卓婷

摘 要：目的：調(diào)查豬場(chǎng)豬瘟的免疫情況以及通過優(yōu)化試驗(yàn)確定最佳首免日齡。方法本次論文選擇對(duì)規(guī)?；i場(chǎng)的豬瘟免疫的整體情況進(jìn)行調(diào)查，在調(diào)查基礎(chǔ)上，進(jìn)行仔豬豬瘟首免日齡試驗(yàn)，得到仔豬最佳的首免日齡。結(jié)果：2017年整體的豬瘟抗體水平均不夠理想，整體平均抗體水平陽性率只有66.45%，低于70%的陽性保護(hù)率水平。2018年，整體的豬瘟抗體水平有了大幅度的提高，平均陽性率達(dá)到了83.17%0最佳首免日齡試驗(yàn)，14日齡免疫組和21日齡免疫組的抗體水平在免疫一周后均出現(xiàn)較大幅度的下降。兩周后，14日齡免疫組抗體水平仍在下降，21日齡免疫組上升緩慢。28日齡免疫組，在免疫后兩周整體的抗體水平均有明顯的上升，而35日齡免疫組兩周內(nèi)抗體上升較緩慢。結(jié)論：對(duì)不同階段的豬群的抗體水平調(diào)查發(fā)現(xiàn)，哺乳仔豬、種公豬、后備豬、育肥豬的抗體水平較為理想，保育豬抗體水平陽性率為全場(chǎng)不同階段豬群最低。為達(dá)到較為理想的免疫效果，最佳的首免日齡應(yīng)是仔豬28日齡。

關(guān)鍵詞：豬瘟；首免日齡；免疫情況；預(yù)防

中圖分類號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1004-7344（2018）21-0247-02

豬瘟又叫爛腸瘟，是由豬瘟病毒引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病。該病是對(duì)豬危害較大的一種傳染病。資料報(bào)導(dǎo)21世紀(jì)前五年豬瘟發(fā)病率20～25%，每年豬瘟死亡占飼養(yǎng)量的3～5%，占病死豬30%[1]。

1 豬瘟發(fā)病的特點(diǎn)

1.1 流行特點(diǎn)

不分品種、性別、年齡，一年四季發(fā)生。目前主要發(fā)生于免疫豬群，早的十幾日齡，晚的成年豬。也可發(fā)生于初產(chǎn)和經(jīng)產(chǎn)的母豬。據(jù)報(bào)導(dǎo)帶毒母豬產(chǎn)出的仔豬有長(zhǎng)期病毒血癥，可持續(xù)排毒，病程緩慢，先后于2～11日齡引起死亡[2]。

1.2 癥狀特點(diǎn)

一般體溫升高、稽留熱，皮膚粘膜，尤其耳根、胸腹皮膚發(fā)紺呈敗血經(jīng)過（見圖）。病程長(zhǎng)的拱背，寒戰(zhàn)，厭食，初便秘后腹瀉、便秘交替發(fā)生，當(dāng)糞便惡臭時(shí)附粘液，多在1周死亡，不死的轉(zhuǎn)慢性，體溫時(shí)高時(shí)低，食欲時(shí)好時(shí)壞，病程20d以上，多數(shù)轉(zhuǎn)歸死亡[3]。

2 豬瘟診斷

2.1 臨床診斷

根據(jù)上述流行特點(diǎn)和臨床癥狀，剖檢變化及治療情況進(jìn)行綜合診斷。

2.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

（1）豬體免疫試驗(yàn)：用病料接種易感豬觀察發(fā)病的情況，方法是取4只小豬，2只注免化弱毒苗，兩只對(duì)照，注苗12～14d后接病料免疫豬不發(fā)病，未免疫豬發(fā)病則判豬瘟陽性[4]。

（2）兔體交叉免疫試驗(yàn)：根據(jù)豬瘟強(qiáng)毒不引起家兔的體溫反應(yīng)，但能使家兔產(chǎn)生免疫力，當(dāng)用兔化弱毒攻擊時(shí)不引起體溫升高的表現(xiàn)，先用病料接種兔，再用兔化弱毒攻擊。如病料含強(qiáng)毒可引起體溫反應(yīng)。

2.3 免疫程序

（1）常規(guī)免疫程序：配種前注射過豬瘟苗的母豬。含有母源抗體仔豬。首免日齡20～25日齡，二免為50～60日齡。體弱，食欲不正常，發(fā)病豬注苗效果不好[5～6]。

（2）超前免疫：初生仔豬在吃乳前1～1.5h首免，斷奶后或60日齡2免。當(dāng)豬場(chǎng)長(zhǎng)期受豬瘟病毒嚴(yán)重污染時(shí)，仔豬免疫受到母源抗體影響，20日齡接種，使一部分豬成為易感豬，因個(gè)體差異母抗水平一致，如提前免疫受母抗干擾更多，推遲免疫得到抗體的保護(hù)降低。所以超前免疫是凈化豬場(chǎng)的好辦法，但母豬多在夜間分娩，同時(shí)產(chǎn)仔房溫度高，給免疫接種帶來一定困難[7～9]。

一般豬胎70日齡免疫系統(tǒng)對(duì)抗原刺激產(chǎn)生免疫應(yīng)答，而仔豬獲得的母源抗體3h產(chǎn)生，6～12h達(dá)高峰[10]。

3 豬場(chǎng)豬瘟免疫情況調(diào)查

3.1 材料與方法

3.1.1 血清的來源

2017～2018年間，隨機(jī)采集11個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)，共6910份不同階段豬群的血清樣品，其中2017年3293份；2018年3617份。不同豬群采集記錄如表1所示。對(duì)仔豬從前腔靜脈進(jìn)行采血，別的豬群要從耳緣靜脈進(jìn)行采血。對(duì)血樣采集完成后，采取常規(guī)處理，將血清分離，并置于零下20℃保存，待測(cè)。

3.1.2 診斷試劑

采用美國(guó)IDEXX公司的豬瘟抗體阻斷ELISA試劑盒。

3.1.3 儀器設(shè)備

96孔酶標(biāo)儀（美國(guó)寶特BIO-TEK公司，型號(hào)ELX800）、臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠，型號(hào)LXJ-IIC）、海爾冰箱（BCD-215KS）。

3.2 豬瘟抗體檢測(cè)方法

3.2.1 樣品和檢測(cè)試劑

被檢血清樣品；CSFV抗原包被板：CSFV陰、陽性對(duì)照血清；樣品稀釋液；（10x）洗滌液；HRPO標(biāo)記的CSFV酶標(biāo)抗體；TMB底物和終止液等。

3.2.2 檢測(cè)方法的原理

該檢測(cè)方法主要是采用阻ELISA原理，通過被CSFV包被的微量包被板，來檢測(cè)被測(cè)血清樣品中的CSFV抗體。室溫下，加入的被測(cè)樣品經(jīng)過孵育，如果被測(cè)樣品中含有特異性的CSFV抗體，那么就會(huì)與CSFV抗原產(chǎn)生結(jié)合，繼而會(huì)阻斷HRPO標(biāo)記的抗CSFV酶標(biāo)抗體和抗原的結(jié)合。通過HRPO與TMB底物進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)后的顯色的深淺程度，可以判斷出酶標(biāo)抗體和包被抗原的結(jié)合程度。

3.2.3 結(jié)果判斷

結(jié)論成立的條件：陽性對(duì)照：阻斷率>50%；陰性對(duì)照：平均OD值>0.500。

判斷條件如下：

陽性判定：阻斷率≧40%，被測(cè)樣品中有CSFV抗體存在；

陰性判定：阻斷率≦30%，被測(cè)樣品中無CSFV抗體存在；

可疑判定：30%≦阻斷率≦40%，該檢測(cè)結(jié)果的樣品來源動(dòng)物要在數(shù)天之后進(jìn)行抗體再次檢測(cè)。

3.3 豬群的整體豬瘟抗體水平情況（見表2）

4 合適首免日齡試驗(yàn)

4.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在調(diào)查基礎(chǔ)上，對(duì)規(guī)?；i場(chǎng)進(jìn)行仔豬豬瘟首免日齡試驗(yàn)，進(jìn)而全面的了解哺乳仔豬母源抗體消長(zhǎng)的規(guī)律，為確定最佳的首免日齡，制定科學(xué)合理的免疫程序提供依據(jù)。出生仔豬分別于0，1，7，14，21，28，35，42日齡從前腔靜脈采血2～3mL，進(jìn)行血清分離，檢測(cè)抗體，每天對(duì)試驗(yàn)仔豬的精神狀態(tài)，飲水、飲食，糞便、尿液進(jìn)行觀察，看是否出現(xiàn)明顯的異常表現(xiàn)。

4.2 抗體檢測(cè)結(jié)果

5 討 論

通過對(duì)規(guī)?；i場(chǎng)2017年和2018年共6910份的血清樣品進(jìn)行了抗體檢測(cè)，結(jié)果表明，2017年的豬瘟抗體的水平都不理想，測(cè)試結(jié)果的整體平均陽性率要低于70%。2018年整體的豬瘟抗體的水平均有著顯著的提高，對(duì)不同階段的豬群，進(jìn)行抗體水平調(diào)查，調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)哺乳仔豬、種公豬、后備豬、育肥豬抗體水平都比較理想，其中保育豬的平均抗體水平是豬群最低。

首免日齡為28日齡的免疫組，免疫后兩周內(nèi)抗體水平明顯上升，疫苗免疫效果比其他首免日齡免疫組要理想。結(jié)合哺乳仔豬在14日齡母源抗體水平開始下降，到35日齡時(shí)半數(shù)仔豬達(dá)不到臨界保護(hù)值的母源抗體水平消長(zhǎng)規(guī)律，認(rèn)為以28日齡為首免日齡的免疫方案較適合C畜牧公司。為達(dá)到較為理想的免疫效果，最佳的首免日齡應(yīng)是仔豬28日齡。

參考文獻(xiàn)

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收稿日期：2018-6-12

作者簡(jiǎn)介：卓 婷（1979-），女，助理獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物檢疫和動(dòng)物防疫工作。