鄭州大學附屬洛陽中心醫(yī)院(471009)盧超
咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定是一種可有效分離培養(yǎng)鑒定細菌菌株的檢測手段,常用于臨床細菌鑒定中。藥敏試驗則可有效辨別病原菌對各種抗菌藥物的耐藥情況,為臨床合理使用抗菌藥物提供信息支持。本研究探究咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定聯(lián)合藥敏試驗對手足口病患兒抗菌藥物合理使用的影響。報告如下。
1.1 一般資料 選取我院2016年1月~2017年9月3550例手足口病患兒,其中女1264例,男2286例,年齡6個月~7歲,平均(3.02±1.29)歲,病程3~10 d,平均(4.72±1.33)d。本研究經(jīng)我院倫理委員會審批通過。
1.2 試劑與儀器 采用法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的頭孢硝酚紙片、藥敏條(ATB HAEMO)、鑒定卡(APINH)、細菌分析儀(ATB Expression)及溫州市康泰生物科技有限公司生產(chǎn)的嗜血桿菌分離平板、血平板、質(zhì)控菌株HI(ATCC40247)、X因子紙片、V因子紙片、金黃色葡萄球菌(ATCC25923)、V+X因子紙片。
1.3 方法 ①標本收集、培養(yǎng)。所有患兒均于入院8h內(nèi)采集咽拭子(采用無菌拭子)送檢,于血平板、嗜血桿菌分離平板接種標本,置入35℃培養(yǎng)箱(含有8% CO2),進行孵育(1~2d)。②咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定+藥敏試驗。于分離平板上將濕潤、透明、無色的小菌落挑選出來,采取衛(wèi)星試驗,衛(wèi)星試驗、V+X因子紙片需求試驗鑒定流感嗜血桿菌陽性與否,后進行驗證(APINH鑒定卡)。藥敏試驗采用ATB HAEMO藥敏條進行,讀取結(jié)果時采用ATB Expression細菌分析儀,批間試劑質(zhì)量控制采用ATCC40247,最終藥敏結(jié)果判讀采用2010年CLSIM100-S20標準[1]。③β-內(nèi)酰胺酶檢測:菌株β-內(nèi)酰胺酶采用頭孢硝酚鈉紙片檢測,試驗步驟完全按照說明書進行,讀取試驗結(jié)果。
1.4 觀察指標 ①咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定結(jié)果。②藥敏實驗結(jié)果。
2.1 咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定結(jié)果3550例檢出流感嗜血桿菌308株,分離率為8.68%,其中β-內(nèi)酰胺酶陽性株147株,占47.73%。
2.2 藥敏試驗結(jié)果 經(jīng)藥敏實驗可知,流感嗜血桿菌對阿莫西林、氧氟沙星、利福平耐藥率、頭孢噻肟耐藥率較低,見附表。
本研究采用咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定,結(jié)果顯示,3550例手足口病患兒采取咽拭子標本分離培養(yǎng)鑒定,檢出流感嗜血桿菌308株??梢娏鞲惺妊獥U菌是手足口病的主要病原菌,其通常于上呼吸道寄居,尤其是兒童口咽部,若免疫力下降或病毒感染發(fā)生可引發(fā)中耳炎、腦膜炎、呼吸道感染等急性化膿性感染。本研究經(jīng)藥敏試驗得知,流感嗜血桿菌對復方磺胺甲惡唑、氨芐西林、四環(huán)素具有較高耐藥率,可能與細菌基因突變有關(guān),臨床在選取上述抗菌藥物治療時應注意[2]。此外,頭孢克洛耐藥率為32.47%,頭孢呋辛耐藥率為25.65%,相對較高,主要與其屬一線頭孢菌素,臨床應用較為廣泛有關(guān)。而頭孢噻肟耐藥率僅為2.60%,其屬于三代頭孢菌素,長期使用極易導致腸道或呼吸道正常菌群失調(diào),還可能導致腸桿菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶[3]。此外,本研究顯示,氧氟沙星耐藥率為9.74%,利福平耐藥率為3.57%,耐藥率較低,可能與此類藥物不利于兒童生長發(fā)育,臨床應用較少有關(guān)。
附表 藥敏結(jié)果比較(n=308)
綜上可知,手足口病的主要病原菌為流感嗜血桿菌,了解其在手足口病患兒群體中分離情況、藥敏試驗情況,有助于為臨床抗感染治療提供合理參考依據(jù),還可有效避免經(jīng)驗用藥,減少耐藥現(xiàn)象。