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        阻斷式PRRSV免疫抑制試驗

        2018-10-23 02:03:08,,
        浙江畜牧獸醫(yī) 2018年5期
        關(guān)鍵詞:藍耳免疫抗體免疫抑制

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        (浙江省縉云縣動物疫病預(yù)防控制中心,浙江 縉云 321400)

        近年來,我國各地對豬瘟和豬藍耳病的預(yù)防和撲滅做了大量工作,曾經(jīng)的“高熱發(fā)紅急性致死”的“高熱病”已不復存在,但以免疫抑制為主要危害的PRRSV隱性持續(xù)性感染卻依然嚴重。表面“平靜”的臨床現(xiàn)象,往往容易混淆人們的視線,從而忽視了豬藍耳免疫的重要性。豬瘟是國家強制免疫的傳染病,眾所周知,豬瘟的免疫效果與PRRSV的自然感染及它的免疫效果密切相關(guān)。為能比較深入地揭示PRRSV對豬瘟免疫抑制危害的嚴重性及藍耳防疫的重要性,故特做本試驗。

        1 材料和方法

        1.1材料

        1.1.1免疫疫苗 豬藍耳疫苗:杭州佑本批號:20170605;豬瘟疫苗:杭州佑本批號:20170527。

        1.1.2實驗用豬 隨機選取縉云某豬場30日齡仔豬40頭(體態(tài)正常,無可見臨床癥狀)。

        1.1.3豬瘟診斷試劑 豬瘟間接血凝抗體檢測試劑盒,中國農(nóng)業(yè)科學蘭州獸醫(yī)研究所批號:20180615202。

        1.1.4抗PRRSV-IG和瓊擴抗原的制備 用豬藍耳弱毒活疫苗(NVDC-JXA1株)首免100日齡育成豬,肌注2頭份。免后2周再以豬藍耳滅活疫苗(NVDC-JXA1株)加強免疫2次,間隔21 d,第1次劑量2 mL/頭,第2次劑量4 mL/頭,末次免疫后21 d ,經(jīng)采血分離血清-鹽析沉淀-脫鹽濃縮而成。將提取的蛋白溶液稀釋后用UV-170紫外分光光度計測定,記錄λ=280 nm和λ=260 nm的光密度,按Lowry-Kalokar公式計算蛋白濃度,蛋白濃度(mg/mL)=1.45×1.116-0.74×1.041得0.84786乘以稀釋倍數(shù)134為113.6 mg/mL。

        1.1.5山羊免疫球蛋白的制備 以豬抗PRRSV-IG免疫健山羊,采血分離血清-鹽析沉淀-脫鹽濃縮而成。用瓊擴法檢驗:中間孔為豬抗PRRSV-IG抗原,周邊孔為倍比稀釋的山羊免疫球蛋白,結(jié)果見圖1所示。

        圖1 山羊抗豬PRRSV球蛋白瓊擴圖

        1.2試驗方法

        1.2.1試驗設(shè)計 分A、B、C、D 4個試驗組,每組10頭,A組為藍耳疫苗+山羊免疫球蛋白1次,B組為組為藍耳疫苗+山羊免疫球蛋白2次,C組僅免豬瘟疫苗,D組為只用藍耳苗。

        1.2.2免疫方法 A、B兩組30日齡首免藍耳和山羊免疫球蛋白,D組只免藍耳疫苗,劑量為2 mL/頭。首免后2 d,四組各免疫豬瘟苗2 mL/頭。首免后21 d,B組和D組與首次相同劑量加強免疫1次。二次免疫3周后,經(jīng)腔靜脈采血分離血清,用正向間接血凝法檢測豬瘟免疫抗體。

        2 試驗結(jié)果

        2.1山羊免疫球蛋白對藍耳疫苗免疫抑制影響

        試驗A組使用一次免疫抑制劑后,豬瘟免疫效價下降為3,B組使用免疫抑制劑二次后即可下降至2以下(見表1)。

        表1 山羊免疫球蛋白對藍耳疫苗免疫抑制的豬瘟抗體效價

        2.2免疫藍耳疫苗對豬瘟抗體效價的影響

        未經(jīng)藍耳免疫的C組,因受PRRSV的免疫抑制作用其平均豬瘟效價為1.8,經(jīng)藍耳疫苗免疫的D組因PRRSV受到了控制,其平均豬瘟效價達到8(見表2)。

        表2 藍耳免疫對豬瘟抗體效價的影響

        以PRRSV自然感染豬的豬瘟免疫抗體水平為參照,以山羊免疫球蛋白為豬藍耳疫苗的免疫抑制劑,能有效地阻斷豬藍耳疫苗的防疫作用,從而明晰出PRRSV對豬瘟疫苗的免疫抑制作用,進一步揭示了豬PRRSV對豬瘟免疫抑制危害的嚴重性(圖2)。

        圖2 各處理組別豬瘟抗體效價

        3 小結(jié)與討論

        3.1山羊球蛋白為免疫抑制劑能有效地阻斷豬藍耳疫苗的防疫作用,使B組的豬瘟抗體水平與C組的水平相當,從而進一步證實PRRSV對豬瘟免疫抑制的重要作用及嚴重性。

        3.2試驗提示:PRRSV是影響豬瘟免疫的一個重要因素,豬瘟的免疫抗體水平高低與豬藍耳的防疫與否存在密切相關(guān)性,因此做好藍耳的免疫是預(yù)防豬瘟的重要手段之一。

        3.3在PRRSV隱性感染被徹底清除之前,評判豬瘟免疫抗體效價一定要與藍耳病毒的感染程度結(jié)合起來,這對于指導豬瘟的防疫實踐十分重要。

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