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        高效液相色譜法在中藥復(fù)方制劑婦炎康有效成分含量測定中的應(yīng)用

        2018-10-19 06:36:24河南省平頂山市食品藥品檢驗所467000李華麗王小龍李梅榮葉曉亞
        首都食品與醫(yī)藥 2018年11期
        關(guān)鍵詞:婦炎兒茶酚酸

        河南省平頂山市食品藥品檢驗所(467000)李華麗 王小龍 李梅榮 葉曉亞

        婦炎康是一種中藥制劑,具有行氣止痛、逐瘀散結(jié)、益氣活血等功效,現(xiàn)已被臨床廣泛應(yīng)用于慢性盆腔炎的治療中,尤其適用于氣虛血瘀證的患者,效果確切,具有一定的臨床應(yīng)用價值[1]。本文筆者為了驗證高效液相色譜法在中藥復(fù)方制劑婦炎康有效成分含量測定的應(yīng)用效果,特選定指標成分:丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷進行查究,匯總?cè)缦隆?/p>

        1 資料與方法

        1.1 材料 丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷,所有的產(chǎn)品均來自于中國食品藥品檢定研究院。婦炎康片(生產(chǎn)企業(yè):云南白藥集團有限公司生產(chǎn)),色譜純選用的是甲醇、乙腈(生產(chǎn)企業(yè):美國Fisher公司),分析純選用的是磷酸,屬于娃哈哈純凈水(生產(chǎn)企業(yè):杭州娃哈哈集團有限公司)。

        1.2 方法:①色譜條件:Kromasil C18,規(guī)格是 4.6×250 mm;5 um。流動相是A乙腈-B甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脫。流速:每分鐘1ml,柱溫是25攝氏度。波長是285mm、230mm。進樣量是10ul。②制備溶液:a.制備對照品溶液:精密稱取丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷對照品,甲醇用于溶解,將甲醇制備成3mg/ml、0.045mg/ml、0.5mg/ml、0.2mg/ml的對照品混合液,對照品的混合液精密地量取1ml,甲醇加入后定為4ml,對照品的溶液制備成功[2]。b.制備樣品溶液:本品精密地稱取0.5g,放置在10ml的容器瓶中,加入甲醇,超聲溶解30分鐘,而后冷卻至溫度接近于室溫,用甲醇補足,進行微孔濾膜過濾,濾液取續(xù),樣品溶液制備成功[3]。③制備陰性溶液:按照②的方法制備當歸、赤芍、丹參的陰性樣品。

        2 結(jié)果

        2.1 試驗系統(tǒng)適用性 精密地吸取陰性溶液、樣品溶液、對照品溶液,按照色譜條件進行進樣,詳細記錄色譜圖。結(jié)果顯示:色譜圖下丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷的條件平穩(wěn),理論塔板數(shù)在3000以上,具有較好的分離效果[4]。

        2.2 試驗線性關(guān)系 精密吸取對照品混合液制備芍藥苷(0.2mg/ml、1mg/ml、0.05mg/ml、0.0025mg/ml、0.0013mg/ml)、丹酚酸(3mg/ml、0.15mg/ml、0.075mg/ml、0.038mg/ml、0.0019mg/ml)、原兒茶醛(0.045mg/ml、0.023mg/ml、0.0115mg/ml、0.0058mg/ml、0.0029mg/ml)、丹參素(0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.0125mg/ml、0.0625mg/ml、0.0313mg/ml)五種混合對照品溶液。按照色譜條件進行進樣,對峰面積進行詳細記錄,以濃度以及峰面積進行線性回歸。得到的丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷回歸方程為:Y=3.96X-7.21(r=0.8265)、Y=3.18X-8.06(r=0.9204)、Y=5.26X-6.35(r=0.9991)、Y=4.21X-9.26(r=0.9033);濃度在峰面積以及上述范圍中線性關(guān)系良好。

        2.3 試驗精密度 對照品混合液精密地抽取6次,丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷的峰面積的RSD值分別是1.26%、1.15%、1.06%、1.31%,說明儀器具有良好的精密度。

        2.4 試驗穩(wěn)定性 對供試品溶液進行精密的吸取,按照色譜條件進行進樣,分別在0h、2h、4h、8h、12h、24h進樣,對峰面積進行詳細的記錄,丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷的峰面積的RSD值分別是1.46%、1.39%、1.51%、1.49%,說明在24小時之內(nèi)樣品溶液的穩(wěn)定性較好。

        2.5 試驗重復(fù)性 取婦炎康樣品,根據(jù)樣品溶液的制備方法制定樣品6份,對峰面積進行記錄,峰面積的RSD值分別是1.02%、1.09%、1.14%、1.12%,說明該方法的良好性較好。

        2.6 試驗加樣回收率 每份含量是0.25g的婦炎康片,一共取6份,加入適量的對照品。根據(jù)溶液的制備方法制備,RSD值分別是1.05%、0.96%、0.98%、1.01%,試驗加樣回收率分別是100.25%、102.14%、100.25%、100.08%,說明該方法具有較好的試驗加樣回收率,見附表。

        2.7 分析樣品含量檢測結(jié)果 隨機取4批婦炎康樣品含量,根據(jù)溶液制備的方法予以制備,峰面積詳細記錄,批號為16030205的,丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷含量分別是4.0626、0.0625、0.6682、0.2351。1603182的分別是4.1214、0.0612、0.6725、0.2206。1603253的分別是4.0125、0.0611、0.6926、0.2415。

        附表 試驗加樣回收率

        3 討論

        婦炎康是當前被臨床廣泛應(yīng)用于治療陰道炎、盆腔炎、慢性附件炎等疾病的中藥制劑,具有軟堅散結(jié)、活血化瘀、消炎止痛、清熱解毒等功效,抗感染以及抗炎效果顯著。它由丹參、黃柏、莪術(shù)、赤芍等多種成分組成,對病原微生物、纖維化以及膠原活性均具有一定的抑制效果,具有較好的治療效果。高效液相色譜法具有高靈敏度、靈活性較強以及分離度較高等一系列優(yōu)點[5][6][7]。本研究中,高效液相色譜法測量了丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷的含量,經(jīng)過試驗證明該方法在檢測婦炎康有效成分中的準確性以及精密度均較高,并且所需要的樣品容量較少,在中藥制劑的質(zhì)量控制中具有一定價值,在臨床中具有較高的借鑒力度,值得推廣。

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