張尚衛(wèi) 黃大鵬

(黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院，大慶163319)

胎盤俗稱胎衣，中醫(yī)稱為紫河車?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，胎盤內(nèi)含有多種生物活性物質(zhì)如蛋白質(zhì)、氨基酸、免疫調(diào)節(jié)肽、生殖激素、礦物質(zhì)、維生素及多種功能因子，這些活性物質(zhì)能夠提高機(jī)體免疫力，調(diào)節(jié)體內(nèi)激素水平，促進(jìn)生長，并且在臨床上對一些頑固性疾病的治療也有良好效果[1]。王丹等[2]研究表明，豬胎盤凍干粉能夠顯著提高小鼠脾臟指數(shù)和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活性以及外周血T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。徐紅[3]研究發(fā)現(xiàn)，豬胎盤具有促進(jìn)泌乳的功效，給哺乳期缺乳患者服用豬胎盤制劑后，其排乳次數(shù)、泌乳量以及乳汁品質(zhì)均有所提升。吳凌等[4]研究表明，在健康愛拔益加(AA)肉仔雞飼糧中分別加入1%和2%豬胎盤粉劑能能夠顯著提高肉仔雞的日增重、縮短出籠時間。我國基礎(chǔ)母豬飼養(yǎng)量近4 000萬頭，以每頭母豬年產(chǎn)2胎次計算，豬胎盤產(chǎn)量十分巨大，很多豬場將豬胎盤進(jìn)行簡單加工處理給哺乳母豬投服，用以改善哺乳母豬的泌乳能力和免疫功能，但對于豬胎盤制劑飼喂哺乳母豬的科學(xué)研究卻少有相關(guān)報道。因此，本試驗在哺乳母豬飼糧中添加不同劑量的豬胎盤粉劑，研究其對哺乳母豬繁殖性能、血清免疫和生殖激素指標(biāo)及乳成分的影響，旨在為開發(fā)豬胎盤在養(yǎng)豬場中的應(yīng)用提供更多理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

豬胎盤粉的制作：從實驗豬場收集新鮮母豬胎盤，經(jīng)實驗室反復(fù)清洗、消毒、烘干、粉碎包裝而得。具體工藝流程為：采集鮮活胎盤→剔除異常胎盤→清洗→打漿→干燥→粉碎→真空包裝。將打漿后的胎盤碎片均勻平鋪于不銹鋼烘干盤中，用DZF-6903型真空干燥箱分2階段干燥。首先將胎盤組織置于溫度65 ℃，真空度77.327 kPa條件下烘干4 h，然后將溫度和真空度分別調(diào)為55 ℃和79.993 kPa，烘干20 h，整個烘干過程為24 h。用DWF-90型粉碎機(jī)將烘干胎盤組織粉碎，過80目篩后快速真空包。經(jīng)實驗室測定，豬胎盤粉營養(yǎng)成分含量如表1所示。

表1 豬胎盤粉營養(yǎng)成分含量

1.2 試驗設(shè)計及飼糧

選擇預(yù)產(chǎn)期、體重、胎次相近的經(jīng)產(chǎn)大×長二元母豬36頭，隨機(jī)分為4個組，每組9個重復(fù)，每個重復(fù)1頭豬。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加1%、3%、5%的豬胎盤粉。試驗開始于母豬妊娠104 d，至產(chǎn)后21 d結(jié)束。

母豬基礎(chǔ)飼糧參照NRC(2012)哺乳母豬營養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)配制，試驗組飼糧在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上依據(jù)豬胎盤粉的添加量及營養(yǎng)成分含量，調(diào)整蛋白質(zhì)原料用量，使各組飼糧粗蛋白質(zhì)水平一致。試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表2 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表2項目 Items組別 Groups對照 Control ⅠⅡⅢ鈣 Ca0.780.730.760.85磷 P0.610.630.580.60賴氨酸 Lys0.820.820.810.80

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of diets：VA 5 000 IU，VD3250 IU，VE 44 IU，VK30.50 mg，VB11.00 mg，VB23.75 mg，D-泛酸D-pantothenic acid 12 mg，煙酸 nicotinic acid 10 mg，VB61.00 mg，VB120.02 mg，生物素 biotin 0.20 mg，葉酸 folic acid 1.30 mg，Cu 15 mg，F(xiàn)e 150 mg，Mn 60 mg，Zn 150 mg，I 0.30 mg，Se 0.30 mg。

2)營養(yǎng)水平為計算值。Nutrient levels were calculated values.

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗豬產(chǎn)前7 d進(jìn)入產(chǎn)房適應(yīng)環(huán)境，飼糧由妊娠母豬料更換為哺乳母豬料，開始正式試驗(妊娠104 d開始)。母豬產(chǎn)前3 d進(jìn)行產(chǎn)前限飼，日飼喂量1～2 kg，分娩當(dāng)天不進(jìn)行飼喂，產(chǎn)后2～3 d飼喂量達(dá)到2～3 kg/d，第4天開始自由采食；豬只自由飲水，保持圈舍清潔干燥；仔豬28日齡斷奶，其他飼養(yǎng)管理及免疫程序均按豬場標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一進(jìn)行。

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 哺乳母豬繁殖性能、體況及采食量的測定

母豬繁殖性能：在分娩當(dāng)天記錄母豬窩產(chǎn)活仔數(shù)，稱量仔豬初生個體重(體重<0.9 kg仔豬不計入統(tǒng)計數(shù)據(jù))。哺乳期第21天和第28天(斷奶日)稱量哺乳仔豬個體重并記錄，分別計算出哺乳仔豬21日齡窩重、斷奶個體均重、斷奶窩重和泌乳期平均日增重。并記錄母豬斷奶-再發(fā)情時間間隔。

母豬體況變化：于母豬分娩當(dāng)天和分娩后第28天(斷奶日)稱量母豬體重和背膘厚度(母豬最后肋骨距背中線6.5 cm處測定)并記錄，計算哺乳期母豬體重?fù)p失和母豬背膘變化。

母豬采食量：準(zhǔn)確記錄每頭母豬日采食量，并分別計算出各組母豬的平均日采食量。

1.4.2 血清免疫和生殖激素指標(biāo)的測定

于分娩后第3天和第15天早晨飼喂前，每組隨機(jī)選取3頭母豬(共12頭)進(jìn)行前腔靜脈采血10 mL，常溫靜置15 min后，離心15 min(3 000 r/min)，取血清分裝于1.5 mL離心管中，-20 ℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒測定白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、干擾素-γ(IFN-γ)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、促黃體生成素(LH)、催乳素(PRL)的含量。

1.4.3 乳成分的測定

哺乳期第14天每頭母豬分別于前、中、后3個乳頭采集乳汁(常乳)后進(jìn)行混合，每頭共采集20 mL乳樣，-20 ℃下保存待測。用MILK YWAY-CP2全自動乳成分分析儀進(jìn)行分析測定，測定指標(biāo)包括乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和非脂固形物含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)用Excel 2012軟件進(jìn)行初步處理，采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，并采用LSD法進(jìn)行組間多重比較，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié) 果

2.1 豬胎盤粉對哺乳母豬繁殖性能及體況的影響

由表3可知，試驗Ⅲ組泌乳力、仔豬斷奶個體均重和仔豬斷奶窩重均極顯著高于對照組(P<0.01)，試驗Ⅱ、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)。試驗Ⅲ組泌乳力顯著高于試驗Ⅰ組(P<0.05)，仔豬斷奶個體均重極顯著高于試驗Ⅰ組(P<0.01)。對照組仔豬平均日增重顯著低于試驗Ⅱ組(P<0.05)，極顯著低于試驗Ⅲ組(P<0.01)，而試驗Ⅱ、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)。試驗Ⅱ、Ⅲ組母豬平均日采食量均顯著高于對照組和試驗Ⅰ組(P<0.05)，且試驗Ⅲ組最高。試驗Ⅲ組母豬體重?fù)p失顯著低于對照組和試驗Ⅰ組(P<0.05)，而試驗Ⅱ、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)。各組之間初生仔豬個體均重、母豬背膘變化以及斷奶-發(fā)情時間間隔均無顯著差異(P>0.05)。

表3 豬胎盤粉對哺乳母豬繁殖性能及體況的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 豬胎盤粉對哺乳母豬分娩后第3天血清免疫指標(biāo)的影響

由表4可知，哺乳母豬分娩后第3天，試驗Ⅱ組血清IL-6含量極顯著高于試驗Ⅰ組(P<0.01)，顯著高于對照組和試驗Ⅲ組(P<0.05)。與試驗Ⅲ組對比，試驗Ⅰ組血清TNF-α和IgG含量均顯著升高(P<0.05)，血清IgM含量極顯著升高(P<0.01)，其余各組間的血清TNF-α含量差異不顯著(P>0.05)。試驗Ⅰ組血清IgM含量極顯著高于對照組(P<0.01)，試驗Ⅰ組、Ⅱ組之間差異不顯著(P>0.05)。試驗Ⅱ組血清IgG含量顯著高于試驗Ⅲ組(P<0.05)，試驗Ⅰ、Ⅱ組和對照組之間差異不顯著(P>0.05)。試驗Ⅰ組血清IFN-γ和IgA含量顯著高于對照組(P<0.05)，而試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組之間血清IFN-γ和IgA含量差異不顯著(P>0.05)。

表4 豬胎盤粉對哺乳母豬分娩后第3天血清免疫指標(biāo)的影響

2.3 豬胎盤粉對哺乳母豬分娩后第15天血清免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，哺乳母豬分娩后第15天，試驗Ⅲ組血清IL-6含量顯著低于對照組和試驗Ⅱ組(P<0.05)，試驗Ⅰ、Ⅲ組之間以及對照組、試驗Ⅱ組之間差異均不顯著(P>0.05)。與對照組比較，試驗Ⅱ、Ⅲ組血清IFN-γ含量均顯著降低(P<0.05)，而對照組與試驗Ⅰ組之間差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅱ、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比，試驗Ⅱ組血清IgA含量極顯著升高(P<0.01)，試驗Ⅲ組與對照組之間差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅰ、Ⅱ組之間差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比，試驗Ⅰ組血清IgM含量極顯著升高(P<0.01)，而對照組和試驗Ⅱ、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)。試驗Ⅱ組血清IgG含量極顯著高于試驗Ⅲ組(P<0.01)，顯著高于對照組(P<0.05)，而對照組和試驗Ⅰ、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)。各組之間血清TNF-α含量差異均不顯著(P>0.05)。

2.4 豬胎盤粉對哺乳母豬血清生殖激素指標(biāo)影響

由表6可知，哺乳母豬分娩后第3天，試驗Ⅱ、Ⅲ組血清PRL含量顯著高于對照組(P<0.05)，而試驗Ⅱ、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅰ組與對照組之間差異不顯著(P>0.05)。哺乳母豬分娩后第15天，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組血清PRL含量均極顯著高于對照組(P<0.01)，并且試驗Ⅱ組血清PRL含量最高，顯著高于試驗Ⅰ組(P>0.05)；試驗Ⅰ、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)。哺乳母豬分娩后第15天血清PRL含量與分娩后第3天比較各組均有所下降，2階段各組之間血清LH含量均無顯著差異(P>0.05)。

表6 豬胎盤粉對哺乳母豬血清生殖激素指標(biāo)的影響

2.5 豬胎盤粉對哺乳母豬乳成分的影響

由表7可知，試驗Ⅲ組乳脂率顯著高于對照組和試驗Ⅰ組(P<0.05)，試驗Ⅱ組、Ⅲ組之間差異不顯著(P>0.05)。試驗Ⅲ組乳糖率極顯著高于對照組和試驗Ⅰ組(P<0.01)，試驗Ⅱ組乳糖率也顯著高于對照組和試驗Ⅰ組(P<0.05)。各組之間乳

蛋白率和非脂固形物含量無顯著差異(P>0.05)。

表7 豬胎盤粉對哺乳母豬乳成分的影響

3 討 論

3.1 豬胎盤粉對哺乳母豬繁殖性能和體況的影響

近年來，隨著規(guī)模化養(yǎng)殖技術(shù)和育種水平的不斷進(jìn)步，母豬繁殖性能得到很大提升，哺乳仔豬生長性能是衡量母豬繁殖性能的重要指標(biāo)。哺乳階段仔豬的營養(yǎng)攝入主要來源于母乳，仔豬能否健康生長很大程度上由母豬健康程度和乳汁的質(zhì)量來決定，量多質(zhì)優(yōu)的母乳能使仔豬生長速度快、免疫力強(qiáng)、斷奶重大，對仔豬的后期育肥有很大幫助。

關(guān)于動物胎盤制劑添加入畜禽飼糧對畜禽繁殖性能及促生長作用的報道相對較少，而對其生物活性物質(zhì)的研究相對較多。研究發(fā)現(xiàn)，動物胎盤內(nèi)含有多種免疫調(diào)節(jié)物質(zhì)，這些物質(zhì)能促進(jìn)小鼠淋巴細(xì)胞增殖分化，提高機(jī)體免疫力；同時還對骨髓造血功能有促進(jìn)作用，可起到補血養(yǎng)血的效果[5-6]。陸暉等[7]研究表明，動物胎盤中含有14種微量元素和16種氨基酸，其中含7種人體必需氨基酸和8種微量元素。黃紅英[8]研究發(fā)現(xiàn)，在哺乳母豬飼糧中添加一定量氨基酸能夠有效提高乳汁中乳脂率、乳蛋白率以及總固形物、非脂固形物的含量，同時仔豬斷奶窩重和日增重也得到相應(yīng)的提升。本試驗結(jié)果顯示，分別在飼糧中添加1%、3%、5%的豬胎盤粉劑均可提高母豬泌乳力和仔豬斷奶個體均重，同時泌乳期仔豬平均日增重也高于對照組。試驗中豬胎盤粉不僅能夠提高母豬機(jī)體免疫力，還能有效補充母豬體內(nèi)的微量元素和調(diào)節(jié)氨基酸水平，從而提高母豬的泌乳能力和乳汁品質(zhì)。從結(jié)果看來，均與上述研究結(jié)果相一致，分析其原因可能是豬胎盤粉劑中的免疫調(diào)節(jié)物質(zhì)對母豬的健康提供了保障，同時豬胎盤粉中的一些微量元素被母豬吸收入血液后，一方面參與乳汁的合成提高乳品質(zhì)，另一方可能這些微量元素通過血乳屏障進(jìn)入乳汁而被仔豬所攝取，從而促進(jìn)了仔豬健康生長。

3.2 豬胎盤粉對哺乳母豬血清免疫和生殖激素指標(biāo)的影響

Lamm[9]研究報道，IgA、IgG、IgM為體液免疫中的主要成分，均具有抵御病原體入侵的能力，其中IgA主要參與黏膜免疫，在黏膜組織中形成免疫復(fù)合物抵抗外來病原對機(jī)體的損害；IgM是初次體液免疫應(yīng)答早期階段產(chǎn)生的主要抗體，具有較強(qiáng)的抗感染作用；而IgG的含量最高，約占免疫球蛋白總量的75%，一般情況下IgG的含量直接反映機(jī)體免疫力的水平。IFN-γ和IL-6也是重要的免疫相關(guān)細(xì)胞因子，起著免疫調(diào)節(jié)的作用。關(guān)于胎盤制劑直接影響動物機(jī)體免疫物質(zhì)的研究較少，但胎盤因子對動物機(jī)體免疫器官的影響報道卻較多。崔玉丹等[10]研究發(fā)現(xiàn)，胎盤粉劑可顯著增加小鼠脾臟和胸腺的重量以及脾淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率。方廖瓊等[11]利用羊胎盤因子對小鼠進(jìn)行試驗，顯示羊胎盤因子可顯著提高脾B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力，同時小鼠血液中IgG含量比低計量組顯著升高。本試驗結(jié)果顯示，各試驗組中，在母豬產(chǎn)后第3天和第15天血清中IgA、IgG、IgM的含量均高于對照組，而血清IL-6含量以3%劑量組最高，血清IFN-γ含量以1%劑量組最高。其結(jié)果與上述的研究報道相一致，說明豬胎盤粉對哺乳母豬免疫力有一定的影響。同時，胎盤中含有PRL，PRL能夠促進(jìn)乳汁的分泌和改善乳質(zhì)[12-13]。本試驗結(jié)果顯示，各試驗組血清中PRL含量均高對照組，3%和5%劑量組血清PRL含量較高。與母豬產(chǎn)后第3天血清PRL含量相比較，第15天血清PRL含量均有所降低，但試驗組仍然高于對照組。這說明豬胎盤粉能夠明顯促進(jìn)哺乳母豬的泌乳能力，這與前人研究結(jié)果[14]相一致。

3.3 豬胎盤粉對哺乳母豬乳成分的影響

本試驗結(jié)果顯示，各試驗組乳汁中乳糖率和乳脂率均高于對照組，其中以3%和5%劑量組較高，但各組乳蛋白率和非脂固形物含量無顯著差異。乳糖、乳脂、乳蛋白是乳汁中的主要營養(yǎng)成分，也是衡量乳汁品質(zhì)的重要指標(biāo)，其含量往往直接影響到哺乳仔豬的生長發(fā)育，乳糖和乳蛋白主要供給仔豬能量消耗，乳脂主要用于新生仔豬脂肪沉積[15]。影響乳汁中乳成分的因素很多，其中包括哺乳母豬微量元素、氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)的攝入量以及母豬體內(nèi)激素水平。胎盤中富含多種生物活性物質(zhì)、微量元素、氨基酸以及生殖激素等。相關(guān)研究報道，胎盤中不僅有PRL等生殖激素，還含有14種微量元素和16種氨基酸，其中包括多種人體必需微量元素和氨基酸[7，12]。本試驗結(jié)果中各試驗組乳糖率、乳脂率的升高，可能是由于豬胎盤粉中所提供的多種微量元素和氨基酸以及PRL共同作用所引起的。Ben-Jonathan等[16]研究發(fā)現(xiàn)，PRL可以促進(jìn)乳腺中乳糖和乳脂的合成，同時乳蛋白的產(chǎn)量也會有所增加。陳建暉等[13]研究表明，PRL能促進(jìn)奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白和乳糖的分泌能力，使乳汁中乳糖和乳脂的含量得到提升。而本試驗血清生殖激素指標(biāo)部分結(jié)果也明確顯示，各試驗組血清中的PRL含量顯著高于對照組，這就更進(jìn)一步推斷乳糖和乳脂含量的升高與豬胎盤粉中的PRL或其他生殖激素有著密切的關(guān)系，其相關(guān)機(jī)制還需進(jìn)一步驗證。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加豬胎盤粉對哺乳母豬繁殖性能、血清免疫和生殖激素指標(biāo)及乳成分都有不同程度的改善作用。母豬繁殖性能中以母豬泌乳力、仔豬斷奶個體均重、泌乳期仔豬平均日增重變化最為明顯，血清免疫指標(biāo)中以血清IgA、IgG、IgM、IL-6和IFN-γ含量的提升最為明顯，血清生殖激素指標(biāo)中以血清PRL含量的升高最為明顯，乳成分中以乳糖率和乳脂率的升高最為明顯。

② 綜合本試驗研究結(jié)果，當(dāng)豬胎盤粉添加量為3%時，能夠更好地改善哺乳母豬繁殖性能、血清免疫和生殖激素指標(biāo)及乳品質(zhì)。