逵 艷

(南陽市中心醫(yī)院 肝膽普外科，河南 南陽473000)

近年臨床研究發(fā)現(xiàn)高爾基體糖蛋白73(GP73)與原發(fā)性肝細(xì)胞癌(PHC)關(guān)系密切，作為肝癌的診斷標(biāo)志物具有良好的敏感性和特異性[1-5]。本文主要對(duì)肝癌患者血清GP73變化及對(duì)癌細(xì)胞增殖、侵襲能力的影響進(jìn)行研究，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

選取2016年6月—2017年6月期間在我院確診的60例肝癌患者為肝癌組，肝癌組男51例，女9例，年齡42-89歲，平均(61.19±7.80)歲，其中≥65歲者49例；腫瘤直徑0.2-8 cm，平均(5.12±0.87) cm，其中≥5 cm者46例；細(xì)胞分化程度：低+中分化36例，高分化24例；TNM分期Ⅰ-Ⅱ期21例，Ⅲ-Ⅳ期39例；門靜脈癌栓11例，脈管侵犯29例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者28例；AFP水平212-863 ng/ml，平均(523.95±213.95)ng/ml，其中≥400 ng/ml者38例，HBsAg陽性54例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者在納入研究前未接受化療、放療等輔助治療；(2)未合并有其他惡性腫瘤；(3)非妊娠期及哺乳期婦女。選取同期門診健康體檢正常的中老年人60例為對(duì)照組，其中男44例，女16例，年齡40-85歲，平均(58.47±7.25)歲，其中≥65歲者41例。兩組在性別、年齡等方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法

兩組均抽取空腹外周靜脈血8 ml置于2個(gè)試管內(nèi)。一份置入有惰性分離膠的進(jìn)口真空采血管內(nèi)，另一份置于另一個(gè)真空采血管內(nèi)，室溫下靜置0.5小時(shí)后以4 000 r/min轉(zhuǎn)速離心處理15 min，分離血清。采取雙抗體免疫酶聯(lián)吸附法檢測GP73、基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)濃度水平，檢測試劑盒購自北京熱景公司及北京中杉金橋生物計(jì)算有限公司。GP73診斷肝癌的臨界值(cut off值)參考相關(guān)文獻(xiàn)，以85.5 ng/ml作為cut-off值[5]。根據(jù)cut off值計(jì)算GP73診斷肝癌的敏感度。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)性分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組血清GP73、MMP-2、MMP-9水平比較及GP73診斷肝癌的敏感度

肝癌組血清GP73、MMP-2和MMP-9水平明顯高于對(duì)照組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。以85.5ng/ml作為cut-off值時(shí)，GP73診斷肝癌的敏感度最高，為85.00%(51/60)。

表1 兩組血清GP73水平比較

2.2肝癌患者血清GP73水平與臨床病理特征

肝癌患者性別、年齡、門靜脈癌栓與血清GP73水平無關(guān)，患者細(xì)胞分化為低+中分化、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、有脈管侵犯和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)血清GP73水平明顯升高(P<0.05)，見表2。

2.3肝癌患者血清GP73與MMP-2、MMP-9的相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)性分析顯示患者血清GP73與MMP-2、MMP-9間存在正相關(guān)性(r=0.83，r=0.72，P<0.05)。

3 討論

GP73為高爾基體糖蛋白，編碼基因在第9號(hào)染色體，主要在膽管上皮細(xì)胞表達(dá)，正常人肝細(xì)胞中表達(dá)量極微，在發(fā)生急慢性肝炎、肝硬化及肝癌等肝臟疾病時(shí)GP73表達(dá)會(huì)明顯上調(diào)。陳默等研究顯示GP73基因沉默能抑制肝癌細(xì)胞的遷移及侵襲[6]，同時(shí)還可抑制MMP-2及MMP-9的表達(dá)水平，認(rèn)為可能是通過下調(diào)MMP-2及MMP-9的表達(dá)有關(guān)；殷盈祥研究顯示肝癌組織中GP73表達(dá)明顯高于癌旁組織[7]，肝癌患者血清GP73水平明顯高于正常人群，同時(shí)研究還顯示肝癌組織中GP73表達(dá)上調(diào)與JAK-STAT通路的激活有關(guān)；王媛媛等研究顯示[8]，肝癌患者治療后血清GP73表達(dá)較治療前明顯下調(diào)，提示肝癌患者GP73表達(dá)與患者病情密切相關(guān)。本研究對(duì)肝癌患者血清GP73變化及對(duì)癌細(xì)胞增殖、侵襲能力的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示以85.5 ng/ml作為cut-off值時(shí)，GP73診斷肝癌的敏感度為85.00%，可以看出GP73診斷肝癌的敏感度較高，與臨床報(bào)道的診斷敏感度接近，分析患者血清GP73的變化，結(jié)果顯示肝癌患者血清GP73、MMP-2、MMP-9水平明顯高于正常人群，提示肝癌患者明顯存在GP73、MMP-2、MMP-9表達(dá)上調(diào)。MMP-2及MMP-9臨床大量研究顯示與腫瘤的侵襲、遷移、血管生成等有關(guān)[9,10]，將肝癌患者血清GP73水平與患者臨床病理特征進(jìn)行分析，結(jié)果顯示肝癌患者性別、年齡、門靜脈癌栓與血清GP73水平無關(guān)，患者細(xì)胞分化為低+中分化、TNM分期III-IV期、有脈管侵犯、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)血清GP73水平明顯升高，肝癌細(xì)胞惡性程度高、分期高及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等情況下患者血清GP73普遍存在高表達(dá)顯示，提示GP73高表達(dá)與肝癌的惡性程度關(guān)系密切，同時(shí)Spearman相關(guān)性分析顯示患者血清GP73與MMP-2、MMP-9間存在正相關(guān)性，進(jìn)一步提示GP73與肝癌細(xì)胞的增殖及侵襲有關(guān)。

表2 肝癌患者血清GP73水平與臨床病理特征

綜上所述，肝癌患者血清GP73明顯升高，可能是通過上調(diào)MMP-2、MMP-9表達(dá)來促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖及侵襲。