陳士朋 姜 健 光斌熊 周迎春

(遼寧工業(yè)大學化學與環(huán)境工程學院，遼寧 錦州 121001)

膽紅素是制造人工牛黃的主要原料，也是分析化學及生化研究的重要試劑。同時膽紅素在醫(yī)學領域有著廣泛和重要的用途，因此市場上對膽紅素的需求量要求巨大。但膽紅素價格昂貴，而且工業(yè)上提取膽紅素的收率并不理想，因此探求一種較高收率的膽紅素提取方法成為了人們關注的焦點。所以本文對從豬膽中提取膽紅素的條件進行了研究。

1 實驗部分

1.1 藥品與儀器

原料和藥品：新鮮豬膽汁、氫氧化鈉、鹽酸、亞硫酸氫鈉、氯仿、冰乙酸、無水乙醇、乙醇、氧化鈣鹽鈣、偏重亞硫酸鈉。

儀器：數(shù)顯恒溫水浴鍋、磁力加熱攪拌器、電子天平、電子分析天平、電熱鼓風干燥箱、酸度計等。

1.2 膽紅素提取過程

1.2.1 鈣鹽法提取膽紅素過程：

取豬膽汁100mL于燒杯中，加入新配石灰乳，加熱至沸，將鈣鹽沖洗，濾干。加蒸餾水調成糊狀，加入1%的偏重亞硫酸鈉，攪拌并快速加入冰乙酸，靜置，過濾。濾渣用氯仿溶解，水浴回流提取至氯仿液無色為止?；厥章确?，加無水乙醇，抽干，產品用少量乙醇洗至流出液不顯綠色。于60℃真空干燥即得膽紅素精品。

1.2.2 直接法提取膽紅素過程：

取豬膽汁100mL于燒杯中，加入氯仿，加熱。加入NaOH溶液，調pH值，冷卻。加入適量亞硫酸氫鈉、氯仿，調節(jié)pH值。靜置，放出氯仿溶液，重復上述步驟，將兩次萃取所得溶液合并轉移至蒸餾瓶中。加入適量亞硫酸氫鈉，蒸餾，回收氯仿。加入少量無水乙醇，繼續(xù)蒸餾。至無氯仿氣味時停止蒸餾。將懸浮液過濾，蒸餾瓶用適量乙醇洗滌，洗滌液合并過濾。用蒸餾水和乙醇各洗滌1～2次，在濾紙上干燥，得膽紅素晶體，裝入棕色玻璃瓶中避光低溫保存。

所得產品用熔點法測定熔點，與膽紅素熔點理論值192℃進行比較。

2 結果與討論

2.1 提取方法對膽紅素收率的影響

保持相同的提取條件，以100ml豬膽汁為原料，水解溫度90℃，水解pH10，水解時間30min，分別采用鈣鹽法和直接法提取了膽紅素，實驗結果如圖1所示。由圖1可以看出，利用直接法提取膽紅素所得的收率較高，較鈣鹽法相比方法更為簡單，時間相對較短，所以直接法提取膽紅素較好。

圖1 提取方法對膽紅素收率的影響

圖2 水解時間對膽紅素收率的影響

2.2 水解時間對膽紅素收率的影響

直接法提取過程中，保持相同的提取條件，考察水解時間分別為10min，20min，30min，40min，50min時對膽紅素收率的影響。實驗結果如圖2所示。由圖2可以看出，當水解時間為30min左右時膽紅素的收率最高。如果水解時間過短，豬膽汁中的膽紅素水解不完全。如果水解時間過長，已經形成的膽紅素會被氧化為膽綠素，會使膽紅素的收率降低。所以，水解時間30min為宜。

2.3 水解溫度對膽紅素收率的影響

保持相同的提取條件，考察水解溫度分別為80℃，85℃，90℃，95℃，100℃下對膽紅素的收率的影響。實驗結果如圖3所示。由圖3可看出，當水解溫度為85℃左右時膽紅素的收率最高。溫度過高會引起膽紅素的氧化，難以分離，也會帶走部分含有膽紅素的水解液。而溫度過低，則會使提取時間延長，同樣引起膽紅素的氧化損失。所以，膽紅素在水解溫度為85℃時，收率最高。

2.4 水解pH對膽紅素收率的影響

保持相同的提取條件，考察水解pH分別在8、9、10、11、12下對膽紅素的收率的影響。實驗結果如圖4所示，當水解pH為11左右時膽紅素的收率最高。若水解pH過低，膽汁水解不完全，一部分膽紅素會以葡萄糖醛酸膽紅素酯的形式存在，從而降低膽紅素的收率。而水解pH過高，容易被氧化為膽綠素，過量的堿也會與膽汁形成膽汁酸鹽膠體與膽紅素互溶，從而降低了膽紅素的收率。所以當水解pH為11左右時膽紅素的收率最高。

圖4 水解pH對膽紅素收率的影響

3 結論

以豬膽為原料，采用直接法提取膽紅素，提取膽紅素的最佳提取條件為：水解時間30min，水解溫度85℃，水解pH11，膽紅素收率最高，可達到83.35%。