王夢(mèng)玥，李 騰，蔣曙光，莫 然

(中國(guó)藥科大學(xué)高端藥物制劑與材料研究中心，江蘇南京210009)

惡性腫瘤是對(duì)人類(lèi)健康造成嚴(yán)重威脅的頭號(hào)殺手[1]。目前，臨床上治療惡性腫瘤的主要方法包括手術(shù)治療、化療和放療。但是，手術(shù)治療無(wú)法針對(duì)已發(fā)生轉(zhuǎn)移的腫瘤患者，只能對(duì)早期腫瘤患者進(jìn)行手術(shù)，而化療和放療有很強(qiáng)的毒副作用，會(huì)對(duì)患者的免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)造成損傷[2-4]。臨床上多采用聯(lián)合用藥的方式治療惡性腫瘤，基于兩種或多種藥物聯(lián)用的腫瘤聯(lián)合治療已經(jīng)成為臨床腫瘤治療的常用方案，不同藥物聯(lián)合用藥，取長(zhǎng)補(bǔ)短，發(fā)揮協(xié)同作用，增強(qiáng)抗腫瘤活性，降低毒副作用[5]。但是，不同藥物由于物理化學(xué)性質(zhì)的不同，在體內(nèi)具有不同的藥物動(dòng)力學(xué)特性，導(dǎo)致在腫瘤組織的藥物分布比例不同，從而使藥物聯(lián)用達(dá)不到預(yù)期療效。近年來(lái)，隨著納米技術(shù)的飛速發(fā)展，脂質(zhì)體作為藥物遞送系統(tǒng)能夠改善藥物的體內(nèi)分布，提高藥物在腫瘤部位的富集量，降低毒副作用[6-7]。已有多個(gè)抗腫瘤藥物的脂質(zhì)體制劑上市并用于腫瘤的臨床治療?；谥|(zhì)體的共遞藥系統(tǒng)能夠輸送多種藥物至腫瘤部位，增強(qiáng)藥物的協(xié)同作用，具有很大的開(kāi)發(fā)潛力和市場(chǎng)前景[6,8-9]。

因此，本文中，筆者主要介紹脂質(zhì)體的發(fā)展以及脂質(zhì)體共載體系用于腫瘤聯(lián)合治療的研究進(jìn)展，以期為相關(guān)研究者提供參考。

1 脂質(zhì)體概述

1.1 脂質(zhì)體的發(fā)展歷程

1961年，脂質(zhì)體概念的首位提出者Bangham[10]發(fā)現(xiàn)磷脂分子可在水中分散，自發(fā)形成閉合的雙分子囊泡，這種具有球形囊泡結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)顆粒被稱為脂質(zhì)體，這一發(fā)現(xiàn)為脂質(zhì)體的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)[11-12]。1972年，Gregoriadis等[13]制備了包載淀粉葡萄糖苷酶和碘-131標(biāo)記的白蛋白的脂質(zhì)體，首次將脂質(zhì)體應(yīng)用于生物大分子的輸送。1995年，鹽酸阿霉素脂質(zhì)體(Doxil?)作為第一個(gè)抗腫瘤藥物的脂質(zhì)體制劑被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)上市，用于乳腺癌、卵巢癌以及艾滋病相關(guān)的卡波氏肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤等癌癥的化療。這是納米醫(yī)藥領(lǐng)域發(fā)展的一個(gè)里程碑。目前為止，已有多個(gè)脂質(zhì)體制劑上市并在臨床上得到了應(yīng)用，如柔紅霉素脂質(zhì)體(DaunoXome?)、紫杉醇脂質(zhì)體(Lipusu?)和長(zhǎng)春新堿脂質(zhì)體(Marqibo?)[14-16]。

1.2 脂質(zhì)體的組成

脂質(zhì)體的主要組成成分是磷脂和膽固醇。常用的磷脂材料有磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇和磷脂酸等。細(xì)胞膜脂質(zhì)雙分子層主要由磷脂組成，因此磷脂具有低毒性和良好的生物相容性。膽固醇是一種中性脂質(zhì)，約占所有動(dòng)物細(xì)胞膜成分的30%，是生物膜的重要成分之一。膽固醇可通過(guò)與磷脂的脂肪酸鏈相互作用維持膜穩(wěn)定性，在生理溫度下增加膜包裝以調(diào)節(jié)膜流動(dòng)性[17-19]。磷脂和膽固醇是制備脂質(zhì)體的基本材料，其他功能化脂質(zhì)體可在基本材料的基礎(chǔ)上根據(jù)研究目的或治療作用作多重修飾。

陽(yáng)離子脂質(zhì)體是近年來(lái)研究較廣的用于基因遞送的納米載體[20-21]。陽(yáng)離子脂質(zhì)體一般由陽(yáng)離子脂質(zhì)和中性輔助脂質(zhì)組成，陽(yáng)離子脂質(zhì)包括2,3-二油酰氧丙基-1-溴化三甲胺(DOTMA)、(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺(DOTAP)和溴化二甲基雙十八烷基銨(DDAB)等。1987年，F(xiàn)elgner等[22]首次采用陽(yáng)離子脂質(zhì)體裝載基因藥物。之后，研究人員又合成了大量陽(yáng)離子脂質(zhì)，可作為細(xì)胞轉(zhuǎn)染素(cytofectins)或轉(zhuǎn)染試劑(lipofection reagents)，制備基因遞送載體用于基因治療。陽(yáng)離子脂質(zhì)體具有更好的穿膜能力，可有效提高基因轉(zhuǎn)染效率。與病毒類(lèi)載體相比，陽(yáng)離子脂質(zhì)體的合成工藝快速簡(jiǎn)單，并且毒性較低。目前，有許多陽(yáng)離子脂質(zhì)體處于Ⅰ、Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段[23]。其中，可將囊性纖維化基因(pGT21)轉(zhuǎn)運(yùn)至靶細(xì)胞的陽(yáng)離子脂質(zhì)體正處于Ⅰ期臨床研究階段[24]。

陽(yáng)離子脂質(zhì)體主要用于包載DNA和RNA等基因，并可用來(lái)與化療藥物共同遞送，如阿霉素(DOX)、紫杉醇(PTX)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、順鉑(CDDP)及長(zhǎng)春新堿等。基因與抗腫瘤藥物脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)在腫瘤聯(lián)合治療中也表現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力。

1.3 脂質(zhì)體的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)

脂質(zhì)體藥物與游離藥物相比，可提高藥物的穩(wěn)定性，延長(zhǎng)體內(nèi)半衰期，提高藥物對(duì)腫瘤組織的靶向性和滲透性。與其他納米遞送系統(tǒng)相比，脂質(zhì)體不僅可以荷載親水性和疏水性藥物，即將親水性分子裝載在脂質(zhì)體的內(nèi)腔，而將疏水性分子包埋于脂質(zhì)雙分子層中，還具有材料來(lái)源廣泛、生物相容性好、生物可降解、免疫原性低和毒性低等優(yōu)勢(shì)[25]。因此，脂質(zhì)體在藥物遞送領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。

將化療藥物、生物藥物等共載于脂質(zhì)體中組成脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)也具有許多優(yōu)勢(shì)。首先，在脂質(zhì)體表面可進(jìn)行多種修飾(如，靶頭、細(xì)胞穿膜肽、腫瘤微環(huán)境響應(yīng)性多肽)，利用實(shí)體瘤的“增強(qiáng)滲透與滯留”效應(yīng)，使共載藥脂質(zhì)體攜帶的藥物富集于腫瘤組織；其次，脂質(zhì)體中藥物的釋放速度具有可控性，可使藥物間的比例長(zhǎng)時(shí)間維持在脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)中的比例，從而更好地發(fā)揮協(xié)同作用。

1.4 脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)的臨床應(yīng)用

目前，脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)在臨床方面的應(yīng)用也很有發(fā)展前景，研究較多的公司是Celator公司。該公司正在進(jìn)行臨床研究的共載脂質(zhì)體主要有2種，分別為CPX-1和CPX-351。表1總結(jié)了近幾年這2種共載兩藥脂質(zhì)體制劑的臨床試驗(yàn)情況。CPX-1[26]是共載伊立替康和氟尿苷(摩爾比為1∶ 1)的脂質(zhì)體注射液，用于治療晚期結(jié)直腸癌，目前已完成Ⅱ期臨床試驗(yàn)。Ⅰ期臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，患者對(duì)CPX-1的耐受性良好，且摩爾比為1∶ 1的藥物比例可在體內(nèi)維持8～12 h。CPX-351[27-29]是共載阿糖胞苷和柔紅霉素(摩爾比為5∶ 1)的脂質(zhì)體注射液，用于治療急性髓細(xì)胞白血病(AML)、急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)和骨髓增生異常綜合征(MDS)。Ⅰ期臨床試驗(yàn)中藥物代謝動(dòng)力學(xué)結(jié)果表明，當(dāng)CPX-351給藥量為24 units/m2時(shí)，CPX-351中阿糖胞苷(半衰期(t1/2)為43 h，藥時(shí)曲線下面積(AUC∞)為600 μg·h/mL)和柔紅霉素(t1/2為19 h，AUC∞為600 μg·h/mL)的t1/2較阿糖胞苷游離藥物的(t1/2為10 min)得到顯著延長(zhǎng)，并且可在體內(nèi)穩(wěn)定維持兩藥比例5∶ 1(摩爾比)超過(guò)24 h。

此外，很多脂質(zhì)體共遞藥系統(tǒng)正進(jìn)行臨床前研究。如，共載長(zhǎng)春新堿與拓?fù)涮婵档闹|(zhì)體的藥物代謝動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與同比例的長(zhǎng)春新堿游離藥物(t1/2為1 h)、拓?fù)涮婵涤坞x藥物(t1/2為2 h)、長(zhǎng)春新堿單藥脂質(zhì)體(t1/2為7 h)相比，共載長(zhǎng)春新堿和拓?fù)涮婵档闹|(zhì)體(t1/2超過(guò)24 h)的體內(nèi)半衰期可得到顯著延長(zhǎng)[30]。體內(nèi)藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了共遞藥脂質(zhì)體顯著延長(zhǎng)了荷瘤小鼠的生存期。

表1 共載藥脂質(zhì)體制劑的臨床研究

2 脂質(zhì)體共遞藥系統(tǒng)用于增強(qiáng)藥物協(xié)同作用

多種抗腫瘤化療藥物聯(lián)合使用可提高藥物抗癌效力。脂質(zhì)體可用于荷載作用于相同靶點(diǎn)的化療藥物，優(yōu)化藥物比例，從而增強(qiáng)療效。DOX是一種蒽環(huán)類(lèi)抗生素，平面芳香環(huán)部分可以插入DNA堿基對(duì)之間，抑制DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，并可以穩(wěn)定DNA-拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP Ⅱ)復(fù)合物，從而抑制TOP Ⅱ，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡[31]。CDDP是一種典型的烷化劑，通過(guò)干擾DNA的復(fù)制而發(fā)揮藥效。CDDP作為一種很強(qiáng)的親電試劑，由于其有兩個(gè)易被水分子取代的氯原子(Cl)，可與DNA上的N-雜環(huán)堿基反應(yīng)，阻止DNA合成或轉(zhuǎn)錄，造成DNA損傷，阻止細(xì)胞分裂，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[32]。因此，利用脂質(zhì)體共同遞送DOX和CDDP可增強(qiáng)藥物對(duì)癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性。Ruttala等[33]報(bào)道了轉(zhuǎn)鐵蛋白配體修飾的脂質(zhì)體(TL-DDAC)，能夠?qū)OX和CDDP釋放到細(xì)胞質(zhì)中,結(jié)果證明，因DOX和CDDP對(duì)DNA的雙重作用，共載DOX與CDDP的脂質(zhì)體在所有制劑中表現(xiàn)出最佳治療效果。人源乳腺癌MCF-7細(xì)胞經(jīng)TL-DDAC處理后，54.10%發(fā)生凋亡，而相同濃度的DOX和CDDP則分別導(dǎo)致40.65%和27.04%的細(xì)胞凋亡。共載脂質(zhì)體比游離藥物在人源乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞顯示出更強(qiáng)的癌細(xì)胞殺傷能力。

脂質(zhì)體荷載不同作用機(jī)制的化療藥物也可增強(qiáng)抗腫瘤作用。PTX是一種以紡錘體微管為作用靶點(diǎn)的小分子化療藥物，在不同濃度時(shí)可發(fā)揮不同作用：PTX在高濃度(0.450 μmol/L)時(shí)，會(huì)促進(jìn)微管蛋白組裝成微管，并抑制微管解聚，阻礙細(xì)胞的正常分裂；在低濃度(0.001 μmo/L)時(shí)，主要抑制紡錘體的運(yùn)動(dòng)和解聚，使分裂的細(xì)胞停滯于G2/M期，抑制細(xì)胞增殖[34]。Liu等[35]將PTX和DOX 2種不同作用機(jī)制的藥物包封于交聯(lián)脂質(zhì)體中(cMLVs),體內(nèi)藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，荷瘤小鼠經(jīng)藥摩爾比為1∶ 1 的cMLVs治療后的生存期比相同比例的游離藥物治療的顯著延長(zhǎng)。DOX還可與蛋白共同包載于脂質(zhì)體中用于增強(qiáng)抗癌效果。Jiang等[36]構(gòu)建一種以脂質(zhì)體為核心，外層交聯(lián)了透明質(zhì)酸聚合物外殼的納米膠脂質(zhì)體(Gelipo)，用于逐級(jí)遞送腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)和DOX(圖1)。該納米膠脂質(zhì)體能夠?qū)RAIL和DOX分別遞送至各自靶部位——細(xì)胞膜和細(xì)胞核。細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示，共載藥納米膠脂質(zhì)體經(jīng)透明質(zhì)酸酶處理后的凋亡率高達(dá)80.63%；細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，共載藥納米膠脂質(zhì)體比單載藥納米膠脂質(zhì)體具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性；荷瘤小鼠經(jīng)共載藥納米膠脂質(zhì)體治療后，腫瘤生長(zhǎng)得到了顯著抑制，腫瘤組織中大量腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡，表明共載藥納米膠脂質(zhì)體具有較強(qiáng)的體內(nèi)抗腫瘤活性。Cheng等[37]制備了共載CDDP和姜黃素的脂質(zhì)體用于肝癌治療，姜黃素可通過(guò)刺激活性氧水平升高和調(diào)控多種信號(hào)通路以增強(qiáng)肝癌對(duì)DDP的敏感性[38]。對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)證實(shí)，當(dāng)DDP和姜黃素的摩爾比為1∶ 8時(shí)，兩者的協(xié)同效應(yīng)最為顯著；以該比例載入脂質(zhì)體后，共載脂質(zhì)體對(duì)HepG2細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)可降低至0.62 μmol/L，而游離藥物聯(lián)用的IC50為1.18 μmol/L。該共載藥脂質(zhì)體在荷鼠源肝癌H22細(xì)胞或HepG2細(xì)胞的2種裸鼠模型中顯示出較好的療效，顯著抑制了腫瘤的生長(zhǎng)，并延長(zhǎng)了小鼠的生存時(shí)間。

圖1 納米膠脂質(zhì)體用于逐級(jí)遞送TRAIL和DOX以增強(qiáng)協(xié)同療效Fig.1 Schematic illustration of sequential co-delivery of TRAIL and DOX by Gelipo for enhanced synergistic effects

3 脂質(zhì)體共遞藥系統(tǒng)用于克服多藥耐藥以增強(qiáng)化療藥物療效

臨床化療失敗的主要原因之一是腫瘤多藥耐藥(MDR)，同時(shí)，MDR也是腫瘤治療中的一大難題。MDR是指腫瘤細(xì)胞對(duì)一種化療藥物產(chǎn)生抗藥性時(shí)，對(duì)與其作用機(jī)制和結(jié)構(gòu)不同的其他化療藥物產(chǎn)生交叉耐藥性。MDR的發(fā)生與多種因素有關(guān)，如白細(xì)胞介素6(IL-6)、肺耐藥蛋白(LRP)和多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)的表達(dá)增加，多藥耐藥基因(MDR-1)及ATP結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ABC transporters)介導(dǎo)的耐藥、脂質(zhì)成分的改變、靶分子(β微管蛋白)的突變等。目前公認(rèn)的一種主要耐藥機(jī)制是MDR-1編碼的P-糖蛋白(P-gp)過(guò)度表達(dá)。將MDR的抑制劑和化療藥物包封入脂質(zhì)體中，在一定程度上可克服腫瘤的多藥耐藥[39-41]，將能夠沉默外排蛋白表達(dá)的小干擾RNA(siRNA)或外排蛋白的抑制劑和小分子藥物合用，可以增加癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，降低耐藥性，達(dá)到協(xié)同效應(yīng)。

Chen等[42]構(gòu)建了葉酸修飾的pH響應(yīng)性伊馬替尼(IM)和DOX共載脂質(zhì)體。該脂質(zhì)體可實(shí)現(xiàn)對(duì)葉酸受體高表達(dá)的腫瘤組織的靶向，并在弱酸性的腫瘤微環(huán)境作用下釋放藥物；IM可結(jié)合ATP結(jié)合盒家族蛋白的ATP結(jié)合部位，導(dǎo)致其外排作用減弱，以此降低耐藥性[43]。該制劑在荷載DOX耐藥型MCF-7 細(xì)胞的裸鼠模型中對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制率可達(dá)90%以上。

圖2 Lipo-DTX/siRNA用于克服腫瘤多藥耐藥以增強(qiáng)化療療效Fig.2 Schematic illustration of Lipo-DTX/siRNA to overcome the MDR for enhanced cancer chemotherapy

P-gp，又稱多藥耐藥蛋白1(MDR1)，ATP結(jié)合盒亞家族B成員1(ABCB1)或分化簇(CD243)，是一種依賴ATP的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，主要將疏水性化合物泵出細(xì)胞。Deng等[44]報(bào)道了在DOX脂質(zhì)體表面層層堆積siRNA的納米共遞藥系統(tǒng)。在人源乳腺癌MDA-MB-468細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中，與共載亂序siRNA/DOX脂質(zhì)體相比，共載P-gp siRNA/DOX脂質(zhì)體處理細(xì)胞后，IC50降低了4.5倍。共載P-gp siRNA/DOX脂質(zhì)體在異位荷MDA-MB-468腫瘤的小鼠模型中展現(xiàn)出更高的抗腫瘤活性，與生理鹽水組相比，腫瘤體積減少了8倍。對(duì)P-gp免疫組化染色結(jié)果顯示，P-gp在腫瘤組織中的表達(dá)降低，表明下調(diào)P-gp的表達(dá)顯著增強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞對(duì)DOX的敏感性，也進(jìn)一步表明：采用干擾外排蛋白功能或沉默外排蛋白表達(dá)等手段與化療聯(lián)用是一種有效克服腫瘤耐藥性、從而增強(qiáng)療效的策略。

抑制腫瘤細(xì)胞中抗凋亡蛋白的表達(dá)也可克服腫瘤的MDR。例如，采用Bcl-2 siRNA可降低抗凋亡基因Bcl-2及蛋白的表達(dá)。Qu等[45]在PEG化陽(yáng)離子脂質(zhì)體中共載多烯紫杉醇(DTX)和Bcl-2 siRNA(Lipo-DTX/siRNA)(圖2)。Lipo-DTX/siRNA處理人源非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞和人源肺鱗癌H226細(xì)胞的IC50分別為0.18和1.32 mg/mL，而單載DTX脂質(zhì)體對(duì)這2種腫瘤細(xì)胞的IC50分別為1.10 和5.94 mg/mL，證明了共載脂質(zhì)體相比于單載脂質(zhì)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性大幅增強(qiáng)。Reddy等[46]構(gòu)建了一種共遞送PTX和Bcl-2 siRNA的pH敏感型脂質(zhì)體。采用該脂質(zhì)體共遞送PTX與Bcl-2 siRNA顯著抑制了裸鼠模型中腫瘤的生長(zhǎng)，經(jīng)治療后，腫瘤體積僅為生理鹽水組的1/9，為單載PTX脂質(zhì)體或單載siRNA脂質(zhì)體治療組荷瘤小鼠腫瘤體積的1/4，說(shuō)明在抗凋亡蛋白Bcl-2下調(diào)情況下，PTX的化療效果會(huì)得到明顯增強(qiáng)。RT-PCR和Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，Bcl-2 siRNA不僅降低了Bcl-2的表達(dá)，而且還增加了促凋亡蛋白Bax的表達(dá)。因此，靶向抗凋亡蛋白與化療藥物合用可通過(guò)多種途徑克服腫瘤的多藥耐藥。

4 脂質(zhì)體共遞藥系統(tǒng)在調(diào)控腫瘤微環(huán)境中的應(yīng)用

隨著對(duì)腫瘤生理特性的不斷深入研究，研究者們逐漸發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)過(guò)程中扮演著重要角色[47-50]。許多研究致力于調(diào)控腫瘤微環(huán)境以增強(qiáng)藥物的療效。Ji等[51]設(shè)計(jì)了環(huán)糊精修飾的脂質(zhì)體共遞藥系統(tǒng)(LRC-GEM-PFD)，兩者之間通過(guò)基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)響應(yīng)性肽段連接，抗纖維化藥物吡非尼酮(PFD)荷載于環(huán)糊精疏水空腔中，抗腫瘤藥物吉西他濱(GEM)荷載于脂質(zhì)體中。當(dāng)納米藥物到達(dá)腫瘤組織后，MMP-2剪切連接肽段，環(huán)糊精與脂質(zhì)體分離。同時(shí)，吡非尼酮逐漸釋放，作用于胰腺星狀細(xì)胞(PSCs)，減少腫瘤組織纖維化，消除腫瘤物理屏障；修飾“Arg-Gly-Asp”(RGD肽)的GEM載藥脂質(zhì)體被腫瘤細(xì)胞吞噬，發(fā)揮抗腫瘤作用。在荷載PSCs/人源胰腺癌PANC-1細(xì)胞的裸鼠皮下瘤模型種，LRC-GEM-PFD(GEM 20 mg/kg，PFD 10 mg/kg)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制率可達(dá)75%以上。Lv等[52]制備了PTX前藥(HA-PTX)與載馬馬司他(MATT)的溫敏性脂質(zhì)體自組裝形成的納米遞藥系統(tǒng)(HA-PTX/MATT-LTSK HNPs)(圖3)，MATT與基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)底物的結(jié)構(gòu)類(lèi)似，可競(jìng)爭(zhēng)性地抑制MMPs活性，從而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。但是MATT自身并不能殺死腫瘤細(xì)胞，因此通過(guò)聯(lián)用MATT與PTX，同時(shí)靶向腫瘤微環(huán)境與腫瘤細(xì)胞，發(fā)揮協(xié)同作用。在荷人源乳腺癌4T1細(xì)胞的轉(zhuǎn)移裸鼠模型中，該給藥系統(tǒng)降低了腫瘤組織中MMPs的活性，減少了新生血管的生成，并完全消除了腫瘤的肺轉(zhuǎn)移。

圖3 HA-PTX/MATT-LTSK HNPs通過(guò)抑制腫瘤組織中MMP活性增強(qiáng)化療療效Fig.3 Schematic illustration ofHA-PTX/MATT-LTSK HNPs to inhibit the activity of MMPs in the tumor stroma for enhanced cancer chemotherapy

5 脂質(zhì)體共遞藥系統(tǒng)在免疫療法中的應(yīng)用

近年來(lái)，腫瘤免疫療法引起了極大的關(guān)注。當(dāng)腫瘤發(fā)生后，其細(xì)胞膜表面的抗原容易被免疫細(xì)胞識(shí)別，從而引起免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤組織的攻擊。但腫瘤組織可以通過(guò)多種方式逃脫免疫監(jiān)控，例如，腫瘤細(xì)胞過(guò)量表達(dá)程序性死亡配體-1(PD-L1)和PD-L2，與T細(xì)胞表面的程序性死亡受體-1(PD-1)結(jié)合后，將關(guān)閉T細(xì)胞免疫應(yīng)答，逃避免疫系統(tǒng)的殺滅[53]。免疫檢查點(diǎn)阻滯劑療法是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)，在腫瘤臨床治療中表現(xiàn)出強(qiáng)大的抗癌能力，被認(rèn)為是癌癥的“終結(jié)者”[54-56]。其中，PD-1抗體(atezolimumab)和PD-L1抗體(pembrolizumab和nivolumab)已被用于包括慢性淋巴細(xì)胞白血病、晚期黑色素瘤及非小細(xì)胞肺癌等多種腫瘤的治療[57]。脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)可用于抗原呈遞，在腫瘤的免疫治療中發(fā)揮著重要作用。

Liang等[58]提出了多功能納米抗體的概念，由脂質(zhì)體包裹的金納米籠(Lipos-AuNCs)組成(圖4)，旨在激活和催熟樹(shù)突狀細(xì)胞(DCs)等抗原呈遞細(xì)胞(APCs)。修飾DCs特異性抗體aCD11c以增強(qiáng)納米粒對(duì)DCs的靶向能力，還同時(shí)包載了免疫佐劑單磷酰脂質(zhì)A(MPLA)和黑素瘤抗原肽TRP2(Lipos-AuNC-MPLA-aCD11c-TRP2)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)Lipos-AuNCs脂質(zhì)體金納米籠治療的小鼠腫瘤生長(zhǎng)受到抑制，并在另一個(gè)腫瘤轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型中減少了黑色素瘤的肺轉(zhuǎn)移。該納米粒發(fā)揮藥效的機(jī)制在于增加了腫瘤組織中CD8+T淋巴細(xì)胞的比例，增強(qiáng)了細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞免疫應(yīng)答，殺傷腫瘤細(xì)胞。因此，脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)為腫瘤免疫治療提供了有效的解決方案。

圖4 用于增強(qiáng)免疫療法的脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)Fig.4 Enhancement of immunetherapy by liposomal co-delivery systems

6 總結(jié)與展望

經(jīng)過(guò)50余年的研究，脂質(zhì)體從最初的經(jīng)典構(gòu)成開(kāi)始，先后發(fā)展出靶向脂質(zhì)體、長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體和siRNA脂質(zhì)體等，并由研究者進(jìn)行有機(jī)的組合獲得了更適應(yīng)臨床應(yīng)用潛力的共載脂質(zhì)體。盡管脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)顯示出強(qiáng)大的優(yōu)越性，既可增強(qiáng)毒性、克服多藥耐藥，也可應(yīng)用于腫瘤免疫治療中，但是不能對(duì)脂質(zhì)體共遞送系統(tǒng)的某些問(wèn)題有所忽視：①如何在處方篩選時(shí)確定所載藥物的比例，并且保證藥物比例在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中也不會(huì)發(fā)生改變；②如何保證所載藥物的作用效果一定是協(xié)同作用而不是拮抗作用，或者是簡(jiǎn)單的疊加作用；③如何提高脂質(zhì)體負(fù)載基因或蛋白等生物藥物的效率。