陳志會(huì)
比旋度測(cè)定法是用來(lái)鑒別或檢查光學(xué)活性物質(zhì)的純雜程度,或是測(cè)定光學(xué)活性物質(zhì)的含量的方法,光學(xué)活性物質(zhì)即受到偏振光照射時(shí)能改變偏振光偏振面的旋光性物質(zhì)。
旋光度與比旋度
旋光度:平面偏振光通過(guò)某些光學(xué)活性物質(zhì)(透明晶體,液態(tài)溶液)時(shí),由于分子(晶體)結(jié)構(gòu)中存在不對(duì)稱(chēng)因素,引起測(cè)定時(shí)偏振光的折射率的改變這一旋光現(xiàn)象,從而使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)。旋轉(zhuǎn)的度數(shù),稱(chēng)為旋光度,用α表示。偏振光順時(shí)針向右旋轉(zhuǎn)者為“右旋”以“+”表示,左旋轉(zhuǎn)者為“左旋”以“—”表示。
比旋度:在一定波長(zhǎng)與溫度下,偏振光透過(guò)每1ml含有1g旋光性物質(zhì)的溶液,且光路為長(zhǎng)1dm時(shí),測(cè)得的旋光度稱(chēng)為比旋度,用 [α]表示,固體旋光性物質(zhì)的比旋度公式表示法如下:
式中D為鈉光譜的D線(xiàn); t為測(cè)定時(shí)的溫度,℃;l為測(cè)定管長(zhǎng),單位為dm; α為測(cè)得的旋光度; c為溶液濃度,即每100ml溶液中含有被測(cè)物質(zhì)的重量(按干燥品或無(wú)水物計(jì)算)g。
固體旋光性物質(zhì)旋光度測(cè)定的影響因素
旋光性物質(zhì)有固體和液體之分,本次主要從固體旋光性物質(zhì)的旋光度測(cè)定這一角度出發(fā)對(duì)其進(jìn)行總結(jié)。固體旋光性物質(zhì)對(duì)于制藥行業(yè)來(lái)說(shuō)主要就是原料和輔料,其旋光度的測(cè)定受自身的結(jié)構(gòu)、外界及樣品溶液的溫度、采用溶劑的性質(zhì)、溶液的濃度、以及測(cè)定時(shí)偏振光波長(zhǎng)這五方面因素的影響。
測(cè)定固體旋光性物質(zhì)旋光度的一般步驟
按照品種規(guī)定調(diào)整實(shí)驗(yàn)室溫度(無(wú)特殊規(guī)定為20℃),配制空白溶劑
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在空白溶劑溫度和室溫都達(dá)到規(guī)定且平衡時(shí),按照品種規(guī)定配制樣品溶液
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樣品溶液在配置過(guò)程中有溫度變化,應(yīng)放置樣品溶液至與規(guī)定溫度相平衡,時(shí)間不得過(guò)30分鐘
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空白溶劑校準(zhǔn),一般采用兩遍校準(zhǔn)法
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樣品溶液的測(cè)定,應(yīng)反復(fù)測(cè)定三次,三次讀數(shù)差異應(yīng)符合規(guī)定
保障固體旋光性物質(zhì)旋光度順利測(cè)定的途徑
保障固體旋光性物質(zhì)旋光度順利測(cè)定應(yīng)從影響旋光度測(cè)定的因素合并質(zhì)量控制的五要素“人機(jī)物法環(huán)”來(lái)考慮,具體總結(jié)如下:
4.1控制藥品的有關(guān)物質(zhì)的量,保證其純度,開(kāi)展途徑包括:(1)正確儲(chǔ)存藥品,避免因儲(chǔ)存不當(dāng)而導(dǎo)致有關(guān)物質(zhì)的增長(zhǎng)(2)保證藥品在開(kāi)封后檢驗(yàn)的及時(shí)性。
4.2控制旋光度儀的準(zhǔn)確度,開(kāi)展途徑包括:(1)對(duì)旋光度儀進(jìn)行定期的核查,保證儀器正常運(yùn)行狀態(tài)(2)注意鈉燈的壽命,不要連續(xù)使用超過(guò)四個(gè)小時(shí)(3)測(cè)定前先將鈉燈預(yù)熱幾分鐘,時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),測(cè)定過(guò)程中避免反復(fù)開(kāi)關(guān)。
4.3避免固體旋光性物質(zhì)在配制成為溶液的過(guò)程中引入雜質(zhì),控制途徑有:(1)保證操作人員的操作的規(guī)范性(2)保證實(shí)驗(yàn)環(huán)境的潔凈性(3)保證與藥品接觸工具和器皿以及配制的空白溶劑的潔凈性等。
4.4控制溫度的適宜、穩(wěn)定,開(kāi)展途徑有:(1)通過(guò)空調(diào)控制室內(nèi)溫度,將實(shí)驗(yàn)室內(nèi)放入溫度計(jì),觀測(cè)溫度變化較小后再選取時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(2)將測(cè)定旋光度的樣品溶液和空白溶劑提前放入已設(shè)定特定溫度的實(shí)驗(yàn)室,確保樣品溶液、空白溶劑和室溫相一致,必要時(shí)可通過(guò)恒溫水浴鍋來(lái)快速實(shí)現(xiàn)樣品溫度與環(huán)境溫度的一致。
4.5控制樣品溶液的濃度:(1)需要注意樣品溶液在測(cè)定過(guò)程中是否有析出,從而樣品溶液的濃度的改變(2)使用標(biāo)定過(guò)合格的容量瓶,避免因體積偏差影響溶液的濃度(3)配制樣品溶液的過(guò)程應(yīng)在室溫和溶劑均達(dá)到規(guī)定溫度且平衡后再進(jìn)行,避免溫度對(duì)玻璃容量瓶膨脹性和空白溶劑膨脹性造成影響,最終避免溶液濃度的偏差。
4.6控制旋光管的正確清洗與使用,開(kāi)展途徑包括:(1)通過(guò)小心的洗滌,自然晾干,不可以用干燥箱干燥,并確保其不受灰塵污染,以確保旋光管的狀態(tài)正常(2)測(cè)定樣品溶液和空白溶劑時(shí)應(yīng)保證擰旋光管時(shí)兩側(cè)所用的力相同(3)測(cè)定樣品溶液和空白溶劑時(shí)應(yīng)保證旋光管內(nèi)無(wú)氣泡或者將氣泡送至測(cè)定管的膨大部分,以排除對(duì)測(cè)定光路造成影響。
對(duì)旋光度中“按干燥品或無(wú)水物計(jì)算”的理解
如果固體旋光性物質(zhì)規(guī)定要檢查干燥失重和水分,且在測(cè)定比旋度前對(duì)固體樣品無(wú)前期干燥處理的情況下,最終結(jié)果應(yīng)該除去水分和干燥失重;
如果固體旋光性物質(zhì)規(guī)定檢查干燥失重和水分,且在測(cè)定比旋度前對(duì)固體樣品前期進(jìn)行規(guī)定的干燥處理,最終的結(jié)果就應(yīng)該只除去水分;
如果固體旋光性物質(zhì)規(guī)定檢查干燥失重或者水分的一項(xiàng),則最終的結(jié)果只除去相應(yīng)的那項(xiàng)即可。