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        蛋白酪氨酸磷酸酶在非小細胞肺癌組織中的表達及與吸煙指數(shù)的關系

        2018-10-23 05:39:58程文棟
        實用醫(yī)院臨床雜志 2018年5期
        關鍵詞:肺癌研究

        程文棟

        (青海省人民醫(yī)院呼吸科,青海 西寧 810007)

        非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)約占肺癌的80%[1],臨床診斷一般都到了中晚期,失去了最佳的手術治療時機,5年的生存率較低[2]。早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療患者生存率較高,但是由于NSCLC缺乏早期的靈敏檢測指標,目前臨床主要通過胸部X射線來發(fā)現(xiàn)肺部異常,確診率不高[3]。血清腫瘤標志物檢測是現(xiàn)在臨床上常用的方法,輔助影像檢查可以提高NSCLC患者早期診斷率[4]。本研究分析蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatase,PTP)在NSCLC組織中的表達及與吸煙指數(shù)的關系,現(xiàn)報道如下。

        1 資料與方法

        1.1一般資料2013年4月至2015年7月我院收治的NSCLC患者60例(病例組),男45例,女15例,年齡35~75歲[(55.25±6.79)歲],其中鱗癌23例,腺癌20例,大細胞癌17例。肺癌TNM分期:Ⅰ~Ⅱ期40例(66.7%),Ⅲ~Ⅳ期20例(33.3%)。納入標準:①均經臨床病理確診為NSCLC,可收集到完整的檢測和治療資料或病史資料;②分化、分期診斷明確;③研究符合倫理。排除標準:①患有嚴重的器官衰竭性疾病及對于病情診斷不明確和小細胞性肺癌;②患有嚴重合并癥或并發(fā)癥或惡性腫瘤。③正在進行放化療治療;④不依從、不配合及拒絕參加研究者或研究過程中可能轉院治療者。以同期在我院健康體檢者60例為健康對照組,男42例,女18例,年齡30~80歲[(55.67±5.29)歲],同期我院治療的肺部良性疾病患者60例(肺部良性疾病組),男31例,女29例,年齡32~74歲[(53.45±5.28)歲],其中肺結核34例,肺部感染38例,肺部良性腫瘤8例。三組性別、年齡等一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P> 0.05)。

        1.2研究方法

        1.2.1PTP檢測 試劑與材料:兔抗人的PTP-1B抗體(美國Cell Signaling Technology公司)、胃酶抑素、苯酸胺、抑肽酶等均購自南京建成生物工程研究所、二步法抗兔/鼠通用型免疫組織化學染色法(EnVision)試劑盒、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色劑;收取NSCLC患者病理組織,肺部感染組感染區(qū)域組織及健康對照組正常肺部組織。步驟(Western 印跡法):將收集的肺部組織按照常規(guī)步驟進行蛋白質提取及測定,100 μg肺組織勻漿置于10%SDS聚丙烯酰胺膠上分離,采用蛋白電子印跡法60 min轉移到PVDF膜上,采用5%脫脂牛奶封閉,置于4 ℃冰箱過夜。次日清晨取出用0.1%TBST緩沖液漂洗3次,接著將PTP-1B多克隆抗體加到PVDF膜,室溫孵化3 h,再用0.1%TBST緩沖液漂洗3次,再將辣根過氧化物酶標記二抗加到PVDF膜室溫孵化2 h,再用0.1%TBST緩沖液漂洗3次,采用ECL系統(tǒng)顯影免疫反應蛋白,View smar t軟件系統(tǒng)對蛋白顯影底片進行灰度掃描半定量分析。

        1.2.2吸煙指數(shù)[5]采用自行設計的調查表對三組吸煙量進行調查,計算吸煙指數(shù),即每天吸煙支數(shù)×吸煙年數(shù),根據(jù)吸煙指數(shù)將病例組分為三亞組:A組(吸煙指數(shù)<150)、B組(150≤吸煙指數(shù)<300)、C組(吸煙≥300)。

        1.3觀察指標比較三組PTP相對表達量及吸煙指數(shù);分析病例組PTP相對表達量與吸煙指數(shù)相關性。

        1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS 13.0軟件進行數(shù)據(jù)分析,計量資料比較采用單因素方差分析及SNK-q檢驗;計數(shù)資料比較采用卡方檢驗;相關性分析采用Spearman秩相關。P< 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        2.1三組PTP相對表達量及吸煙指數(shù)比較三組間PTP相對表達量及吸煙指數(shù)比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P< 0.05),見表1。

        2.2病例組PTP相對表達量比較及與吸煙指數(shù)的關系A、B、C組間PTP相對表達量比較,差異有統(tǒng)計學意義(P< 0.05),見表2。吸煙指數(shù)與PTP相對表達量呈明顯的正相關關系(rs=0.786,P< 0.05)。

        表2 不同吸煙指數(shù)PTP相對表達量比較

        3 討論

        癌癥是一種漸變性疾病,在早期均會有一定變化,宏觀到出現(xiàn)明顯癥狀和體征,微觀可能某些分子或細胞發(fā)生改變等,但是大部分癌癥早期缺乏明顯特異指標,從而耽擱病情,目前臨床研究較為熱門就是尋找和研究早期診斷癌癥的特異指標[6],以提早給予相應的治療,提高患者生存質量和生存時間等[7~10]。

        本研究結果顯示,PTP在NSCLC組織中相對表達水平明顯高于肺部良性疾病及健康者,說明患者發(fā)病或病情加重時PTP水平明顯升高,可能是靈敏或特異指標。有研究發(fā)現(xiàn)PTP在2型糖尿病初診患者內臟脂肪組織的表達水平明顯升高,與疾病發(fā)病密切相關,目前研究PTP較多就是在糖尿病、肥胖中作用,近期逐漸開始研究在腫瘤中作用,具有同樣的高表達結果[11],提示有可能作為癌癥提早診斷以及了解患者病情變化的關鍵指標,目前研究較為明確為PTP1B在胃癌組織和細胞中均過度表達,并且與TNM分期有明顯的相關性,具有促進胃癌細胞的增殖和腫瘤發(fā)展的作用[12,13]。此外,也有研究顯示PTP是NSCLC發(fā)生的獨立危險因素,并且生存分析顯示PTP表達與NSCLC患者總生存率密切相關[14,15],說明PTP在NSCLC等癌癥發(fā)展中起著重要作用。

        本研究結果顯示,隨著NSCLC患者吸煙指數(shù)提高,PTP相對表達量明顯升高,呈明顯正相關關系,推測吸煙者可能通過誘導PTP相對表達量誘發(fā)NSCLC的發(fā)生或者病情加重,分析原因可能為吸煙過多可造成機體自主神經功能亢進,導致患者內環(huán)境紊亂,香煙中含有70種成份均具有一定致癌物[16~18],吸煙能誘發(fā)周圍氣道和肺泡的炎性反應,通過蛋白分解酶的釋放,進一步造成肺實質的破壞并刺激氣道黏膜過度分泌,其中PTP就是相關蛋白中一種,增加癌癥發(fā)生風險。

        綜上所述,PTP在NSCLC中高表法,且與吸煙指數(shù)明顯正相關,臨床可以通過檢測PTP了解患者病情,通過控制吸煙量降低發(fā)病風險或者減輕病情。

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