張振祥

（河北省赤城縣農(nóng)牧局，河北赤城 075599）

維生素D3是一種類固醇激素，屬于脂溶性維生素，對(duì)人類和動(dòng)物具有多種生物學(xué)功能，如調(diào)控機(jī)體礦物質(zhì)代謝、免疫、生長(zhǎng)和繁殖等。無(wú)論是豬還是雞，營(yíng)養(yǎng)需要中都給出了維生素D3的需要量，但這個(gè)量?jī)H僅是滿足機(jī)體正常需求，當(dāng)動(dòng)物需要產(chǎn)出更多畜產(chǎn)品或應(yīng)對(duì)環(huán)境、生理改變時(shí)，維生素D3的需求量會(huì)提高，產(chǎn)蛋期蛋禽對(duì)維生素D3的需要量提高更為明顯。維生素D3的來(lái)源主要由飼料提供，也可以由皮膚中的7-脫氫膽固醇通過(guò)紫外線照射生出，但在規(guī)劃化養(yǎng)殖下，這種轉(zhuǎn)化效率較低，因?yàn)閯?dòng)物大部分缺乏太陽(yáng)照射（Hewison，1992）。目前生產(chǎn)實(shí)際中，維生素D3的添加量多數(shù)參考NRC標(biāo)準(zhǔn)，日糧中的添加量會(huì)根據(jù)動(dòng)物所處生理階段進(jìn)行調(diào)整，但動(dòng)物攝入維生素D3過(guò)量同樣會(huì)出現(xiàn)中毒癥狀，如多尿、尿高水平高、采食下降和生長(zhǎng)緩慢等（Cwhcdj，2000）。有研究表明，維生素D3的添加量可以達(dá)到各種營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)推薦水平的10倍以上（王建輝和賀建華，2003）。王安和單安山（2007）調(diào)查了目前市面上商品料維生素D3的含量情況，發(fā)現(xiàn)斷奶豬、保育豬、生長(zhǎng)和育肥豬維生素D3的平均含量是NRC標(biāo)準(zhǔn)的22、13、12和11倍，其推斷這種高劑量的維生素D3添加量可能與廠家想發(fā)揮維生素D3的免疫調(diào)節(jié)功能有關(guān)。然而，目前關(guān)于維生素D3對(duì)斷奶仔豬的文獻(xiàn)報(bào)道不多，因此，本試驗(yàn)設(shè)計(jì)了兩個(gè)維生素D3水平（基本需要量和10倍添加量），考察其對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、抗氧化和免疫功能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組 試驗(yàn)選擇健康、體重一致的25 d斷奶仔豬120頭，隨機(jī)分為2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20頭斷奶豬。對(duì)照組飼喂維生素D3含量為250 IU/kg的基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加維生素D3（購(gòu)自DSM中國(guó)有限公司），使維生素D3的含量為2500 IU/kg。斷奶豬按照常規(guī)飼養(yǎng)管理方法進(jìn)行，豬只自由采食和飲水。飼料采用粉料形式，在每天早上7點(diǎn)、11點(diǎn)、15點(diǎn)和19點(diǎn)共飼喂4次，保證料槽飼料新鮮，做到每次少量勤填?；A(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 生長(zhǎng)性能測(cè)定 每天觀察豬只的糞便情況，糞便成型評(píng)0分，漿狀評(píng)1分，半液體評(píng)2分，液體評(píng)3分，分別積分大于或等于2分則認(rèn)為發(fā)生腹瀉，以糞便評(píng)分作為腹瀉指數(shù)數(shù)據(jù)來(lái)源，參考Yuan等（1998）計(jì)算腹瀉指數(shù)。分別于試驗(yàn)第7、14和21天早上對(duì)各重復(fù)豬只進(jìn)行稱重，在稱重前停料停水12 h。計(jì)算各階段日增重、日采食量和料重比。

1.3 回腸形態(tài) 分別在第7、14和21天每個(gè)重復(fù)屠宰4頭豬，收集回腸腸段，甲醛固定后，按照常規(guī)切片制作方法進(jìn)行石蠟包埋、染色、鏡檢。每個(gè)切片用顯微鏡測(cè)定10個(gè)點(diǎn)的絨毛高度和隱窩深度，以平均值作為各樣品的回腸絨毛高度、隱窩深度，計(jì)算絨毛高度和隱窩深度比值。

1.4 血清生化指標(biāo) 豬只屠宰前頸靜脈采血10 mL，分離得到血清后，采用試劑盒法（試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程研究所）測(cè)定血清尿素氮和丙二醛（MDA）含量、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）的活性。

1.5 免疫性能 豬只屠宰后收集回腸內(nèi)容物，利用四川邁克生物科技股份有公司生產(chǎn)的試劑盒，采用免疫投射比濁法測(cè)定血清和回腸內(nèi)容物中IgG，IgA和IgM的濃度。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 腹瀉指數(shù)采用SPSS（18.0版）中的Descriptive Crosstabs進(jìn)行分析，其他指標(biāo)用單因素方差分析，然后用Duncan’s多重比較，以P＜0.05作為顯著差異的判定標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 維生素D3對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，試驗(yàn)組較對(duì)照組顯著降低了15～21 d斷奶仔豬的腹瀉指數(shù)（P＜0.05），對(duì)1～7 d和8～14 d斷奶仔豬腹瀉指數(shù)的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。對(duì)照組斷奶仔豬1～7 d日增重表現(xiàn)為負(fù)增長(zhǎng)，試驗(yàn)組顯著提高了斷奶仔豬生長(zhǎng)早期的日增重（P＜0.05）。對(duì)照組和試驗(yàn)組對(duì)斷奶仔豬各階段的日采食量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組顯著提高了15～21 d斷奶仔豬的飼料利用率（P＜0.05）。

表2 維生素D3對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 維生素D3對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響 由表3可知，對(duì)照組和試驗(yàn)組對(duì)斷奶仔豬各階段血清堿性磷酸酶的濃度無(wú)顯著影響（P＞0.05），但試驗(yàn)組較對(duì)照組顯著降低了斷奶仔豬第7天血清尿素氮的含量（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組顯著降低了斷奶仔豬第14和21天血清丙二醛含量（P＜0.05），顯著提高了斷奶仔豬第7天血清超氧化物歧化酶含量和21 d血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量（P＜0.05）。

表3 維生素D3對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響

2.3 維生素D3對(duì)斷奶仔豬回腸組織形態(tài)的影響由表4可知，試驗(yàn)組較對(duì)照組提高了斷奶仔豬第7天絨毛高度，顯著提高了28.77%（P＜0.05），而對(duì)14和21 d絨毛高度及斷奶仔豬各斷奶隱窩深度的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。試驗(yàn)組和對(duì)照組對(duì)斷奶仔豬絨毛高度和隱窩深度的比值的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表4 維生素D3對(duì)斷奶仔豬回腸組織形態(tài)的影響

2.4 維生素D3對(duì)斷奶仔豬免疫性能的影響 維生素D3對(duì)斷奶仔豬血清和腸道免疫性能的影響見表5。對(duì)照組和試驗(yàn)組對(duì)斷奶仔豬各階段血清IgA和IgG含量的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05），但試驗(yàn)組較對(duì)照組顯著提高了斷奶仔豬14 d血清IgM的含量（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組對(duì)斷奶仔豬7和21 d回腸內(nèi)容物IgM、IgG和IgA含量的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05），但試驗(yàn)組顯著提高了斷奶仔豬14 d回腸內(nèi)容物IgM、IgG和IgA的含量（P＜0.05）。

3 討論

3.1 維生素D3對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高水平維生素D3較低水平顯著降低了斷奶仔豬生長(zhǎng)后期的腹瀉指數(shù)，盡管對(duì)照組和試驗(yàn)組對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)前期的腹瀉指數(shù)影響差異不顯著，但結(jié)果也同樣表明，前期高水平維生素D3組斷奶仔豬的腹瀉指數(shù)也達(dá)到了0.6和0.5，這與試驗(yàn)豬只采用自由采食飼喂方式有關(guān)，可能前期仔豬采食過(guò)多，而消化道還尚未發(fā)育完善，從而造成腹瀉率高有關(guān)。有研究表明，維生素D3可以對(duì)動(dòng)物腸道炎癥起到很好的預(yù)防和治療作用，這也與后期高水平維生素D3顯著降低腹瀉指數(shù)有關(guān)（Cantorna等，2000）。目前關(guān)于維生素D3在豬上的研究數(shù)據(jù)主要在調(diào)控肉質(zhì)和繁殖性能方面，而對(duì)生長(zhǎng)性能的報(bào)道研究不多。在本試驗(yàn)中，2500 IU/kg維生素D3較250 IU/kg水平組顯著提高了仔豬日增重和飼料利用率。Jakobsen等（2007）研究報(bào)道了超高水平維生素D3（80 kIU/kg）顯著降低豬的日增重，而李德發(fā)等（2001）發(fā)現(xiàn)，豬每日采食15000 IU維生素D3對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能物顯著影響，但采食水平再提高10倍后會(huì)降低生長(zhǎng)性能。因此，日糧中添加適宜水平的維生素D3對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。

表5 維生素D3對(duì)斷奶仔豬免疫性能的影響

3.2 維生素D3對(duì)斷奶仔豬腸道形態(tài)和抗氧化性能的影響 腸道絨毛高度與腸細(xì)胞數(shù)量具有正相關(guān)性，絨毛高度通常可以用來(lái)評(píng)估腸絨毛細(xì)胞數(shù)量；隱窩深度可以用來(lái)評(píng)估隱窩細(xì)胞的增殖情況（Hampson，1986）。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，維生素D3對(duì)斷奶仔豬各階段隱窩深度無(wú)顯著影響，而試驗(yàn)組較對(duì)照組顯著提高了斷奶仔豬第7天絨毛高度。有研究表明，維生素D3對(duì)維持腸道細(xì)胞壁的完整性具有重要作用（Zouboulis等，2008；Michalik和 Wahli，2007）。Fujita等（2008）在體外試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，維生素D3的活性形式1，2-5羥維生素D3可以提高腸道黏膜上皮細(xì)胞緊密連接蛋白的表達(dá)，其認(rèn)為在腸道上皮細(xì)胞存在維生素D3依賴性鈣通道。試驗(yàn)組顯著降低了斷奶仔豬第14和21天血清丙二醛含量，顯著提高了斷奶仔豬第7天血清超氧化物歧化酶含量和第21天血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量，這與李德發(fā)等（2001）研究結(jié)果存在差異，其研究結(jié)果表明，日糧高水平維生素D3會(huì)有毒性，導(dǎo)致機(jī)體超氧化物歧化酶代償性升高，但結(jié)果差異的具體原因還有待進(jìn)一步研究。

3.3 維生素D3對(duì)斷奶仔豬免疫功能的影響 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組較對(duì)照組顯著提高了斷奶仔豬生在早期血清IgM的含量。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組對(duì)斷奶仔豬7和21 d回腸內(nèi)容物IgM、IgG和IgA含量的影響無(wú)顯著差異，但試驗(yàn)組顯著提高了斷奶仔豬14 d回腸內(nèi)容物IgM、IgG和IgA的含量。Lemire等（1995）報(bào)道，維生素D3可以抑制免疫球蛋白的合成，間接調(diào)控其分泌。25-羥維生素D3可以直接抑制免疫細(xì)胞的成熟，降低免疫球蛋白的生長(zhǎng)，本試驗(yàn)研究結(jié)果說(shuō)明，仔豬遇到抗原時(shí)，維生素D3的這種抑制作用會(huì)降低，機(jī)體免疫應(yīng)答啟動(dòng)，產(chǎn)生特異性抗體，清除抗原（吳玉章等，2003）。

4 結(jié)論

日糧適宜水平維生素D3可以提高斷奶仔豬的日增重，改善飼料報(bào)酬，提高斷奶仔豬生長(zhǎng)早期和后期的抗氧化和免疫功能。