胡穎，陳元旺

(江西省九江市第一人民醫(yī)院，1、藥劑科；2、消化內(nèi)科，九江 332000)

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是一類以腸道炎癥為主要表現(xiàn)的慢性復(fù)發(fā)性腸道自身免疫性疾病。其具有較高病死率和癌變率，現(xiàn)已被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治病之一，近年在我國(guó)其發(fā)病亦呈逐年增高趨勢(shì)[1]。但其病因和發(fā)病機(jī)制尚不清楚，其發(fā)生可能與遺傳、免疫功能紊亂、感染、環(huán)境等多種因素有關(guān)，作為自身免疫性疾病，細(xì)胞因子如白介素 10（interleukin-10，IL-10）、白介素 17（interleukin-17，IL-17）以及新型細(xì)胞因子白介素33 （interleukin-33，IL-33） 和 白 介 素 35（interleukin-35，IL-35）等在UC致病中扮演重要作用[2-6]。目前臨床治療主要采用氨基水楊酸、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑及中藥灌腸等手段，其中氨基水楊酸類藥物美沙拉嗪可顯著抑制腸道炎癥而在UC治療中成為首選[7，8]。此外，康復(fù)新液灌腸可靶向給藥，藥物吸收率高且不良反應(yīng)較少，已經(jīng)成為輔助治療UC的方法[9]。故本研究擬探究美沙拉嗪聯(lián)合康復(fù)新液治療活動(dòng)期UC的療效及對(duì)炎癥細(xì)胞因子IL-10、IL-17、IL-33和IL-35的影響。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2015年2月-2017年11月于九江市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科住院且經(jīng)腸鏡明確診斷的UC患者56例，診斷均符合《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)（2012年廣州）》中關(guān)于活動(dòng)期UC的診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]，且病變部位為直腸及直乙狀結(jié)腸。排除出現(xiàn)穿孔、癌病及大出血等嚴(yán)重并發(fā)癥患者；排除合并克羅恩病及結(jié)腸息肉等消化系統(tǒng)疾病患者；并發(fā)其他臟器疾病或腫瘤患者；妊娠期或者哺乳期女性；重度和緩解期UC患者。56例UC患者隨機(jī)分為治療組A 28例，其中男15例，女13例，平均（41.6±4.1）歲，病程（1.19±0.32）年，平均體重（38.64±3.27）kg/m2， 輕度 UC/中度 UC 為 11 例/17例；治療組B 28例，其中男14例，女14例，平均（42.1±3.9）歲，病程（1.18±0.35）年，平均體重（38.37±3.92）kg/m2，輕度 UC/中度 UC 為 12 例/16 例。 同時(shí)選取同期健康體檢者30例作為對(duì)照組，其中男15例，女 15 例，平均（41.9±3.7）歲，平均體重（38.28±3.59）kg/m2。治療組A、治療組B和健康對(duì)照組在性別構(gòu)成比、年齡及體重等一般資料間均無(wú)顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。治療組A和治療組B間病程及輕度/中度比亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

1.2 治療方案 所有患者均給予基礎(chǔ)治療如糾正水電解質(zhì)、酸堿失衡、改善營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)等。治療組A在基礎(chǔ)治療基礎(chǔ)上給予口服美沙拉嗪1.0g，tid。治療組B在治療組A的基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用康復(fù)新液灌腸治療，即生理鹽水150ml及康復(fù)新液30ml灌腸，每晚1次。兩組治療周期均為30d。

1.3 標(biāo)本采集及處理 抽取治療組A、治療組B和健康對(duì)照組治療前清晨空腹靜脈血3ml于干燥管中，3000rmp 10min離心分離血清于-80℃冰箱保存。30d治療周期結(jié)束后抽取治療組A和治療組B患者清晨空腹靜脈血3ml于干燥管中，3000rmp 10min離心分離血清于-80℃冰箱保存。兩次采集血清用于檢測(cè)治療前后血清IL-33、IL-35、IL-10及IL-17的濃度。

1.4 血清 IL-33、IL-35、IL-10及 IL-17的濃度測(cè)定 Human IL-33 DuoSet ELISA（R&D，DY3625B）、Human Interleukin 35，IL-35 ELISA Kit（上海生工，D710723）、Human IL-17 DuoSet ELISA Kit（R&D，D1700） 及 Human IL-10 Quantikine ELISA Kit（R&D，D1000B）用于檢測(cè)血清 IL-33、IL-35、IL-10及IL-17的濃度。所有步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.5 療效評(píng)價(jià) 治療后觀察兩組患者臨床療效。療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)如下：顯效即癥狀、體征基本消失，結(jié)腸鏡檢糜爛消失、潰瘍愈合、黏膜恢復(fù)正常，大便常規(guī)檢查陰性；有效即癥狀、體征顯著改善，結(jié)腸鏡檢黏膜輕度炎癥、假息肉形成，大便常規(guī)檢查陰性；無(wú)效即癥狀、體征無(wú)改善或惡化，結(jié)腸鏡檢無(wú)改善或加重?？傆行?（顯效+有效）/總病例數(shù)。此外，腸鏡效果評(píng)價(jià)依據(jù)Barons分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估，即顯效：治療后進(jìn)步2級(jí)或明顯緩解；有效：治療后進(jìn)步1級(jí)；無(wú)效：治療后無(wú)進(jìn)步或加重?？傆行?（顯效+有效）/總病例數(shù)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 利用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以（±s）表示，兩樣本比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，治療前后同組比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用百分比表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05視為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療組A和治療組B臨床療效及腸鏡療效比較 經(jīng)過(guò)30d治療后，治療組A的臨床療效中總體有效率顯著低于治療組B的患者，差異顯著（χ2=4.462，P=0.035），見(jiàn)表1。此外，通過(guò)腸鏡療效評(píng)價(jià)亦顯示治療組A的總體有效率顯著低于治療組B的患者，差異顯著（χ2=4.909，P=0.027），見(jiàn)表 2。

表1 兩組患者臨床療效比較

表2 兩組患者腸鏡療效比較

2.2 兩組治療前后血清IL-33、IL-35、IL-10及IL-17濃度比 治療后A組和B組血清IL-33和IL-17水平均顯著低于治療前水平，但治療后A組血清IL-33和IL-17均高于治療后B組水平，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；此外，治療后A組和B組血清IL-35和IL-10則均顯著高于同組治療前水平，但治療后A組血清IL-35和IL-10均低于治療后B組水平，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

UC病因?qū)W至今仍不清楚，當(dāng)前觀點(diǎn)認(rèn)為易感患者腸黏膜局部屏障被破壞，菌群抗原移位誘發(fā)不同類別細(xì)胞因子分泌失衡，引起免疫功能紊亂，進(jìn)而產(chǎn)生急慢性腸道炎癥。其中多種細(xì)胞因子扮演的角色尤為關(guān)鍵[11，12]。既往大量研究也相繼證實(shí)諸如白介素 6 （interleukin-6，IL-6）、 白介素 1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素 8（interleukin-8，IL-8）及腫瘤壞死因子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等炎癥性細(xì)胞因子在UC患者的腸粘膜和血清中存在異常變化，且參與了UC發(fā)病和加重過(guò)程。此外，細(xì)胞免疫中T輔助細(xì)胞2（T helper cell2，Th2）樣免疫效應(yīng)在UC發(fā)病中被認(rèn)為是主要免疫學(xué)機(jī)理，近期研究還發(fā)現(xiàn)T輔助細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）/調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞 （Regulatory T cell，Treg）細(xì)胞免疫平衡同樣參與UC發(fā)生發(fā)展過(guò)程，而由Th17和Treg分泌的主要效應(yīng)細(xì)胞因子發(fā)揮促炎的IL-17和發(fā)揮抑炎的IL-10均在UC患者中存在異常[13]。隨著新型細(xì)胞因子逐步被發(fā)現(xiàn)，其與UC的關(guān)系也被全球范圍的研究者進(jìn)一步證實(shí)，其中IL-33和IL-35即為被證實(shí)與UC關(guān)系密切的新型細(xì)胞因子。IL-33在UC患者中發(fā)揮促炎和抑炎雙重效應(yīng)，即可加重腸道炎癥，可減輕炎癥反應(yīng)，促進(jìn)腸粘膜愈合[14]。但其在UC患者血清中的變化如何，仍需要進(jìn)一步探究。OI Saadah等[15]的研究證實(shí)兒童UC患者血清IL-33顯著增高，這與本研究在成人UC血清中的研究結(jié)果類似。此外，IL-35是新發(fā)現(xiàn)的炎癥抑制細(xì)胞因子，為IL-12家族新成員。其在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病患者中均顯著下降，并與疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān)[16，17]。本研究亦發(fā)現(xiàn)UC患者血清IL-35水平下調(diào)，這與Li Y等的發(fā)現(xiàn)一致[18]。以上結(jié)果表明 IL-17、IL-10、IL-33和 IL-35通過(guò)不同途徑參與了UC病因?qū)W過(guò)程。

表3 兩組治療前后血清IL-33、IL-35、IL-10及IL-17濃度的變化

目前UC治療的主要常用藥物之一為美沙拉嗪，常見(jiàn)用藥途徑為口服。與口服用藥相比，灌腸給藥途徑可直接靶向病灶，使得藥物吸收效果更好，作用時(shí)間延長(zhǎng)。因此，當(dāng)前臨床采用口服結(jié)合灌腸給藥的方式治療UC。但治療方案的療效報(bào)道還不一致，有待進(jìn)一步探究。且探究聯(lián)合給藥的潛在機(jī)制多于療效評(píng)估和疾病監(jiān)測(cè)具有重要意義?？祻?fù)新液是美洲大蠊提取成分，其可通過(guò)抑制白介素、組織因子和前列腺素等促炎因子分泌，進(jìn)而促進(jìn)潰瘍愈合。既往研究也證實(shí)康復(fù)新液聯(lián)合美沙拉嗪可阻滯UC患者IL-1、IL-6、IL-8及TNF-α的細(xì)胞因子的釋放[19，20]。本研究進(jìn)一步證實(shí)美沙拉嗪聯(lián)合康復(fù)新液治療UC療效良好，并可有效改善與UC發(fā)病密切相關(guān)的細(xì)胞因子IL-17和IL-33與IL-10和IL-35等促炎-抑炎細(xì)胞因子間的平衡，對(duì)于其療效監(jiān)測(cè)具有重要價(jià)值。