鄭州大學附屬洛陽中心醫(yī)院（471009）盧超

咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定是一種可有效分離培養(yǎng)鑒定細菌菌株的檢測手段，常用于臨床細菌鑒定中。藥敏試驗則可有效辨別病原菌對各種抗菌藥物的耐藥情況，為臨床合理使用抗菌藥物提供信息支持。本研究探究咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定聯(lián)合藥敏試驗對手足口病患兒抗菌藥物合理使用的影響。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2016年1月～2017年9月3550例手足口病患兒，其中女1264例，男2286例，年齡6個月～7歲，平均（3.02±1.29）歲，病程3～10 d，平均（4.72±1.33）d。本研究經(jīng)我院倫理委員會審批通過。

1.2 試劑與儀器 采用法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的頭孢硝酚紙片、藥敏條（ATB HAEMO）、鑒定卡（APINH）、細菌分析儀（ATB Expression）及溫州市康泰生物科技有限公司生產(chǎn)的嗜血桿菌分離平板、血平板、質(zhì)控菌株HI（ATCC40247）、X因子紙片、V因子紙片、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、V+X因子紙片。

1.3 方法 ①標本收集、培養(yǎng)。所有患兒均于入院8h內(nèi)采集咽拭子（采用無菌拭子）送檢，于血平板、嗜血桿菌分離平板接種標本，置入35℃培養(yǎng)箱（含有8% CO2），進行孵育（1～2d）。②咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定+藥敏試驗。于分離平板上將濕潤、透明、無色的小菌落挑選出來，采取衛(wèi)星試驗，衛(wèi)星試驗、V+X因子紙片需求試驗鑒定流感嗜血桿菌陽性與否，后進行驗證（APINH鑒定卡）。藥敏試驗采用ATB HAEMO藥敏條進行，讀取結(jié)果時采用ATB Expression細菌分析儀，批間試劑質(zhì)量控制采用ATCC40247，最終藥敏結(jié)果判讀采用2010年CLSIM100-S20標準[1]。③β-內(nèi)酰胺酶檢測：菌株β-內(nèi)酰胺酶采用頭孢硝酚鈉紙片檢測，試驗步驟完全按照說明書進行，讀取試驗結(jié)果。

1.4 觀察指標 ①咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定結(jié)果。②藥敏實驗結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定結(jié)果3550例檢出流感嗜血桿菌308株，分離率為8.68%，其中β-內(nèi)酰胺酶陽性株147株，占47.73%。

2.2 藥敏試驗結(jié)果 經(jīng)藥敏實驗可知，流感嗜血桿菌對阿莫西林、氧氟沙星、利福平耐藥率、頭孢噻肟耐藥率較低，見附表。

3 討論

本研究采用咽拭子標本菌株分離培養(yǎng)鑒定，結(jié)果顯示，3550例手足口病患兒采取咽拭子標本分離培養(yǎng)鑒定，檢出流感嗜血桿菌308株?？梢娏鞲惺妊獥U菌是手足口病的主要病原菌，其通常于上呼吸道寄居，尤其是兒童口咽部，若免疫力下降或病毒感染發(fā)生可引發(fā)中耳炎、腦膜炎、呼吸道感染等急性化膿性感染。本研究經(jīng)藥敏試驗得知，流感嗜血桿菌對復方磺胺甲惡唑、氨芐西林、四環(huán)素具有較高耐藥率，可能與細菌基因突變有關(guān)，臨床在選取上述抗菌藥物治療時應注意[2]。此外，頭孢克洛耐藥率為32.47%，頭孢呋辛耐藥率為25.65%，相對較高，主要與其屬一線頭孢菌素，臨床應用較為廣泛有關(guān)。而頭孢噻肟耐藥率僅為2.60%，其屬于三代頭孢菌素，長期使用極易導致腸道或呼吸道正常菌群失調(diào)，還可能導致腸桿菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶[3]。此外，本研究顯示，氧氟沙星耐藥率為9.74%，利福平耐藥率為3.57%，耐藥率較低，可能與此類藥物不利于兒童生長發(fā)育，臨床應用較少有關(guān)。

附表 藥敏結(jié)果比較（n=308）

綜上可知，手足口病的主要病原菌為流感嗜血桿菌，了解其在手足口病患兒群體中分離情況、藥敏試驗情況，有助于為臨床抗感染治療提供合理參考依據(jù)，還可有效避免經(jīng)驗用藥，減少耐藥現(xiàn)象。