李澤銳 高 靜
(1 伊犁州新華醫(yī)院檢驗科,新疆 伊犁 835000;2 解放軍第十一醫(yī)院,新疆 伊犁 835000)
乙型肝炎位于世界人口病死率第10位,全球感染人數(shù)約為艾滋病的8倍,我國為乙型肝炎高發(fā)國家,流行病學(xué)調(diào)查顯示,人群發(fā)生乙型肝炎概率極高,表面抗原攜帶率大約為15%[1]。臨床上檢測HBV的方法中酶聯(lián)免疫吸附法為傳統(tǒng)方法,技術(shù)較為成熟,而乙型肝炎五項主要包含乙型肝炎e抗原(HBeAg),乙型肝炎表面抗體(HBsAb),乙型肝炎表面抗原(HBsAg),乙型肝炎核心抗體(HBcAb)和乙型肝炎e抗體(HBeAb)[2]。熒光定量PCR具有高靈敏度、高特異性及高精確度,廣受臨床檢驗人員的青睞,而化學(xué)發(fā)光酶免疫法不僅具有高靈敏度、高特異性及廣泛的線性范圍,還具有長時間有效的標(biāo)志物及高的自動化程度,逐漸于乙型肝炎病毒感染檢測中應(yīng)用,尤其是乙型肝炎五項。
1.1 一般資料:隨機選取2012年6月至2015年6月在我院門診和住院的乙型肝炎患者68離,包括47例男性患者,年齡在21~58歲,平均年齡(43.51±10.04)歲;21例女性患者,年齡在25~57歲,平均年齡(36.19±11.40)歲。乙型肝炎診斷標(biāo)準符合文獻[2]。
1.2 檢測儀器和方法。方法一:對HBV-DNA的檢測選用羅氏公司的LightCycler2.0PCR儀進行檢測,試劑盒選用的為上海普眾華有限公司[3]。方法二:對血清的乙型肝炎五項檢測選用的為強生公司的VITROS3600儀進行檢測,按照說明書進行相關(guān)操作,每天在室內(nèi)進行質(zhì)控,每次檢測包括了對HBV陰性和HBV陽性的重復(fù)檢測[4]。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)準確無誤的用SPASS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行處理。、t檢驗表示計量資料,(%)表示計數(shù)資料,χ2表示組間對比,P<0.05差異顯著有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 實驗結(jié)果統(tǒng)計:實驗結(jié)果顯示,所有乙型肝炎五項血清標(biāo)本檢測中,HBV-DNA陽性標(biāo)本血清學(xué)標(biāo)志物的陽性模式共有10種,其中大三陽組(HBsAg+,HBcAb+,HBeAg+)和小三陽組(HBsAg+,HBcAb+,HBeAb+)所占比例最大,除此之外,HBcAb陽性標(biāo)本總計66例,約占所有HBV-DNA陽性標(biāo)本的97.5%。見表1。
表1 10種血清學(xué)模式標(biāo)本的HBV-DNA載量分布
2.2 HBV-DNA的分布:將HBV-DNA載量分為低載量、中載量、高載量 三級。結(jié)果顯示134組三陽組:低載量占17.9%,中載量占17.4%,高載量占64.7%,135組小三陽:低,中,高載量的相應(yīng)比例分別為81.3%,15.8%,2.9%差異顯著,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
2.3 HBeAg與HBeAb陽性標(biāo)本中HBV-DNA載量分布:在68例實驗中,對低中高三組符合相應(yīng)條件的樣本例數(shù)進行統(tǒng)計,結(jié)果顯示:高載量組有60.9%的陽性標(biāo)本,低載量組有76.7%陽性標(biāo)本 ,差異顯著,P<0.05,見表2。
表2 HBeAg陽性組與HBeAb 陽性組標(biāo)本的HBV-DNA載量分布
熒光定量PCR檢測和化學(xué)發(fā)光酶免疫法都是定量試驗,但二者的檢測原理和檢測標(biāo)志物存在差異,因此不能直接相比較,HBV-DNA復(fù)制程度的檢測是熒光定量PCR從分子水平直接進行檢測的,能夠?qū)颊咧委煹念A(yù)后恢復(fù)情況進行準確反映;而化學(xué)發(fā)光酶免疫法僅僅為化學(xué)發(fā)光結(jié)合酶免疫實驗其中的一種技術(shù)[5]。實驗結(jié)果顯示:所有實驗樣本中大三陽和小三陽所占比例最高,其中小三陽組(135組)中低,中,高載量的相應(yīng)比例分別為81.3%、15.8%、2.9%,大三陽組(134組)中低載量占16.9%,中載量所占比例為17.4%,高載量所占比例為64.7,兩組差異P<0.05,具有統(tǒng)計學(xué)意義;HBeAb和HBeAg陽性標(biāo)本在HBV-DNA水平存在差異,P<0.05,具有統(tǒng)計學(xué)意義。
綜上所述,熒光定量PCR檢測HBV-DNA與化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測乙型肝炎五項水平在判斷乙型肝炎病毒感染病程的相關(guān)性具有理想效果,二者的結(jié)合可以多方位全面的反映乙型肝炎患者的病程轉(zhuǎn)歸及其預(yù)后恢復(fù)。