劉 豪，席曉華，彭新鋒，彭郎峰，朱彩萍，吳正良，周勇劍

(湖南省雙峰縣畜牧水產(chǎn)局， 湖南 雙峰 410000)

口蹄疫(Food-and-mouth disease, FMD)、豬瘟(Classical Swine Fever,CSF)、豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproduc -tive and respiratory syndrome virus，PRRSV)均被我國(guó)農(nóng)業(yè)部劃入Ⅰ類動(dòng)物疫病范圍?？谔阋吣芙档统赡晷笊a(chǎn)性能，并且以傳播迅速、發(fā)病率高為特點(diǎn)，可引起幼畜死亡[1]。豬瘟是由豬瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起，以高度致死性、接觸性為特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅著全球養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染?。煌瑫r(shí)豬瘟也是我國(guó)計(jì)劃消滅的動(dòng)物傳染病[2]。豬繁殖與呼吸綜合征是目前威脅全球養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展最嚴(yán)重的疾病之一，我國(guó)于2006年爆發(fā)了全國(guó)性的高致病性藍(lán)耳病(HP-PRRSV)，范圍波及十幾個(gè)省市，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成了極大的損失。2008年我國(guó)將高致病性豬藍(lán)耳病劃入Ⅰ類動(dòng)物疫病[3]，目前對(duì)仔豬進(jìn)行免疫接種是控制該病最有效的方法之一。我國(guó)在防控重大動(dòng)物疫病方面的主要手段之一是強(qiáng)制免疫，疫病防控的最終效果在于免疫過程的好壞。鑒別免疫好壞的最常見方法就是對(duì)免疫動(dòng)物的抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)，通過抗體水平的變化直觀地反映免疫的效果，從而進(jìn)行科學(xué)有效的防控和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。我們運(yùn)用ELISA試劑盒檢測(cè)血清樣品抗體水平，對(duì)2014-2017年從湖南省雙峰縣不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)商品豬定期采集的1440份豬血清進(jìn)行檢測(cè)，通過檢測(cè)數(shù)據(jù)得到不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬群的口蹄疫、豬瘟和高致病性藍(lán)耳病實(shí)時(shí)免疫情況，以此為據(jù)指導(dǎo)該地區(qū)的免疫防控計(jì)劃。

1 材料與方法

1.1 主要材料

1.1.1 血清樣品

按比例隨機(jī)采集雙峰縣17個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)種豬場(chǎng)、規(guī)模豬場(chǎng)、散養(yǎng)戶等飼養(yǎng)豬群中，2014年8月至2017年7月疫苗注射后30- 60天的臨床健康商品豬的血清樣品1440份(表1)。按常規(guī)方法分離血清并立即進(jìn)行ELISA抗體檢測(cè)，或于-20℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 O型口蹄疫病毒液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒

購(gòu)于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，批號(hào)：20170602101-2等，在有效期內(nèi)使用。

1.1.3 豬瘟病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

韓國(guó)安捷動(dòng)物診斷試劑有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：4413PO018等，在有效期內(nèi)使用。

1.1.4 高致病性豬呼吸與繁殖綜合征病毒抗體檢測(cè)試劑盒

韓國(guó)安捷動(dòng)物診斷試劑有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：4404PO040等，在有效期內(nèi)使用。

1.2 主要儀器

純水儀、離心機(jī)、移液器、酶標(biāo)儀等。

1.3 主要方法

ELISA操作步驟及結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 按相關(guān)ELISA試劑盒產(chǎn)品說明書進(jìn)行操作及結(jié)果判定。

2 結(jié)果與分析

2.1 雙峰縣近四年(2014.7- 2017.6)三種病毒血清抗體按年度統(tǒng)計(jì)結(jié)果

見表1。

表1 雙峰縣2014-2017年三種病毒血清抗體檢測(cè)結(jié)果(按年度)

注：A陽(yáng)性比例%(陽(yáng)性數(shù)量/被檢樣品總數(shù))B2017年國(guó)家取消豬繁殖與呼吸綜合征病毒活疫苗強(qiáng)制免疫，同時(shí)取消抗體檢測(cè)。

從表1可以看出，O型口蹄疫病毒血清抗體總陽(yáng)性率是64.24%，低于國(guó)家規(guī)定70%保護(hù)率的標(biāo)準(zhǔn)[4]；其中2014年(90.59%)和2015年(85.92%)抗體水平較高，而2016年(50.89%)和2017年(51.00%)抗體水平比較低。豬瘟病毒血清抗體水平總陽(yáng)性率是90.21%，陽(yáng)性率最高的是2016年(98.37%)，陽(yáng)性率最低的是2017年(79.00%)。豬繁殖與呼吸綜合征病毒血清抗體總陽(yáng)性率是84.39%，其中陽(yáng)性率最高的是2016年(87.80%)，陽(yáng)性率最低的是2014年(66.47%)。

2.2 雙峰縣近四年(2014.7- 2017.6)三種病毒血清抗體按鄉(xiāng)鎮(zhèn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

見表2。

從表2可以看出， 豬口蹄疫血清抗體總陽(yáng)性率是62.24%(925/1440)，其中陽(yáng)性率最高的是花門鄉(xiāng)(83.91%)，最低的是沙塘鄉(xiāng)(40.70%)。豬瘟病毒血清抗體總陽(yáng)性率是90.20%(1299/1440)，其中陽(yáng)性率最高的是青樹坪鎮(zhèn)(100.00%)，最低的是永豐鎮(zhèn)(68.18%)。豬繁殖與呼吸綜合征病毒血清抗體總陽(yáng)性率是84.40%(962/1440)，其中陽(yáng)性率最高的是青樹坪鎮(zhèn)(95.59%)，最低的是石牛鄉(xiāng)(63.64 %)。

表2 雙峰縣2014-2017年三種病毒血清抗體檢測(cè)結(jié)果(按鄉(xiāng)鎮(zhèn))

注：A 陽(yáng)性比例%(陽(yáng)性數(shù)量/被檢樣品總數(shù))

3 討論

通過對(duì)雙峰縣17個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)采集的1440份商品豬血清進(jìn)行O型豬口蹄疫病毒血清抗體ELISA檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)豬群平均陽(yáng)性率為62.85%(905/1440)，低于國(guó)家規(guī)定的免疫合格率(70.0%)。而豬瘟疫苗和藍(lán)耳病疫苗平均抗體水平均達(dá)到了國(guó)家要求的標(biāo)準(zhǔn)。商品豬口蹄疫抗體水平較低的原因，推測(cè)可能與口蹄疫疫苗免疫程序有很大關(guān)系，一般來說豬口蹄疫疫苗要求在所有商品仔豬全群進(jìn)行免疫，對(duì)體重較大的肥豬進(jìn)行免疫時(shí)，往往保定、注射等工作實(shí)施比較困難?？贵w水平檢測(cè)結(jié)果也與送樣數(shù)量、送樣比例有密切關(guān)系。這次檢測(cè)中了解到母豬均進(jìn)行了口蹄疫疫苗、豬瘟疫苗和藍(lán)耳病病毒疫苗免疫注射，其母源抗體會(huì)在一定程度上干擾仔豬的疫苗免疫效果，導(dǎo)致抗體檢測(cè)合格率較低。有報(bào)道稱，豬疫苗免疫效果評(píng)價(jià)除了抗體水平外，還需要考慮仔豬的臨床健康狀況等因素綜合考慮。村防疫員在實(shí)際工作中不僅要接種豬口蹄疫疫苗，同時(shí)豬瘟疫苗和豬藍(lán)耳病病毒疫苗的接種，也是其工作內(nèi)容，防疫員工作量很大而報(bào)酬低，這使他們?cè)诠ぷ髦须y免產(chǎn)生一些失誤。作為縣級(jí)動(dòng)物疫病防控中心，急需找到合適的指導(dǎo)與實(shí)施辦法，使全縣強(qiáng)免達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

4 對(duì)策和建議

4.1 加強(qiáng)免疫

在免疫合格的豬場(chǎng)，對(duì)母源抗體滴度較高的斷奶仔豬，可延遲口蹄疫首免時(shí)間，用2- 3倍量首次免疫，28 d后再加強(qiáng)免疫1次。1個(gè)月后進(jìn)行抗體檢測(cè)，若保護(hù)率達(dá)不到70%，再補(bǔ)免一次，直至保護(hù)率達(dá)到國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)為止。

4.2 加強(qiáng)日常管理，減少應(yīng)激因素

做好清潔、消毒工作，糞便清理及時(shí)，避免有害物質(zhì)污染環(huán)境，采取高效消毒藥物進(jìn)行消毒?？刹捎?%石碳酸或2%氫氧化鈉溶液進(jìn)行定期消毒。搞好科學(xué)飼養(yǎng)，為各個(gè)生產(chǎn)階段的豬群提供優(yōu)質(zhì)、充足的營(yíng)養(yǎng)飼料，同時(shí)加強(qiáng)豬群保健。另一方面，切斷傳播途徑，有效隔離豬場(chǎng)與其他家畜養(yǎng)殖場(chǎng)，防止相互傳染。