吳雪峰,孫洪帥,李曉鷗,于秀艷

(吉林省腫瘤醫(yī)院 檢驗(yàn)科,吉林 長(zhǎng)春130012)

CD147又稱為細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN),是由Biswas等[1]發(fā)現(xiàn)的含有269個(gè)氨基酸的跨膜糖蛋白,屬于免疫球蛋白超家族(IgSF)成員[2]。CD147 分子廣泛存在于人體諸多組織器官中,有研究證實(shí),CD147分子在腫瘤細(xì)胞中的高表達(dá)與腫瘤的分化程度、浸潤(rùn)以及轉(zhuǎn)移有關(guān)。CD147 通過(guò)與基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)結(jié)合,降解腫瘤細(xì)胞外基質(zhì),從而促進(jìn)腫瘤的浸潤(rùn)及播散[3,4]。CD147與MMP作用的同時(shí)又可產(chǎn)生VEGF,刺激腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞,促進(jìn)腫瘤血管重建,增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的增殖及侵襲能力[5-7]。本研究通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)方法檢測(cè)六種腫瘤患者血清中CD147水平,比較和健康對(duì)照組的差別并分析其臨床意義。

1 材料與方法

1.1一般資料

選取2017年3月-9月在吉林省腫瘤醫(yī)院住院就診且行手術(shù)治療,術(shù)后經(jīng)病理確診患者為研究對(duì)象。卵巢癌26例、宮頸癌21例、肺癌19例、結(jié)直腸癌33例、肝癌28例、乳腺癌35例,男55例,女107例,年齡36-75歲,中位年齡53歲；同期收集健康體檢者血清20例,年齡28-65歲,中位年齡41歲。所有患者入院前均未行放療、化療或其他治療,無(wú)高血壓、心臟病、高血脂、糖尿病等疾病。各組間年齡、性別差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法

患者均清晨空腹采靜脈血3 ml于含促凝劑采血管中,4 000 r/min,離心5分鐘,取血清于-70 ℃冰箱凍存。人CD147 ELISA試劑盒購(gòu)自武漢云克隆科技股份有限公司；安圖PHOMO型酶標(biāo)儀,安圖iWO-960型洗板機(jī)。采用ELISA方法檢測(cè)腫瘤患者血清中CD147蛋白水平含量,所有試驗(yàn)步驟均按說(shuō)明書(shū)操作,每個(gè)樣本均設(shè)復(fù)孔進(jìn)行檢測(cè),測(cè)得數(shù)值使用軟件GraphPad Prism 5作圖分析。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線

如圖1,以濃度為31.2、62.5、125、250、500、1000、2000 pg/ml為縱坐標(biāo),以測(cè)出的OD值為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其曲線為：y=624.99x-33.666,R2=0.9956,結(jié)果顯示線性良好。

圖1 CD147濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2腫瘤患者血清CD147水平變化

卵巢癌、宮頸癌、肺癌、結(jié)直腸癌、肝癌和乳腺癌組患者血清中CD147含量明顯高于健康對(duì)照組(如表1),其數(shù)值相對(duì)應(yīng)的柱狀圖顯示見(jiàn)圖2,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),各腫瘤組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3 討論

國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道[8-14],CD147存在于多種腫瘤細(xì)胞表面,與宮頸癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、肝癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、胃癌、甲狀腺癌、白血病、腦膠質(zhì)瘤和前列腺癌等多種惡性腫瘤相關(guān),而且隨著腫瘤惡性程度的增高,CD147表達(dá)也隨之增高。CD147通過(guò)成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞分泌MMPs,從而降解細(xì)胞外基質(zhì),參與腫瘤的浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移[15]。有研究報(bào)道[16],CD147可以上調(diào)VEGF,促進(jìn)肺癌細(xì)胞血管生成,從而增加肺癌細(xì)胞再生和侵襲能力,也提示CD147分子可能是治療肺癌的一個(gè)靶點(diǎn)。抑制CD147也成為治療惡性黑色素瘤的一種新策略[17]。高表達(dá)CD147提示胃癌患者分期越晚,預(yù)后越不好[18]。也有研究報(bào)道,CD147 通過(guò)促進(jìn)MMPs的生成,增加肝癌的侵襲及轉(zhuǎn)移能力[10,19]。CD147在卵巢癌中呈現(xiàn)高表達(dá)并與腫瘤的血管生成、侵襲、轉(zhuǎn)移及抗藥等生物學(xué)行為相關(guān),使腫瘤表現(xiàn)出惡性傾向[20]。

表1 各組腫瘤患者血清中CD147水平

注:與健康對(duì)照組比較，**P<0.01

本研究隨機(jī)選取腫瘤患者162例,抽取血清進(jìn)行實(shí)驗(yàn),卵巢癌(195.41±73.66)、宮頸癌(161.52±65.58)、肺癌(169.49±69.17)、結(jié)直腸癌(190.73±77.40)、肝癌(198.87±86.24)和乳腺癌(188.95±71.27)組患者血清中CD147含量明顯高于健康對(duì)照組(102.30±38.99),且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本實(shí)驗(yàn)為小樣本實(shí)驗(yàn),還需大樣本來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證其價(jià)值。