dá)和保護(hù)NO不被滅活的白藜蘆醇和抗氧化劑等藥物，也能改善糖尿病病人和動(dòng)物的ED，與PDE5抑制劑聯(lián)合治療可產(chǎn)生協(xié)同作用[8]。這些研究結(jié)果雖然來(lái)自各種ED病人和多種動(dòng)物模型，都直接或間接地支持我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和觀點(diǎn)。

綜上所述，本研究揭示海綿體內(nèi)源性NOS抑制物ADMA蓄積是導(dǎo)致糖尿病大鼠ED的重要原因；NO合成前體L-精氨酸無(wú)論是體內(nèi)治療，還是體外孵育，對(duì)糖尿病大鼠離體海綿體舒張功能障礙均有明顯的改善，其機(jī)制與上調(diào)海綿體DDAH和NOS活性與表達(dá)，增加NO合成，降低氧化應(yīng)激有關(guān)。本研究為L(zhǎng)-精氨酸用于臨床防治糖尿病ED提供了重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。