謝一鋒

摘 要：力竭性運動使運動的機(jī)體耗氧過多，局部組織缺氧、代謝產(chǎn)物堆積，對線粒體的氧化功能產(chǎn)生影響。羅漢果葉片中的黃酮物質(zhì)具有活血化瘀的藥理作用，并有較強的抗氧化性，其抗氧化性優(yōu)于化學(xué)制劑，能有效清除運動導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的過量自由基。本研究擬構(gòu)建力竭運動動物模型，通過離體實驗測試來探索研究羅漢果葉黃酮對運動大鼠心肌線粒體的影響。

關(guān)鍵詞：羅漢果葉黃酮 力竭運動 心肌線粒體 影響

中圖分類號：G807 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2018）04（c）-0227-02

近些年來，黃酮類化合物備受關(guān)注，國內(nèi)外已經(jīng)發(fā)現(xiàn)數(shù)千種黃酮類化合物，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥。對于羅漢果的重要成分黃酮類物質(zhì)，已有的研究表明，黃酮類物質(zhì)具有健胃、保肝利膽、降血脂血壓、降低毛細(xì)血管滲透性、抗炎、抗菌、抗病毒、利尿、治療心血管疾病、類腎上腺素等藥理作用。羅漢果作為一種純天然的中藥材，其毒副作用小，具有很高的安全性。從羅漢果研究部位來看，主要是對羅漢果果實的研究，羅漢果的葉片方面的研究相對較少，種仁、根塊、花朵方面的研究其次。羅漢果葉片中的黃酮提取物與運動相結(jié)合的研究可謂是鳳毛翎角，故本研究將羅漢果葉黃酮對力竭性運動進(jìn)行藥物干預(yù)，系統(tǒng)的探索和分析葉黃酮對運動后的心肌線粒體的影響，力圖能為羅漢果葉黃酮的藥理作用研究提供實驗支持和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗對象

由醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供健康清潔級（SPF級）六周齡SD雄性大鼠50只，體重為129～170g。分籠飼養(yǎng)，每籠5只，飼養(yǎng)籠為鋼絲制品，并配用不銹鋼罩、塑料吸水瓶，自由飲水，飼養(yǎng)溫度控制在（26±4）℃，醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供標(biāo)準(zhǔn)齟齒類混合飼料。

1.2 實驗分組與方案

適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后將SD大鼠隨機(jī)分為5組，安靜組、一次力竭運動組、一次力竭藥物組、多次力竭運動組、多次力竭性藥物組，每組10只。運動模型參照Tanaka等的方法制備，采用急性力竭運動制備運動性心肌損傷模型，運動方式為跑步。運動中采用聲音、光刺激或者毛刷刺激老鼠尾部，極少數(shù)情況下，對偷懶老鼠采取電刺激。

1.3 實驗數(shù)據(jù)處理

所有實驗數(shù)據(jù)采用SPSS Statistics 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，用Excel軟件進(jìn)行繪圖。分析出來的數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±S）表示，組間差異和組內(nèi)差異采用單因素方差分析和多重比較。顯著性差異的水平為P<0.05，極顯著差異水平為P<0.01。

2 大鼠心肌線粒體指標(biāo)測試結(jié)果

如表1所示的測試結(jié)果：與多次力竭運動組相比多次力竭藥物組SOD活性提高，差異非常顯著（P<0.01）。與多次力竭運動組相比，多次力竭藥物組活性下降非常顯著（P<0.01）。與安靜組相比，其他組CAT活性只有多次力竭運動組有非常顯著性差異（P<0.01），與多次力竭運動組相比，CAT活性安靜組活性升高有非常顯著性差異（P<0.01），一次力竭藥物組和多次力竭藥物組有顯著性差異（P<0.05）。與安靜組相比，多次力竭運動組和多次力竭藥物組，GSH活力均下降顯著（P<0.01）；與多次力竭運動組相比，其他組GSH活性均有所上升，安靜組有非常顯著性差異（P<0.01），一次力竭運動組和一次力竭藥物組活力提高顯著（P<0.05）。與安靜組相比，CA2+含量，多次力竭運動組有非常顯著性差異（P<0.01），與多次力竭運動組相比，CA2+含量，安靜組含量降低非常顯著（P<0.01），一次力竭運動組與一次力竭藥物組有顯著差異（P<0.05）。

2.1 力竭性運動對大鼠心肌線粒體SOD的作用

SOD力屬于酶系統(tǒng)，它們可以抑制自由基的生成，防止自由基給機(jī)體帶來的損害。如表1所示，與安靜組相比，一次力竭運動組、一次性力竭藥物組和多次力竭藥物組SOD活性下降，但無顯著性差異，說明一次力竭運動以及長期力竭運動會使體內(nèi)產(chǎn)生自由基。多次力竭運動組SOD活性下降相對明顯，但無顯著性差異，說明一次性力竭運動后，機(jī)體自身對自由基有一定的清除作用，機(jī)體的損傷得到一定的修復(fù)；與多次力竭運動組相比，多次力竭藥物組SOD活性顯著提高，并且高于其他組，一次力竭藥物組SOD活性也高于一次力竭運動組，可能機(jī)制是羅漢果具有抗氧化性，能有效清除自由基，可以提高SOD為主的抗氧化酶活性，減輕力竭運動中引起的自由基增多帶來的損傷，維持細(xì)胞的正常功能。

2.2 力竭性運動對大鼠心肌線粒體MDA的作用

MDA是脂質(zhì)過氧化物之一，它可以反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的情況。通過研究發(fā)現(xiàn)，長時間的力竭運動，可使心肌線粒體中MDA大量增加，引發(fā)疲勞，引起心肌損傷。如表1所示，與安靜組相比，一次力竭運動組、一次力竭藥物組與多次力竭運動組MDA活性升高，力竭藥物組MDA活性最高，說明力竭運動會引起線粒體中的MDA含量增加，尤其是多次力竭運動組將使疲勞累積，心肌發(fā)生損傷。脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA可造成膜內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生鏈?zhǔn)降木酆献饔?，并會引起膜蛋白分子?nèi)和分子間的交聯(lián)，對線粒體膜蛋白功能造成損傷，從而增加了線粒體滲透性轉(zhuǎn)運通道打開的可能性，對細(xì)胞具有嚴(yán)重的損傷作用[1]。與多次力竭運動組相比，多次力竭藥物組活性下降，差異非常顯著（P<0.01），說明羅漢果葉黃酮可以緩解運動引發(fā)的機(jī)體疲勞，從一定程度上保護(hù)心肌線粒體。

2.3 力竭性運動對大鼠心肌線粒體CAT、GSH的作用

研究發(fā)現(xiàn)，長時間大強度力竭運動可導(dǎo)致心肌線粒體抗氧化酶Mn-SOD、GSH-PX和CAT活性顯著降低。如表1所示，與安靜組相比，其他組CAT活性、GSH活性均有所下降，尤其是多次力竭運動組，活性下降均非常顯著（P<0.01），說明力竭運動會引起自由基的產(chǎn)生大于其自身的清除速度，引起自由基堆積；與多次力竭運動組相比，其他組CAT活性、GSH活性均有所提高，安靜組活性升高有非常顯著性差異（P<0.01），一次力竭運動組，沒有顯著性差異，一次力竭藥物組和多次力竭藥物組有顯著性差異（P<0.05），提示羅漢果葉黃酮可能可以清除運動引起的自由基增多。

2.4 力竭性運動對大鼠心肌線粒體CA2+的作用

大量生物學(xué)和醫(yī)學(xué)實驗表明，細(xì)胞代謝異常是引起肌肉結(jié)構(gòu)和機(jī)能變化從而導(dǎo)致疲勞產(chǎn)生的重要因素之一[2]。已有研究表明[3]：力竭運動后，大鼠心肌線粒體CA2+內(nèi)外濃度產(chǎn)生差異，引起線粒體內(nèi)膜通透性改變，導(dǎo)致線粒體轉(zhuǎn)運CA2+發(fā)生明顯變化。如表1所示，與安靜組相比，其他組CA2+含量都有所上升，尤其是多次力竭運動組，有非常顯著性差異（P<0.01），聯(lián)系GSH數(shù)據(jù)，當(dāng)GSH活力上升時，CA2+含量就下降，說明力竭運動會引起機(jī)體疲勞，與相關(guān)文獻(xiàn)一致。與多次力竭運動組相比，多次力竭藥物組數(shù)據(jù)也有所降低，但是沒有顯著性差異?？赡軝C(jī)制是羅漢果葉黃酮可以從一定程度上緩解機(jī)體疲勞，對提高運動能力有幫助。

3 結(jié)語

一次性力竭運動及多次力竭運動會降低SOD、CAT、GSH-PX活性，提高M(jìn)DA、CA2+含量，羅漢果葉黃酮可以提高抗氧化酶活性，有效清除力竭運動引起的自由基過多，阻止脂質(zhì)過氧化，對心肌線粒體的保護(hù)作用比較明顯。

參考文獻(xiàn)

[1] 陸燕玲.耐力運動訓(xùn)練對大鼠心功能及心肌線粒體能量代謝的影響[D].廣西師范大學(xué)，2011.

[2] 丁樹哲，王文信.力竭游泳對大鼠心肌線粒體鈣運輸?shù)挠绊慬J].生物化學(xué)雜志，1995，11（3）：366-367.

[3] Bernardi P，S.Vassanelli，P.V eroness et al. Modulation of the mitochondrial permeability pore.Effect ofprotons and divanlentcations[J].Bio l.chem，1992，267：2934-2939.