王霜，楊正國，楊波，鄭金亮，賈偉，趙金娟

(解放軍第一四八醫(yī)院內(nèi)分泌科，山東 淄博 255300)

糖尿病腎病 (DN) 是常見的糖尿病并發(fā)癥之一，發(fā)病率大于0.005%，并且近年來發(fā)病率呈逐年上升的趨勢[1]。DN的長期發(fā)生發(fā)展嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，可以導(dǎo)致患者不良臨床結(jié)局，預(yù)后較差[2]。分子生物學(xué)研究顯示，分子水平的相關(guān)生物學(xué)因子的改變，可以造成腎小球或者腎臟基底膜的損傷，進(jìn)而促進(jìn)DN的發(fā)生發(fā)展，對于相關(guān)致病因子的研究，可以為揭示DN的發(fā)病機(jī)制、DN的臨床預(yù)后評估提供理論參考。血清三葉因子3(TEF3)是三葉因子家族重要成員之一，能夠通過對下游炎性因子白細(xì)胞介素-6(IL-6)等的誘導(dǎo)激活，促進(jìn)病情的發(fā)生進(jìn)展[3]?，F(xiàn)探討DN患者血清TEF3表達(dá)水平的變化及其與患者細(xì)胞炎性因子等的相關(guān)關(guān)系，以期為同行提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料回顧性分析2015年3月至2016年8月在解放軍第一四八醫(yī)院接受治療的DN患者的臨床資料。DN患者的納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡≥18歲；(2)符合DN的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(3)無心臟、腦、肺等其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床資料不完整者；(2)合并糖尿病急性并發(fā)癥(高滲性昏迷、糖尿病酮癥酸中毒)等。根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)共納入DN患者45例，其中男性27例，女性18例，年齡(56.35±3.12)歲，年齡范圍為45～72歲。同期選擇院內(nèi)體檢正常者為對照組。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡≥18周歲；(2)無心、肝、肺等系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者。排除標(biāo)準(zhǔn)：有腎實(shí)質(zhì)病變者。根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)共納入對照組40例，其中男性25例，女性15例，年齡(56.31±3.35)歲，年齡范圍為43～74歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)解放軍第一四八醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。

1.2方法所有患者清晨采集空腹靜脈血，離心分離血清(10 000 r·min-1，離心半徑R=10 cm)，血清-20 ℃保存待測，采集標(biāo)本后1周內(nèi)采用瑞士羅氏全自動生化分析儀E170模塊檢測血清TEF3、白細(xì)胞介素-18(IL-18)、IL-6和超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)，檢測試劑盒購自上海泰康生物科技有限公司；采用電化學(xué)發(fā)光全自動免疫分析儀(美國雅培i2000)及試劑盒檢測三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和同型半胱氨酸(Hcy)，測定具體檢測方法嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，試劑盒內(nèi)配有質(zhì)控血清或質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品。

1.3評價(jià)指標(biāo)檢測兩組患者血清IL-18、IL-6、hs-CRP、TEF3和TG、TC、LDL-C、HDL-C、Hcy等實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平的差異，分析DN患者TEF3水平與血脂水平和炎性因子的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1兩組血清TEF3、炎性因子水平的比較DN組患者的TEF3、IL-18、IL-6和hs-CRP水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-18.608、-17.817、-21.374、-53.140，P<0.001)。具體數(shù)據(jù)見表1。

表 1 兩組血清TEF3、炎性因子水平的比較

2.2兩組血脂等實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平的比較DN組患者的TG、TC、LDL-C和Hcy水平明顯高于對照組(t=-6.613、-7.692、-7.924、-15.331，P<0.001)，HDL-C水平低于對照組(t=3.974，P<0.001)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。具體數(shù)據(jù)見表2。

表2 兩組血脂等實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平的比較

2.3DN患者TEF3水平與炎性因子和血脂水平的相關(guān)性分析DN患者的TEF3水平與IL-18、IL-6、hs-CRP、TG、TC、LDL-C和Hcy水平正相關(guān)(r=0.465、0.398、0.413、0.382、0.402、0.369、0.352，P=0.012、0.027、0.035、0.019、0.033、0.041、0.025)，而與HDL-C水平負(fù)相關(guān)(r=-0.422，P=0.030)。具體數(shù)據(jù)見表3。

表3 DN患者TEF3水平與炎性因子和血脂水平的相關(guān)分析

3 討論

高血糖狀態(tài)主要通過影響腎臟血流動力學(xué)而致腎臟損害，同時糖尿病患者終末代謝產(chǎn)物也釋放增加，也可促進(jìn)DN的發(fā)生及發(fā)展[4]。DN如長期得不到有效治療，就會出現(xiàn)終末期腎衰竭的表現(xiàn)，包括腎小球硬化、腎小管重吸收、腎小球?yàn)V過功能喪失，導(dǎo)致病死率的上升[5-6]。DN患者行腎小球?yàn)V過率檢查往往無明顯陽性發(fā)現(xiàn)，而腎臟穿刺活檢雖然為診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但屬于有創(chuàng)檢查，且費(fèi)用偏高，不具有臨床篩查價(jià)值。因此尋找有效的血清標(biāo)志物，為DN患者的早期診斷提供新的指標(biāo)或者方法，對于抑制早期DN的病情進(jìn)展，提高早期疾病的診斷水平均具有重要的價(jià)值。

TEF3結(jié)構(gòu)上包含了二巰基共價(jià)鍵和P結(jié)構(gòu)單位，可以通過結(jié)合腎小球基底膜細(xì)胞上的糖蛋白結(jié)合受體，進(jìn)而導(dǎo)致局部腎小球細(xì)胞的氧化應(yīng)激障礙，并且能夠通過促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及單核細(xì)胞等對腎小球基底細(xì)胞的結(jié)合從而導(dǎo)致腎功能的損傷。近年來的研究也顯示，TEF3在誘導(dǎo)下游細(xì)胞炎性因子IL-6、IL-10等的激活方面發(fā)揮了重要的作用，從而加劇了腎單位的缺血性損傷和自身性修復(fù)障礙的過程[7-8]。雖然有研究探討了TEF3在DN患者血清中的異常表達(dá)，但缺乏對于TEF3與DN患者血清炎性因子指標(biāo)關(guān)系的研究，并且樣本量偏少，臨床資料的收集偏倚比較嚴(yán)重，這將影響研究的可信性。

本研究發(fā)現(xiàn)，DN患者血清中的TEF3表達(dá)水平較對照組明顯升高，提示TEF3可能參與了DN的發(fā)生發(fā)展。TEF3表達(dá)水平的上升通過加劇腎小球基底膜間質(zhì)細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)了腎小球的重吸收障礙，進(jìn)而加劇腎臟功能的損傷。Morton等[9-10]回顧性分析了83例DN患者的臨床資料后發(fā)現(xiàn)，DN患者血清TEF3的表達(dá)水平上升25%以上，并且進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)DN患者的腎臟代償功能越差，TEF3的表達(dá)水平升高越高，與本研究的結(jié)論較為相似。hs-CRP及IL-18、IL-6等細(xì)胞炎性因子是DN病情進(jìn)展的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素[4，11-12]，IL-18、IL-6等的上升可以導(dǎo)致DN不良臨床預(yù)后的發(fā)生，本研究發(fā)現(xiàn)IL-18、IL-6等相關(guān)細(xì)胞炎性因子表達(dá)的異常上升可以進(jìn)一步加劇腎小球的氧化應(yīng)激損傷。但需要注意的是，學(xué)者們[5，13]在研究發(fā)現(xiàn)hs-CRP在DN患者血清中并不存在異常表達(dá)，此研究結(jié)果與本研究存在一定的差別，可能與樣本量不足、檢測方法不統(tǒng)一等因素有關(guān)。TG、TC、LDL-C、Hcy等脂蛋白代謝指標(biāo)，在評估DN的過程中具有重要的參考價(jià)值[14-15]，TG、TC等指標(biāo)的上升往往提示病情的惡化，本研究發(fā)現(xiàn)DN組患者的TG、TC、LDL-C和Hcy水平明顯高于對照組，而相關(guān)性分析也發(fā)現(xiàn)，TEF3水平與血清細(xì)胞炎性因子及TG、TC、LDL-C、Hcy水平均呈現(xiàn)了正性相關(guān)關(guān)系，提示TEF3對于DN患者病情的影響可能與通過上調(diào)血清細(xì)胞炎性因子或者TG、TC等脂蛋白代謝有關(guān)，但具體的機(jī)制仍然需要進(jìn)一步探討。

綜上所述，在DN患者血清中，TEF3的表達(dá)明顯上升，同時TEF3與IL-18、IL-6、hs-CRP、TG、TC、LDL-C和Hcy等具有顯著的相關(guān)性，臨床上后續(xù)研究可以增加對于TEF3在DN患者病情評估或者臨床預(yù)后參考中的診斷學(xué)價(jià)值分析。