汪柳芹 昌智華 黃瓊姑

（海南亞洲制藥股份有限公司 海南 ?？?570216）

引言

對(duì)于慶大霉素組分的分析檢測(cè)一直是藥品檢驗(yàn)人員和科研人員努力想解決的難題之一，主要有以下兩點(diǎn)原因：一是慶大霉素是強(qiáng)極性、難揮發(fā)性的化合物，在反相色譜中難以保留和分離；二是分子中缺少發(fā)色基團(tuán)或熒光物質(zhì)，因而難以采用常規(guī)的UV檢測(cè)器來(lái)對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。

本研究采用低溫分流法檢測(cè)硫酸慶大霉素C組分，擬從優(yōu)化ELSD低溫分流法儀器色譜條件，建立一個(gè)操作簡(jiǎn)單、質(zhì)量可控，重現(xiàn)性好的硫酸慶大霉素C組分測(cè)定方法。

1.材料與方法

1.1 儀器

Agilent 1260 Infinity Ⅱ型高效液相色譜儀（包括：泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱）；Agilent Openlab CDS 2.2工作站；SEDEX 75型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（迪馬公司）；十萬(wàn)分之一電子天平（梅特勒-托利多）；KQ2200型超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；微孔濾膜抽濾裝置；色譜柱:Ultimate LPC18（4.6×250mm，5μm；月旭科技公司）。

1.2 試劑

甲醇（HPLC級(jí)），Thermofisher公司；三氟乙酸（HPLC級(jí)），Anaour公司；二次蒸餾水；慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（C1a：15.2%；C2：16.9%；C2a：10.3%；C1：15.9%），中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：130326-201716；小諾霉素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（含量：51.8%），中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：130342-201404；西索米星標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（含量：56.0%），中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：130635-201301。

表2 硫酸慶大霉素供試品-1和供試品-2測(cè)試結(jié)果

1.3 色譜條件

流動(dòng)相：0.2mol/L三氟乙酸水溶液-甲醇（96:4），pH：0.76，單流路；流速：1.2ml/min；色譜柱：Ultimate LPC18，色譜柱規(guī)格：4.6×250mm，5μm；檢測(cè)條件：漂移管溫度50℃，載氣種類：空氣，載氣壓力：3.5bar；維持電壓穩(wěn)定（ELSD檢測(cè)器最好連接穩(wěn)壓器）。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

精密慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)172.52mg置于20ml容量瓶，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液（3）；精密量取慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液（3）5ml,置10ml容量瓶，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液（2）；精密量取慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液（3）2ml，置10ml容量瓶，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1）。慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列濃度見表1。

表1 慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列濃度

2.結(jié)果

測(cè)試硫酸慶大霉素樣品溶液，測(cè)試結(jié)果見表2。

3.結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)藥典2015版硫酸慶大霉素C組分測(cè)試方法—蒸發(fā)光低溫分流法實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行摸索，對(duì)流路、色譜柱、流速、電壓穩(wěn)定等多種影響因素進(jìn)行了優(yōu)化，提高了分析的準(zhǔn)確性。