唐 迪，常 庚，董 翔，張炳蔚

(1. 解放軍大連療養(yǎng)院付家莊醫(yī)院 全軍神經(jīng)系統(tǒng)疾病康復中心，遼寧 大連 116013；2. 大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，遼寧 大連 116011)

肌萎縮側(cè)索硬化(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)是一組累及上、下運動神經(jīng)元的進行性神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，臨床主要表現(xiàn)為肌肉無力和萎縮、延髓麻痹及錐體束征[1]。該病多中年起病，病程2～6年，多死于呼吸肌麻痹[1]。臨床及基礎(chǔ)實驗證實，氧化應激是肌萎縮側(cè)索硬化重要的發(fā)病機制[2]。超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)是重要的抗氧化蛋白，在帕金森病、阿爾茨海默病患者的血清中明顯降低[3]。本研究收集肌萎縮側(cè)索硬化62例患者的臨床資料，旨在探討肌萎縮側(cè)索硬化患者血清SOD和GSH-Px水平與年齡、性別、病情輕重、病變部位、病程之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2011年2月至2014年2月在大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院治療的肌萎縮側(cè)索硬化患者62例,男39例,女23例,年齡36～71歲,平均(46.1±7.4)歲,就診時病程6個月～5年，平均19個月。均符合世界神經(jīng)病學聯(lián)盟Escorial修訂版診斷標準[4],并排除以下情況：頸椎病、脊髓壓迫癥、脊髓空洞癥、多灶性運動神經(jīng)病、進行性脊肌萎縮癥、運動軸索性周圍神經(jīng)病、副瘤性肌萎縮側(cè)索硬化、平山病、脊髓灰質(zhì)炎后遺癥等。

根據(jù)患者年齡分為老年組(≥60 歲，18例)和中青年組(36～59歲，44例)。按病程分為病程較短組(<1.5 年，34例)和較長組(≥1.5 年，28例)。按起病部位分為上肢起病組(33例)，下肢起病組(18例)，球部起病組(11例)。采用ALS功能等級評分(amyotrophic lateral sclerosis functional rating scale, ALS-FRS)評定病情嚴重程度[5]。按病情輕重分為輕中度病情組(43例)和重度病情組(19例)。

1.2 方 法

血清SOD和GSH-Px水平的檢測：清晨空腹采集靜脈血4 mL,分離血清置-80 ℃冰箱保存, 待同一時間檢測。操作步驟按說明書，測定試劑盒購自南京建成公司，SOD水平測定采用黃嘌呤氧化酶法，GSH-Px水平測定采用二硫代二硝基苯甲酸法。

比較各組間血清SOD和GSH-Px水平的差異。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結(jié) 果

2.1 不同性別組間血清SOD、GSH-Px水平比較

不同性別患者血清SOD、GSH-Px水平無明顯差異(P>0.05)。見表1。

表1不同性別組間血清SOD、GSH-Px水平比較

Tab 1 Comparison of serum SOD and GSH-Px levels between different gender groups

組別n SOD (U/mL)GSH-Px (nmol/L)男性組 39 35.41±5.62 17.42±3.17女性組 23 37.51±6.14 16.99±2.54t 1.246 1.651P>0.05 >0.05

2.2 不同年齡組間血清SOD、GSH-Px水平比較

不同年齡患者血清SOD、GSH-Px水平無明顯差異(P>0.05)。見表2。

表2不同年齡組間血清SOD、GSH-Px水平比較

Tab 2 Comparison of serum SOD and GSH-Px levels between different age groups

組別n SOD (U/mL) GSH-Px (nmol/L)中青年組 44 35.49±4.36 17.48±1.79老年組 18 37.89±7.51 16.71±1.46 t 1.303 1.624 P>0.05 >0.05

2.3 不同病程組間血清SOD、GSH-Px水平比較

病程較長組患者血清SOD、GSH-Px水平低于病程較短組患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3不同病程組間血清SOD、GSH-Px水平比較

Tab 3 Comparison of serum SOD and GSH-Px levels between different course groups

組別n SOD (U/mL) GSH-Px (nmol/L)病程較短組 34 39.05±7.24 19.63±3.15病程較長組 28 32.71±4.53 14.35±2.94t 2.413 2.157P <0.05 <0.05

2.4 不同發(fā)病部位組間血清SOD、GSH-Px水平比較

三組之間在血清SOD、GSH-Px水平上無明顯差異(P>0.05)。見表4。

表4不同發(fā)病部位組間血清SOD、GSH-Px水平比較

Tab 4 Comparison of serum SOD and GSH-Px levels among different locations

組別 n SOD (U/mL) GSH-Px (nmol/L)上肢起病組 33 36.29±3.15 17.18±3.25下肢起病組 18 35.69±4.08 17.65±2.17球部起病組 11 36.72±4.71 16.82±3.54t 0.847 1.051P >0.05 >0.05

2.5 不同病情組間血清SOD、GSH-Px水平比較

重度病情組患者血清SOD、GSH-Px水平低于輕中度病情組患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表5。

表5不同病情組間血清SOD、GSH-Px水平比較

Tab 5 Comparison of serum SOD and GSH-Px levels between different disease groups

組別nSOD (U/mL)GSH-Px (nmol/L)重度病情組4340.23±6.52 18.83±2.14輕中度病情組1934.41±5.3113.71±3.25 t2.3912.453 P<0.05<0.05

3 討 論

氧化應激是肌萎縮側(cè)索硬化重要的發(fā)病機制之一[6-7]。由于機體內(nèi)抗氧化能力下降，不能有效清除自由基，導致自由基水平急劇升高, 從而引發(fā)一定程度的脂質(zhì)過氧化反應，誘導運動神經(jīng)細胞變性壞死[6]。臨床和基礎(chǔ)實驗證實，患者和轉(zhuǎn)基因小鼠的脊髓運動神經(jīng)細胞中存在過量的氧化損失標記,抗氧化物的含量也明顯降低。SOD是一種金屬蛋白酶，是體內(nèi)最重要的過氧化物分解酶,它能將氧自由基歧化為H2O2，H2O2進一步在過氧化氫酶(CAT)的催化下被清除[8]。研究表明,不僅體內(nèi)SOD 的含量降低會影響疾病的發(fā)生發(fā)展,而且SOD 的突變也是肌萎縮側(cè)索硬化發(fā)病的重要機制[9]。GSH-Px具有清除體內(nèi)氧自由基的作用，可促使體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物的分解，也是反映機體抗氧化能力的一個重要指標[10-11]。

我們前期研究顯示：肌萎縮側(cè)索硬化患者的血清SOD和GSH-Px的水平明顯低于健康人, 表明體內(nèi)氧化系統(tǒng)被激活, 抗氧化系統(tǒng)受抑制, 氧自由基大量生成而不能有效清除，提示氧化應激是導致肌萎縮側(cè)索硬化的重要發(fā)病機制[12]。本研究結(jié)果顯示：血清SOD、GSH-Px水平在不同性別，年齡和發(fā)病部位間沒有明顯差別；病情較長組和重度病情組的血清SOD、GSH-Px水平較病情較短組和中輕度病情組有所下降。SOD、GSH-Px水平是評價機體抗氧化能力的重要指標，SOD、GSH-Px水平下降代表機體抗氧化功能下降，不能有效清除自由基等過氧化物，細胞保護和抗氧化損失機制不足[8]。隨著病程延長和病情的進展，SOD、GSH-Px水平不斷下降，最終導致運動神經(jīng)細胞的變性壞死。患者血清的SOD、GSH-Px水平越低，運動神經(jīng)細胞抵御氧化損傷的能力越差，病情越嚴重。病情長，機體內(nèi)抗氧化酶消耗大，血清的SOD、GSH-Px水平低下。這種規(guī)律性變化，可作為估計病情、判斷療效的動態(tài)指標之一應用于臨床。

綜上所述，氧化應激是肌萎縮側(cè)索硬化重要的發(fā)病機制，在臨床上，SOD和GSH-Px的檢測可作為肌萎縮側(cè)索硬化患者評價療效、估計病情及判斷預后的動態(tài)參考指標。