摘 要：為了解推廣油菜品種的菌核病抗性情況，篩選菌核病抗性強的品種，采用牙簽人工莖桿接種方法對征集的95個主推油菜品種進行抗（耐）菌核病鑒定和利用評價。結(jié)果表明：在鑒定的95個油菜品種中，無高抗品種；達到中抗水平有7個品種，占鑒定品種的7.4%；達到低抗水平的有47個，占鑒定品種的49.5%；其余品種為低感或中感菌核病；無高感菌核病品種。達到中抗水平的油菜品種可在相應(yīng)生態(tài)區(qū)推廣種植并可作為抗病種質(zhì)加以利用。

關(guān)鍵詞：油菜；菌核??；人工接種； 鑒定；評價

中圖分類號 S565.4 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2018）15-0050-04

油菜菌核病是由核盤菌屬核盤菌（Sclerotinia sclerotiorum）引起的真菌病害，在油菜的整個生育期均可發(fā)病，但以結(jié)實期發(fā)病最重[1]。張立良等研究認為，2月的平均氣溫決定病害的初見期，花期降雨量直接影響病害的流行，5月中旬的降雨量影響病害的發(fā)病程度[2]。發(fā)病時莖、葉、花、果均可受害，并以莖部受害最重[3]。氣候相對涼爽和潮濕的長江中下游是我國油菜的主要產(chǎn)區(qū)，也是油菜菌核病的易發(fā)和多發(fā)地區(qū)，一般發(fā)病率為10%～30%，嚴重者達到80%以上[4]。油菜感病后一般減產(chǎn)10%～70%，粗脂肪含量降低1%～5%，油菜籽產(chǎn)量和品質(zhì)受到嚴重影響[5]。

大量育種及生產(chǎn)實踐都表明，不同油菜品種間菌核病抗性有較大的差異，種植抗病品種是防治油菜菌核病的有效方法之一。為此，2013—2014年筆者采用牙簽人工莖桿接種法對來自冬油菜各產(chǎn)區(qū)的95份近幾年審定的油菜品種進行抗（耐）菌核病鑒定，以評價其對菌核病的抗（耐）能力，篩選菌核病抗性較好的油菜品種進行推廣并作為抗病育種材料加以利用。

1 材料與方法

1.1 供試材料 95份油菜品種從市場購得。病原物來源于安徽省油菜不同生態(tài)區(qū)（安慶、蕪湖、黃山、馬鞍山等）采集的油菜菌核病病株或菌核，經(jīng)致病性鑒定篩選出的強致病純化菌株，由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植保學(xué)院實驗室保存。根據(jù)我國油菜品種的抗病性鑒定要求，將中油821確定為油菜抗菌核病鑒定的對照品種。

1.2 試驗設(shè)計 采用隨機區(qū)組排列，每小區(qū)面積3m×1m，3次重復(fù)，重復(fù)間留走道，四周設(shè)保護行。重復(fù)內(nèi)每品種種植1行，穴行距0.3m×1.5m，每行16穴，每穴留1株，每20份鑒定品種設(shè)1組抗病對照中油821。播種時間與肥水管理與大田生產(chǎn)一致。整個生長期不施用殺菌劑。

1.3 病原物接種體制備 接種體為帶菌牙簽，先將木制牙簽截至30mm，煮沸15min，撿出放入馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液中，高壓滅菌鍋滅菌后，呈放射狀排列于培養(yǎng)皿中，中心接菌核病病菌的菌絲塊。25℃條件下培養(yǎng)6d，使牙簽上長滿菌絲備用。

1.4 人工接種 在初花期進行菌核病人工牙簽莖桿接種。用打孔器（電鉆或3×100mm梅花起子）在油菜主莖距地面20～30cm處打孔，用帶菌牙簽挑取菌碟中菌絲塊插入孔中，用保鮮膜包裹保濕（圖1）。每重復(fù)每品種接種10株。接種應(yīng)在陰天或傍晚進行，接種后霧化保濕，及時進行田間噴灌，滿足病害發(fā)生所需條件。油菜成熟期調(diào)查接種植株的發(fā)病程度和病情指數(shù)。

1.5 菌核病分級標(biāo)準 在油菜成熟期調(diào)查接種菌核病植株的感病情況，并將其劃分為5個等級（表1）。

1.6 抗病等級劃分標(biāo)準 用相對抗性指數(shù)（RRI）劃分油菜菌核病的抗病等級[6]。油菜菌核病的抗性等級劃分標(biāo)準如下：

式中：

RRI-鑒定品種相對抗性指數(shù)；

DIm：鑒定品種病情指數(shù)；

DIck：對照中油821病情指數(shù)；

病情指數(shù)和相對抗性指數(shù)均保留1位小數(shù)。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 用Excel2007進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗（耐）菌核病鑒定數(shù)據(jù)有效性分析 對2014年抗性鑒定所有品種的數(shù)據(jù)進行分析，可知相對抗指趨于正態(tài)分布（圖2），表明試驗數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計學(xué)意義。多數(shù)品種的相對抗指在-0.6～0.8之間，多數(shù)品種的抗性相近，僅少數(shù)品種的抗性明顯好于或者差于其他材料。

2011—2014年4年間，共有205個品種連續(xù)2年參加抗性鑒定（表3）。對這205個品種在2個年度間的抗病鑒定數(shù)據(jù)進行比較，結(jié)果表明，以中油821為對照，這205個品種在2012與2013，2013與2014年度間的相對抗性指數(shù)均呈極顯著相關(guān)（P<0.01），但2011與2012年度間相對抗性指數(shù)相關(guān)性未達到顯著水平。總體上85%的品種在2個年度間的抗病等級相同或僅在相鄰級別變動（注：多數(shù)品種雖被劃分為相鄰的不同等級，但他們的相對病指相近），相對抗性指數(shù)和抗病等級一致性較好，一定程度上表明利用牙簽人工接種鑒定結(jié)果具有一定的穩(wěn)定性和趨勢性（圖3）。

2.2 2014年征集品種的抗病性評價 以中油821為對照，計算2013—2014年征集的95個品種的抗病等級，表現(xiàn)抗病的品種有54個，占征集品種的56.8%。其中，無高抗品種；達到中抗水平的品種7個，分別是中雙11、中核雜488、天禾油10號、中油98D、徽油808、滬油雜1號和天油早1號，占7.4%；低抗品種47個，占49.5%；表現(xiàn)感病的品種有41個，占征集品種的43.2%。感病品種中，低感品種共39個，占41.1%；中感品種2個，占2.1%；無高感品種（表4）。

長江上游的品種共9個，表現(xiàn)感病的品種有7個，占77.8%；中感品種2個，分別為綿新油38和綿油88；其余5個為低感品種；表現(xiàn)低抗的品種有2個，分別為蓉油10號和南油12（表5）。2014年95個征集品種抗性鑒定為中感的2個品種都來自長江上游，表明在長江上游選育的油菜品種推廣到下游，菌核病抗性有待提高。

長江中游的品種共39個，表現(xiàn)感病的品種有19個，占48.7%，全部表現(xiàn)為低感；表現(xiàn)抗病的品種有20個，占51.3%，其中18個品種為低抗，占46.6%；2014年95個品種，達到中抗水平的7個品種中有2個來自長江中游，分別是中雙11和中油98D。

長江下游的品種共40個，表現(xiàn)感病的品種有11個，占27.5%，全部表現(xiàn)為低感；表現(xiàn)抗病的品種有29個，占72.5%，其中24個為低抗，占60%；2014年95個品種，達到中抗水平的7個品種中有5個來自長江下游，分別是滬油雜1號、中核雜488、天禾油10號、徽油808和天油早1號。

黃淮區(qū)的品種共7個，表現(xiàn)感病的品種有4個，占57.1%，全部表現(xiàn)為低感；表現(xiàn)抗病的品種有3個，占42.9%，全部表現(xiàn)為低抗。

3 結(jié)論與討論

采用牙簽人工莖桿接種方法對95個油菜品種進行菌核病抗性鑒定，達到中抗水平有7個品種，分別是中雙11、中核雜488、天禾油10號、中油98D、徽油808、滬油雜1號和天油早1號，占鑒定品種的7.4%，都是已經(jīng)審定的油菜品種（部分品種審定時間在本研究完成之后）。達到中抗以上水平的油菜品種相對較少的主要原因是油菜菌核病沒有抗原，沒有對油菜菌核病完全免疫的種質(zhì)和品種，甚至難以選育有效并穩(wěn)定達到高抗水平的油菜品種。沒有高感品種，說明品種審定中的菌核病抗性鑒定對于淘汰高感菌核病品種是有效的。通過4年鑒定結(jié)果的綜合分析可以看出，同一個品種在年度間的相對抗性指數(shù)會有差異，但整體而言，各油菜品種在相鄰年度間人工接種鑒定所處的抗性級別相對穩(wěn)定，表明通過牙簽人工莖桿接種鑒定的方式篩選和鑒定抗（耐）菌核病品種及開展抗（耐）菌核病種質(zhì)篩選有效。

油菜是我國重要的油料作物，隨著油菜機械化水平的逐年提高，對油菜品種的抗（耐）菌核病能力提出了更高要求。開展油菜菌核病相關(guān)研究，是油菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要保障。開展抗（耐）菌核病品種選育是減輕油菜菌核病危害最直接、經(jīng)濟、有效且環(huán)保的措施。本研究也表明，油菜抗（耐）菌核病能力的相對穩(wěn)定性，今后應(yīng)加大對油菜抗（耐）菌核病品種資源的篩選鑒定研究和抗（耐）菌核病品種的選育工作。

參考文獻

[1]王璐璐.貴州地方油菜種質(zhì)資源菌核病的抗性鑒定與評價[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（4）：42-46.

[2]張立良，沈維冰，劉成社，等.油菜菌核病發(fā)生、危害與氣象因子關(guān)系[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2000，28（6）：776，793.

[3]姜道宏，李國慶，付艷平.盾殼霉控制油菜菌核病菌再侵染及其葉面存活動態(tài)的研究[J].植物病例學(xué)報，2000，30（1）：60-65.

[4]鄭之寬.安徽油菜[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000，379-381.

[5]陳利鋒，徐敬友.農(nóng)業(yè)植 物病理學(xué)（南方本）[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2001：211.

[6]朱宗河，陳莉，丁克堅，等.DB34/T 2487-2015，油菜品種抗菌核病鑒定技術(shù)規(guī)范[S].

（責(zé)編：王慧晴）