楊秀靜，高 勇，王興業(yè)，孫士明，周亞丹，才奇博，朱月平

(齊齊哈爾醫(yī)學院附屬第三醫(yī)院 檢驗科，黑龍江 齊齊哈爾161000)

腦動脈瘤(Cerebral aneurysm,CA)是由于局部血管異常改變導致的腦血管瘤樣突起，是引發(fā)腦出血的常見病因。據(jù)統(tǒng)計，每年發(fā)生的腦出血病例中有三分之一是由腦動脈瘤破裂引起的[1,2]。CA的死亡率、致殘率較高，是危害人類健康的嚴重疾病。研究表明：CA的發(fā)生與多種因素有關。其中高血壓、動脈硬化被認為是主要危險因素[3,4]。血清胱抑素C(Cystain C,CysC)是一種低分子量蛋白質，屬于第二家族半胱氨酸蛋白酶抑制家族。相對分子質量為13 kD，由120個氨基酸組成[5]。CysC的表達失衡是動脈粥樣硬化、高血壓、動脈瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素。且有研究表明CysC可以做為預測CA發(fā)生及程度變化的診斷指標[6,7]。視黃醇結合蛋白(retinol binding protein,RBP)是在體內負責結合并轉運維生素A視黃醇類活性代謝物的一類蛋白質[8]。研究表明：在單純性高血壓、肥胖性高血壓、妊娠期高血壓患者中RBP表達量明顯升高[9-11]。同時高血壓是CA發(fā)生的重要危險因素。因此對于CA患者血清中RBP和CysC的含量是否會發(fā)生變化以及CysC和RBP聯(lián)合檢測對于早期診斷CA是否有臨床意義，仍需進一步研究。

1 對象與方法

1.1研究對象觀察組隨機選擇2015年09月至2017年09月在齊齊哈爾醫(yī)學院附屬第三醫(yī)院神經(jīng)外科住院經(jīng)CTA或MRA或DSA確診的CA患者108例，年齡47±17歲，對照組隨機選擇同期健康體檢者90例，年齡50±20歲。

觀察組入選標準應符合如下條件：1)沒有任何影響檢測結果的生理指征；2)在檢測前一周內未服用藥物或飲食治療；3)身體發(fā)育及精神正常，無肝臟疾病、內分泌疾病、泌尿系疾病、營養(yǎng)及代謝性疾病、腎臟疾?。?)近半年內沒有輸血和手術史；5)無酗酒史，無節(jié)食、素食、特殊飲食習慣；6)無急慢性感染。

1.2樣本采集及檢測方法受試對象清晨空腹采集靜脈血3.5 ml置生化采血管中，放置20 min，3 000 r/min離心5 min，剔除不合格標本(溶血、脂血和黃疸)，血清保存?zhèn)溆谩２捎媚z乳免疫比濁法測定CysC和RBP水平。CysC參考區(qū)間為0.00-1.03 mg/L，RBP參考區(qū)間為36.0-72.0 mg/L。

1.3儀器與試劑檢測儀器為美國貝克曼AU5800全自動生化分析儀，CysC和RBP檢測試劑、校準品和質控品均為北京九強生物公司生產(chǎn)。

1.4質量控制美國貝克曼AU5800全自動生化分析儀由廠家每年校準一次，精密度、準確度、分析測量范圍等檢測均按照行業(yè)標準嚴格執(zhí)行。參加國家衛(wèi)生計生委臨床檢驗中心及黑龍江省臨床檢驗中心的室間質量評價及能力驗證均合格。每日按要求進行室內質量控制，室內質控的變異系數(shù)在允許范圍內方進行試驗。

2 結果

2.1血清CysC與RBP的檢測結果水平比較及單一檢測項目陽性率與聯(lián)合檢測陽性率比較

將受試對象血清檢查結果進行統(tǒng)計分析，血清CysC與RBP的數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，對比發(fā)現(xiàn)，觀察組患者CysC和RBP水平與對照組比較明顯增高，統(tǒng)計學具有顯著差異(P<0.01)，見圖1。觀察組CysC和RBP濃度大部分均高于正常高值之上，而對照組CysC和RBP濃度大部分落在0.80 mg/L和60 mg/L附近，處于正常參考值范圍內。

圖1 血清CysC與RBP的檢測結果水平比較

兩者聯(lián)合檢測陽性(即聯(lián)合檢測時其中一項為陽性時即判定為聯(lián)合檢測陽性)，將CysC和RBP聯(lián)合檢測其陽性率75%,單獨CysC檢測或者單獨一項RBP檢測其陽性率在60%附近，明顯低于聯(lián)合檢測的陽性率，統(tǒng)計學具有顯著差異(P<0.05)。見表1。

表1 觀察組與對照組2項結果比較

與對照組比較:*P<0.01;與聯(lián)合檢測陽性率比較:#P<0.05

根據(jù)表2判斷，聯(lián)合檢測CysC和RBP可以提高CA檢出率的靈敏性。因此，聯(lián)合檢測CysC和 RBP水平對于篩選腦動脈瘤的發(fā)生有一定的臨床意義。

表2 聯(lián)合檢測對腦動脈瘤檢測的價值

將對照組與觀察組共198例患者的基本信息進行統(tǒng)計，結果如表3。發(fā)現(xiàn)觀察組的女性比例，有吸煙史者比例均高于對照組(P<0.05),因此，考慮性別、吸煙是CA發(fā)生的危險因素。

表3 兩組性別、吸煙情況比較[n(%)]

與對照組相比，#P<0.05；觀察組間性別相比，**P<0.01

3 討論

CA是蛛網(wǎng)膜下腔出血的最常見病因。研究結果證實性別、高血壓及吸煙史是引發(fā)CA發(fā)生的危險因素。女性發(fā)生CA的危險度是男性的2倍左右，高血壓同時伴有吸煙史的患者CA發(fā)病率顯著增多。另外，已被證實動脈硬化癥是動脈瘤的主要危險因素。動脈硬化的發(fā)展包括脂質浸潤、血小板活化、血栓形成、內膜損傷、炎性反應、氧化應激、血管平滑肌細胞激活、選擇性基質代謝及血管壁重構等過程。其中，炎性反應在動脈硬化的發(fā)生與發(fā)展中起了重要作用，當血管壁損傷時炎性細胞因子增加，炎性反應介質的刺激促進血管平滑肌細胞分泌組織蛋白酶S及K等，使得這類具有促彈性組織解離特性的半胱氨酸蛋白酶在動脈彈力蛋白損傷處過度表達[12]。而CysC可以強烈地抑制這些半胱氨酸蛋白酶表達。因此，當動脈粥樣硬化發(fā)生時，CysC可應激性增高[13]。同時CysC 與其組織蛋白酶表達失衡就會促進動脈瘤形成，進而促使動脈瘤增長，甚至破裂[14,15]。因此，CysC水平可在一定程度上反應動脈瘤發(fā)生的可能性。統(tǒng)計數(shù)據(jù)也證實這一理論基礎，超過60%的CA患者有CysC水平增加的現(xiàn)象。RBP是體內的一種重要的轉運蛋白,以往一直被認為只是結合一轉運視黃醇維生素的載體蛋白。近年來發(fā)現(xiàn),它還是一種參與胰島素抵抗的重要脂肪因子，與肥胖、糖尿病及多種心血管危險因素密切相關[16]。它可以抑制內皮細胞的胰島素活性，導致血管舒張依賴的一氧化氮水平減弱，促進血管內皮功能的紊亂。通過炎癥反應及血管內皮功能失調參與動脈粥樣硬化發(fā)生[17]，進而導致動脈瘤產(chǎn)生。

通過統(tǒng)計數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)也有60%CA患者的RBP水平增高。同時發(fā)現(xiàn)有75%的腦動脈瘤患者存在CysC或RBP單一陽性水平，顯著高于非腦動脈瘤患者，大大提高腦動脈瘤檢出的靈敏度。在臨床診療過程中，遇到高血壓且伴有CysC 和(或)RBP增高的患者，在排除高血壓性腎臟損傷后，可高度懷疑CA的發(fā)生。因此，聯(lián)合檢測CysC和RBP水平可一定程度上提高腦動脈瘤檢出率，為腦動脈瘤的早期診斷提供一定的幫助。本研究的局限性：本實驗為回顧性分析，收集的是患有腦動脈瘤的血清標本，沒有對入組個體腦動脈瘤的數(shù)量及大小進行研究，由于本實驗入組標準嚴格，使得樣本收集數(shù)量不足，缺少大樣本統(tǒng)計分析，存在偶然誤差。

綜上所述，在腦動脈瘤高危人群中可以通過聯(lián)合檢測CysC 和RBP的濃度水平，早期提示臨床醫(yī)生注意患者腦動脈瘤的發(fā)生，也可以作為廣大人群的篩查項目，無創(chuàng)風險小，簡單快速，經(jīng)濟壓力小，值得推廣普及。