謝一鋒

摘 要：力竭性運(yùn)動使運(yùn)動的機(jī)體耗氧過多，局部組織缺氧、代謝產(chǎn)物堆積，對線粒體的氧化功能產(chǎn)生影響。羅漢果葉片中的黃酮物質(zhì)具有活血化瘀的藥理作用，并有較強(qiáng)的抗氧化性，其抗氧化性優(yōu)于化學(xué)制劑，能有效清除運(yùn)動導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的過量自由基。本研究擬構(gòu)建力竭運(yùn)動動物模型，通過離體實(shí)驗(yàn)測試來探索研究羅漢果葉黃酮對運(yùn)動大鼠心肌線粒體的影響。

關(guān)鍵詞：羅漢果葉黃酮 力竭運(yùn)動 心肌線粒體 影響

中圖分類號：G807 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2018）04（c）-0227-02

近些年來，黃酮類化合物備受關(guān)注，國內(nèi)外已經(jīng)發(fā)現(xiàn)數(shù)千種黃酮類化合物，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥。對于羅漢果的重要成分黃酮類物質(zhì)，已有的研究表明，黃酮類物質(zhì)具有健胃、保肝利膽、降血脂血壓、降低毛細(xì)血管滲透性、抗炎、抗菌、抗病毒、利尿、治療心血管疾病、類腎上腺素等藥理作用。羅漢果作為一種純天然的中藥材，其毒副作用小，具有很高的安全性。從羅漢果研究部位來看，主要是對羅漢果果實(shí)的研究，羅漢果的葉片方面的研究相對較少，種仁、根塊、花朵方面的研究其次。羅漢果葉片中的黃酮提取物與運(yùn)動相結(jié)合的研究可謂是鳳毛翎角，故本研究將羅漢果葉黃酮對力竭性運(yùn)動進(jìn)行藥物干預(yù)，系統(tǒng)的探索和分析葉黃酮對運(yùn)動后的心肌線粒體的影響，力圖能為羅漢果葉黃酮的藥理作用研究提供實(shí)驗(yàn)支持和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對象

由醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供健康清潔級（SPF級）六周齡SD雄性大鼠50只，體重為129～170g。分籠飼養(yǎng)，每籠5只，飼養(yǎng)籠為鋼絲制品，并配用不銹鋼罩、塑料吸水瓶，自由飲水，飼養(yǎng)溫度控制在（26±4）℃，醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供標(biāo)準(zhǔn)齟齒類混合飼料。

1.2 實(shí)驗(yàn)分組與方案

適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后將SD大鼠隨機(jī)分為5組，安靜組、一次力竭運(yùn)動組、一次力竭藥物組、多次力竭運(yùn)動組、多次力竭性藥物組，每組10只。運(yùn)動模型參照Tanaka等的方法制備，采用急性力竭運(yùn)動制備運(yùn)動性心肌損傷模型，運(yùn)動方式為跑步。運(yùn)動中采用聲音、光刺激或者毛刷刺激老鼠尾部，極少數(shù)情況下，對偷懶老鼠采取電刺激。

1.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS Statistics 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，用Excel軟件進(jìn)行繪圖。分析出來的數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±S）表示，組間差異和組內(nèi)差異采用單因素方差分析和多重比較。顯著性差異的水平為P<0.05，極顯著差異水平為P<0.01。

2 大鼠心肌線粒體指標(biāo)測試結(jié)果

如表1所示的測試結(jié)果：與多次力竭運(yùn)動組相比多次力竭藥物組SOD活性提高，差異非常顯著（P<0.01）。與多次力竭運(yùn)動組相比，多次力竭藥物組活性下降非常顯著（P<0.01）。與安靜組相比，其他組CAT活性只有多次力竭運(yùn)動組有非常顯著性差異（P<0.01），與多次力竭運(yùn)動組相比，CAT活性安靜組活性升高有非常顯著性差異（P<0.01），一次力竭藥物組和多次力竭藥物組有顯著性差異（P<0.05）。與安靜組相比，多次力竭運(yùn)動組和多次力竭藥物組，GSH活力均下降顯著（P<0.01）；與多次力竭運(yùn)動組相比，其他組GSH活性均有所上升，安靜組有非常顯著性差異（P<0.01），一次力竭運(yùn)動組和一次力竭藥物組活力提高顯著（P<0.05）。與安靜組相比，CA2+含量，多次力竭運(yùn)動組有非常顯著性差異（P<0.01），與多次力竭運(yùn)動組相比，CA2+含量，安靜組含量降低非常顯著（P<0.01），一次力竭運(yùn)動組與一次力竭藥物組有顯著差異（P<0.05）。

2.1 力竭性運(yùn)動對大鼠心肌線粒體SOD的作用

SOD力屬于酶系統(tǒng)，它們可以抑制自由基的生成，防止自由基給機(jī)體帶來的損害。如表1所示，與安靜組相比，一次力竭運(yùn)動組、一次性力竭藥物組和多次力竭藥物組SOD活性下降，但無顯著性差異，說明一次力竭運(yùn)動以及長期力竭運(yùn)動會使體內(nèi)產(chǎn)生自由基。多次力竭運(yùn)動組SOD活性下降相對明顯，但無顯著性差異，說明一次性力竭運(yùn)動后，機(jī)體自身對自由基有一定的清除作用，機(jī)體的損傷得到一定的修復(fù)；與多次力竭運(yùn)動組相比，多次力竭藥物組SOD活性顯著提高，并且高于其他組，一次力竭藥物組SOD活性也高于一次力竭運(yùn)動組，可能機(jī)制是羅漢果具有抗氧化性，能有效清除自由基，可以提高SOD為主的抗氧化酶活性，減輕力竭運(yùn)動中引起的自由基增多帶來的損傷，維持細(xì)胞的正常功能。

2.2 力竭性運(yùn)動對大鼠心肌線粒體MDA的作用

MDA是脂質(zhì)過氧化物之一，它可以反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的情況。通過研究發(fā)現(xiàn)，長時間的力竭運(yùn)動，可使心肌線粒體中MDA大量增加，引發(fā)疲勞，引起心肌損傷。如表1所示，與安靜組相比，一次力竭運(yùn)動組、一次力竭藥物組與多次力竭運(yùn)動組MDA活性升高，力竭藥物組MDA活性最高，說明力竭運(yùn)動會引起線粒體中的MDA含量增加，尤其是多次力竭運(yùn)動組將使疲勞累積，心肌發(fā)生損傷。脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA可造成膜內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生鏈?zhǔn)降木酆献饔茫鹉さ鞍追肿觾?nèi)和分子間的交聯(lián)，對線粒體膜蛋白功能造成損傷，從而增加了線粒體滲透性轉(zhuǎn)運(yùn)通道打開的可能性，對細(xì)胞具有嚴(yán)重的損傷作用[1]。與多次力竭運(yùn)動組相比，多次力竭藥物組活性下降，差異非常顯著（P<0.01），說明羅漢果葉黃酮可以緩解運(yùn)動引發(fā)的機(jī)體疲勞，從一定程度上保護(hù)心肌線粒體。

2.3 力竭性運(yùn)動對大鼠心肌線粒體CAT、GSH的作用

研究發(fā)現(xiàn)，長時間大強(qiáng)度力竭運(yùn)動可導(dǎo)致心肌線粒體抗氧化酶Mn-SOD、GSH-PX和CAT活性顯著降低。如表1所示，與安靜組相比，其他組CAT活性、GSH活性均有所下降，尤其是多次力竭運(yùn)動組，活性下降均非常顯著（P<0.01），說明力竭運(yùn)動會引起自由基的產(chǎn)生大于其自身的清除速度，引起自由基堆積；與多次力竭運(yùn)動組相比，其他組CAT活性、GSH活性均有所提高，安靜組活性升高有非常顯著性差異（P<0.01），一次力竭運(yùn)動組，沒有顯著性差異，一次力竭藥物組和多次力竭藥物組有顯著性差異（P<0.05），提示羅漢果葉黃酮可能可以清除運(yùn)動引起的自由基增多。

2.4 力竭性運(yùn)動對大鼠心肌線粒體CA2+的作用

大量生物學(xué)和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，細(xì)胞代謝異常是引起肌肉結(jié)構(gòu)和機(jī)能變化從而導(dǎo)致疲勞產(chǎn)生的重要因素之一[2]。已有研究表明[3]：力竭運(yùn)動后，大鼠心肌線粒體CA2+內(nèi)外濃度產(chǎn)生差異，引起線粒體內(nèi)膜通透性改變，導(dǎo)致線粒體轉(zhuǎn)運(yùn)CA2+發(fā)生明顯變化。如表1所示，與安靜組相比，其他組CA2+含量都有所上升，尤其是多次力竭運(yùn)動組，有非常顯著性差異（P<0.01），聯(lián)系GSH數(shù)據(jù)，當(dāng)GSH活力上升時，CA2+含量就下降，說明力竭運(yùn)動會引起機(jī)體疲勞，與相關(guān)文獻(xiàn)一致。與多次力竭運(yùn)動組相比，多次力竭藥物組數(shù)據(jù)也有所降低，但是沒有顯著性差異?？赡軝C(jī)制是羅漢果葉黃酮可以從一定程度上緩解機(jī)體疲勞，對提高運(yùn)動能力有幫助。

3 結(jié)語

一次性力竭運(yùn)動及多次力竭運(yùn)動會降低SOD、CAT、GSH-PX活性，提高M(jìn)DA、CA2+含量，羅漢果葉黃酮可以提高抗氧化酶活性，有效清除力竭運(yùn)動引起的自由基過多，阻止脂質(zhì)過氧化，對心肌線粒體的保護(hù)作用比較明顯。

參考文獻(xiàn)

[1] 陸燕玲.耐力運(yùn)動訓(xùn)練對大鼠心功能及心肌線粒體能量代謝的影響[D].廣西師范大學(xué)，2011.

[2] 丁樹哲，王文信.力竭游泳對大鼠心肌線粒體鈣運(yùn)輸?shù)挠绊慬J].生物化學(xué)雜志，1995，11（3）：366-367.

[3] Bernardi P，S.Vassanelli，P.V eroness et al. Modulation of the mitochondrial permeability pore.Effect ofprotons and divanlentcations[J].Bio l.chem，1992，267：2934-2939.