薛汝群 楊 望 張 敏 趙仲華 劉學(xué)光△

(1復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系 上海 200032; 2復(fù)旦大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院 上海 200032)

腎小球壁層上皮細(xì)胞(parietal epithelial cells,PECs)是內(nèi)襯于鮑曼氏囊的一層扁平上皮,與足細(xì)胞一樣均來源于后腎間充質(zhì)干細(xì)胞[1],且兩者解剖位置毗鄰。足細(xì)胞位于腎小球基底膜(glomerular basement membrane,GBM)外側(cè),構(gòu)成腎小球?yàn)V過膜的最外層,可阻止白蛋白進(jìn)入原尿。足細(xì)胞受損從GBM脫落后,PECs被活化,活化的PECs(activated PECs,aPECs)胞體增大,發(fā)生增生、遷移、分泌細(xì)胞外基質(zhì)等生物學(xué)行為。多數(shù)aPECs黏附于裸露的GBM外側(cè)以代償丟失的足細(xì)胞,少數(shù)aPECs增生形成假新月體[2],進(jìn)而導(dǎo)致腎小球發(fā)生粘連、節(jié)段性硬化甚至球性硬化,這是導(dǎo)致蛋白尿及腎小球硬化發(fā)生發(fā)展的中心事件[2-5]。足細(xì)胞屬高度分化的終末細(xì)胞,自身無法增殖。因此,尋找能夠分化為足細(xì)胞從而補(bǔ)充丟失足細(xì)胞、促進(jìn)疾病修復(fù)的前體細(xì)胞(progenitor cells)或干細(xì)胞,已成為腎臟研究領(lǐng)域的重點(diǎn)內(nèi)容[5-7]。近年有研究顯示,在以足細(xì)胞損傷為特征的腎病動物模型和人腎小球疾病患者中,PECs可共表達(dá)足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白,因此PECs已成為備受關(guān)注的具備足細(xì)胞分化潛能的前體細(xì)胞[4-7]。

腎上腺髓質(zhì)肽(adrenomedullin,AM)是一種小分子血管活性肽,與受體結(jié)合后激活腺苷酸環(huán)化酶-蛋白激酶A信號通路,發(fā)揮多種生物學(xué)功能[8]。AM在腎臟中廣泛表達(dá)于腎小球系膜細(xì)胞、足細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞以及血管壁等。我們前期的研究發(fā)現(xiàn),AM可保護(hù)受損的足細(xì)胞并促進(jìn)足細(xì)胞損傷動物模型的修復(fù)[9]。AM是否通過調(diào)控PECs分化促進(jìn)其腎臟保護(hù)作用,目前尚未見報(bào)道。

Notch信號通路在調(diào)控PECs向足細(xì)胞的分化中發(fā)揮重要作用。Notch信號通路分布廣泛、高度保守,通過相鄰細(xì)胞之間的相互作用調(diào)控前體細(xì)胞或干細(xì)胞的分化。哺乳動物細(xì)胞有4個(gè)跨膜受體(Notch1/2/3/4)和5個(gè)跨膜配體(Dll-1/3/4和Jagged-1/2)。配體與受體結(jié)合后激活該信號通路,Notch胞內(nèi)功能域(NICC)被γ分泌酶水解并向核內(nèi)轉(zhuǎn)位,從而促進(jìn)下游靶基因(如Hes、Hey等)的轉(zhuǎn)錄[10]。體外研究顯示,持續(xù)下調(diào)Notch可抑制hPECs增生并獲得足細(xì)胞表型[11-12]。體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn),在阿霉素所致局灶節(jié)段性腎小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)小鼠模型、狼瘡性腎炎及FSGS患者中,PECs高表達(dá)Notch3/Hes1且伴有明顯增生[12]。

嘌呤霉素氨基核苷(puromycinaminonucleoside,PAN)是一種來源于鏈霉菌屬細(xì)菌的氨基核苷類抗生素,可導(dǎo)致溶酶體質(zhì)翻譯過程中發(fā)生過早的肽鏈終止而造成細(xì)胞損傷,是通過造成足細(xì)胞損傷而建立腎病綜合征動物模型的常用藥物之一[13]。本研究擬建立大鼠PAN腎病模型并應(yīng)用AM進(jìn)行治療,分別在不同時(shí)間點(diǎn)觀察AM對PECs分化的調(diào)控作用以及Notch信號通路的改變,探討AM在足細(xì)胞損傷性腎臟疾病中對PECs分化的調(diào)控作用及其分子機(jī)制。

材 料 和 方 法

大鼠PAN足細(xì)胞損傷模型的建立雄性SD大鼠(上海SLAC實(shí)驗(yàn)動物公司),體重130～150 g,隨機(jī)分為3組:對照組、模型組和治療組(每組n=5)。模型組和治療組大鼠均一次性腹腔注射PAN(美國Sigma公司) 15 mg/100 g體重,對照組經(jīng)腹腔注射等體積無菌生理鹽水;治療組大鼠每天經(jīng)尾靜脈注射AM 蛋白質(zhì)(蘇州強(qiáng)耀生物科技有限公司)6.6μg/100 g體重,對照組及模型組每天經(jīng)尾靜脈注射等體積無菌生理鹽水。動物處死前收集24 h尿液。分別于首次注射PAN后第7 、14 及21 天處死動物,獲取腎臟組織待用。

所有動物置于恒溫[(21±2)℃]、恒濕(40%～60%)、12 h光照的環(huán)境中飼養(yǎng),正常進(jìn)食、飲水。動物實(shí)驗(yàn)方法依照《上海市醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物管理委員會標(biāo)準(zhǔn)》和《復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物使用及護(hù)理指南》要求進(jìn)行。

尿蛋白SDS-PAGE將24 h尿液離心,取上清,以8%分離膠進(jìn)行SDS-PAGE,考馬斯亮藍(lán)(R250)染色,行光密度分析。

腎組織PAS染色及形態(tài)學(xué)分析對腎臟組織石蠟切片行常規(guī)PAS染色。光鏡下觀察腎組織形態(tài)學(xué)改變,對腎小球損傷程度行半定量分析。腎小球損傷常表現(xiàn)為足細(xì)胞腫大伴胞質(zhì)內(nèi)蛋白質(zhì)吸收滴、節(jié)段性粘連、系膜基質(zhì)節(jié)段性增多(節(jié)段性硬化)及局限性PECs增生。在中倍鏡視野下隨機(jī)選取100個(gè)腎小球,計(jì)算受損腎小球并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

免疫組化染色腎臟石蠟切片常規(guī)二甲苯脫蠟、梯度酒精入水,3% H2O2溶液去除內(nèi)源性過氧化物酶,檸檬酸緩沖液微波抗原修復(fù)(900 W、2.5 min,150 W、15 min),正常血清封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn),羊抗synaptopodin (sc-21537)、兔抗p57(sc-8298) 4 ℃孵育過夜,HRP-IgG孵育45 min,DAB顯色,蘇木精襯染細(xì)胞核,中性樹膠封片。p57陽性染色定位于足細(xì)胞的細(xì)胞核,應(yīng)用Image-Pro Plus軟件定量分析p57陽性細(xì)胞計(jì)數(shù),每只實(shí)驗(yàn)動物平均采集30個(gè)腎小球。

雙重及三重免疫熒光染色選取claudin-1為PECs特異性標(biāo)記蛋白,WT1及synaptopodin為足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白。應(yīng)用OpalTM4-Color Fluorescent IHC試劑盒(美國Perkin Elmer公司)對腎臟石蠟切片分別行雙重或三重免疫熒光染色,包括AM/claudin-1、Ki67/claudin-1、Ki67/WT-1、claudin-1/WT1、claudin-1/synaptopodin、Notch3/claudin-1及Notch3/claudin-1/synaptopodin。該試劑盒采用酪胺信號放大技術(shù)(TSATMTyramide Signal Amplification),在H2O2存在時(shí),酪胺被二抗固定的HRP迅速激活,隨后與含有大量酪氨酸結(jié)合位點(diǎn)的相接蛋白(如HRP、抗體、目標(biāo)抗原)共價(jià)結(jié)合,信號被有效放大。石蠟切片常規(guī)脫蠟,3%H2O2去除內(nèi)源性過氧化物酶,封閉液封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn),第一重一抗4 ℃孵育過夜,HRP-二抗孵育10 min,TSA染色孵育10 min;微波處理去除第一重一抗及二抗,封閉,加第二重一抗,方法同上。DAPI襯染細(xì)胞核,甘油封片。應(yīng)用Vectra 光譜成像系統(tǒng)對切片進(jìn)行圖片掃描,Inform軟件分析腎小球中PECs及足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白雙重染色陽性細(xì)胞的定量統(tǒng)計(jì)。所用一抗包括:兔抗AM(sc-33187)、鼠抗WT-1(sc-7385)、羊抗synaptopodin(sc-21537)(美國Santa Cruz公司),兔抗claudin-1(51-9000)(美國Thermo Fisher公司),兔抗Notch3(ab23426)、兔抗Ki67(ab16667)(英國Abcam公司)。

結(jié) 果

AM顯著降低PAN腎病大鼠的尿蛋白水平與對照組相比,模型組尿蛋白于7、14和21天均顯著升高,其中14天達(dá)峰值。與模型組相比,治療組尿蛋白水平顯著降低。尿蛋白成分均以白蛋白為主(圖1)。

AM顯著改善PAN腎病大鼠的腎組織形態(tài)模型組于7和14 天均可見腎小球足細(xì)胞腫脹伴胞質(zhì)內(nèi)蛋白質(zhì)吸收顆粒形成,部分腎小球可見毛細(xì)血管袢與球囊壁節(jié)段性粘連、系膜基質(zhì)節(jié)段性增多,于21天可見節(jié)段性硬化及PECs局限性增生。與模型組相比,治療組的腎小球損傷明顯減輕,形態(tài)學(xué)半定量分析顯示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖2)。

AM顯著增加大鼠PAN腎病的足細(xì)胞計(jì)數(shù)選取足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白p57進(jìn)行足細(xì)胞計(jì)數(shù)。與對照組相比,模型組P57計(jì)數(shù)于7、14和21天均顯著減少,減少比例分別為41.50%、43.29%和25.59%,并于14天達(dá)最低值,21天有所恢復(fù)。與模型組相比,治療組p57計(jì)數(shù)顯著增高(圖3)。

圖1AM顯著降低大鼠PAN腎病的尿蛋白水平
Fig1AMsignificantlyamelioratedalbuminuriainPANnephrosisrats

圖2AM顯著改善大鼠PAN腎病的腎組織形態(tài)學(xué)
Fig2AMmitigatedglomerularmorphologicchangesinPANnephrosisrats

大鼠PAN腎病PECs中AM表達(dá)上調(diào)選取claudin-1作為PECs特異性標(biāo)志蛋白。在對照組中,AM呈弱陽性定位于腎小球毛細(xì)血管袢內(nèi),未見AM/claudin-1雙重染色陽性細(xì)胞。模型組于7、14和21天時(shí)見雙重染色陽性細(xì)胞主要沿鮑曼氏囊分布,14和21天可見部分雙重染色陽性細(xì)胞出現(xiàn)于毛細(xì)血管袢內(nèi)。與模型組相比,14和21天時(shí)治療組雙重染色陽性的細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著增加(圖4)。

圖3AM顯著增加大鼠PAN腎病的足細(xì)胞計(jì)數(shù)
Fig3AMincreasedpodocytenumberinPANnephrosisrats

AM促進(jìn)PECs分化對照組未見claudin-1/WT-1或claudin-1/synaptopodin雙重染色陽性細(xì)胞。模型組于7 天見少數(shù)雙重染色陽性細(xì)胞沿鮑曼氏囊分布,偶見分布于毛細(xì)血管袢邊緣;14和21天雙重染色陽性細(xì)胞數(shù)逐漸增多且部分位于毛細(xì)血管袢內(nèi)。與模型組相比,治療組14天的claudin-1/WT-1或claudin-1/synaptoppodin雙重染色陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著增多(圖5)。

圖4大鼠PAN腎病的腎小球中AM表達(dá)上調(diào)
Fig4UpregulationofAMinglomeruliofPANnephrosisrats

A subset of PECs coexpress the PECs specific marker claudin-1 and the podocyte markers WT-1 (A,×400) or synaptopodin (B,×400) in PAN nephrosis rats.On day 14,AM markedly increases both claudin-1+/WT-1+and claudin-1+/synaptopodin+cells,which are located not only along Bowman’s capsule but also in the glomerular tuft (C and D).(1)P<0.01.

圖5AM促進(jìn)大鼠PAN腎病中PECs向足細(xì)胞分化
Fig5AMpromotesthedifferentiationofPECsintopodocytesinPANnephrosisrats

PECs表達(dá)細(xì)胞增殖抗原Ki67對照組腎小球未見Ki67陽性表達(dá)。經(jīng)PAN處理,腎小球內(nèi)均見Ki67陽性表達(dá),Ki67與WT-1無共定位表達(dá)(圖6A),但與claudin-1共定位表達(dá)(圖6B)。Ki67/claudin-1雙重染色陽性細(xì)胞僅沿鮑曼氏囊分布(圖6 B);與模型組相比,治療組雙重染色陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)無明顯差異。

A:PECs proliferation was measured by double immunofluorescence staining for Ki67 (green) and claudin-1 (red),while Ki67+/WT-1+cells were not found in glomeruli (×400).B:Ki67+/claudin-1+cells were exclusively found along Bowman’s capsule (×400).

圖6大鼠PAN腎病中PECs表達(dá)細(xì)胞增殖核抗原Ki67
Fig6PECsexpressedproliferationnuclearantigenKi-67inPANnephrosisrats

AM抑制腎小球Notch3表達(dá)對照組腎小球Notch3染色陰性。經(jīng)PAN處理后,腎小球Notch3表達(dá)顯著升高,分別沿鮑曼氏囊及在毛細(xì)血管袢內(nèi)分布,14 天仍維持較高水平的表達(dá),21 天表達(dá)有所下調(diào)(圖7A)。claudin-1/synaptopodin/Notch3三重免疫熒光染色顯示,Notch3分別與claudin-1、synaptopodin共定位表達(dá)于PECs、足細(xì)胞(圖7B)。Notch3/claudin-1雙重染色陽性細(xì)胞主要沿鮑曼氏囊分布,14和21 天部分出現(xiàn)于毛細(xì)血管袢內(nèi)。與模型組相比,治療組中PECs及足細(xì)胞的Notch3表達(dá)均顯著下調(diào),Notch3/claudin-1雙重染色陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著減少。

討 論

當(dāng)足細(xì)胞遭受較大或持續(xù)損傷時(shí)從GBM脫落、丟失。足細(xì)胞數(shù)量的減少與恢復(fù)程度直接關(guān)系到腎小球結(jié)構(gòu)變化。Shankland等[5]認(rèn)為,足細(xì)胞丟失超過20%可導(dǎo)致腎小球毛細(xì)血管袢發(fā)生節(jié)段性粘連乃至FSGS;若其數(shù)量恢復(fù)至20%或以上,則可阻止或逆轉(zhuǎn)硬化的發(fā)生。我們通過一次性腹腔注射PAN建立大鼠足細(xì)胞損傷模型,經(jīng)p57免疫組化染色發(fā)現(xiàn),模型組的足細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著下降,其中足細(xì)胞丟失超過40%,光鏡檢查見腎小球毛細(xì)血管袢節(jié)段性粘連、節(jié)段性基質(zhì)增多、尿蛋白水平顯著升高且以高選擇性白蛋白尿?yàn)橹?因此該大鼠PAN足細(xì)胞損傷模型與人FSGS病變相似[14]。

AM已被證實(shí)具有腎臟保護(hù)作用[8],包括多種腎損傷模型(如大鼠Thy1.1系膜增生性腎炎模型[15]、大鼠缺血/再灌注損傷模型[16]及單側(cè)輸尿管結(jié)扎模型[17]等)和多種人類腎臟疾病(如IgA腎病[18]、糖尿病腎病[19]等)。我們在前期研究中發(fā)現(xiàn),PAN能顯著升高足細(xì)胞的AM表達(dá)[9]。本研究中,大鼠經(jīng)PAN處理后,不僅腎小球毛細(xì)血管袢內(nèi)的AM表達(dá)顯著升高,而且AM/claudin-1雙重免疫染色顯示PECs的AM表達(dá)亦顯著升高。結(jié)果提示,在PAN足細(xì)胞損傷模型中,足細(xì)胞及PECs中AM表達(dá)上調(diào)反映了機(jī)體的一種代償性保護(hù)機(jī)制。經(jīng)AM治療后,大鼠的尿蛋白及腎組織形態(tài)均有顯著改善,證實(shí)AM可對大鼠PAN足細(xì)胞損傷模型發(fā)揮一定的保護(hù)作用,與前期研究結(jié)果一致[9]。

Double immunofluorescence for Notch3 (green) and claudin-1 (red) (A) or triple immunofluorescence for Notch3 (pink),claudin-1 (red) and synaptopodin (green) (B) show the upregulation of Notch3 in both PECs and podocytes,which is inhibited by AM administration in PAN nephrosis rats.

圖7AM抑制大鼠PAN腎病中腎小球Notch3表達(dá)
Fig7AMinhibitstheupregulationofNotch3inglomeruliofPANnephrosisrats

近年來,通過行PECs特異性標(biāo)記蛋白和足細(xì)胞特異性標(biāo)記蛋白的雙重免疫染色、或者應(yīng)用經(jīng)基因特異性標(biāo)記PECs或者足細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞譜系跟蹤觀察,發(fā)現(xiàn)PECs可共表達(dá)足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白(包括P57、WT-1、synaptopodin、podocalyxin、nephrin等)[1,4-7]。Ronconi等[20]及Appel 等[4]分別在正常人腎臟及幼年小鼠腎臟中發(fā)現(xiàn)內(nèi)襯于鮑曼氏囊的PECs表達(dá)干細(xì)胞標(biāo)志物CD133/CD24;將位于腎小球尿極端的PECs亞群分離并注射入阿霉素性小鼠FSGS模型體內(nèi),能夠顯著減輕尿蛋白水平并改善腎組織損傷。Ohse等[21]在TGF-β1轉(zhuǎn)基因小鼠模型、阿霉素所致FSGS小鼠模型、抗GBM病(1型CreGN)小鼠模型中發(fā)現(xiàn),分布于腎小球毛細(xì)血管袢內(nèi)的呈雙重染色陽性的細(xì)胞數(shù)量顯著增多。Eng等[22]應(yīng)用永久標(biāo)記PECs的成年P(guān)EC-rtTA/LC1/R26報(bào)告基因小鼠構(gòu)建的FSGS模型發(fā)現(xiàn),隨著病程進(jìn)展,位于毛細(xì)血管袢內(nèi)的PECs數(shù)量呈進(jìn)行性增多,在疾病早期(7和14天)表達(dá)活化標(biāo)志物CD44,在疾病恢復(fù)期(28天)則共表達(dá)足細(xì)胞標(biāo)志蛋白,且伴隨足細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著增加、尿蛋白和腎組織形態(tài)的明顯改善。當(dāng)分別應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI)[23]或維甲酸[24]治療CreGN動物模型、應(yīng)用ACEI[25]或激素[26]治療FSGS小鼠模型及改善DN動物模型的糖代謝[27-28]時(shí),腎小球內(nèi)共表達(dá)PECs/足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白的細(xì)胞數(shù)量顯著增多,同時(shí)伴有蛋白尿、腎功能及腎組織形態(tài)的顯著改善,而足細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞增殖標(biāo)志物(如Ki67、BrdU摻入法)。α/β-干擾素抑制體外培養(yǎng)hPECs向足細(xì)胞的分化,且加重阿霉素所致FSGS小鼠的腎小球炎癥和蛋白尿水平[29]。

本研究在正常大鼠中未發(fā)現(xiàn)共表達(dá)PECs及足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白的細(xì)胞(WT-1/claudin-1以及synaptopodin/claudin-1雙重免疫染色)。大鼠經(jīng)PAN處理后,損傷早期(7天)開始出現(xiàn)少量雙重染色陽性細(xì)胞且主要沿鮑曼氏囊分布;隨著病程進(jìn)展,上述雙重染色陽性細(xì)胞顯著增加且出現(xiàn)于毛細(xì)血管袢內(nèi),伴修復(fù)期(21天)動物蛋白尿部分緩解伴足細(xì)胞計(jì)數(shù)改善。AM治療在14天可進(jìn)一步增加腎小球內(nèi)雙重染色陽性細(xì)胞,且顯著改善足細(xì)胞計(jì)數(shù)、尿蛋白水平和腎組織形態(tài)。細(xì)胞增殖標(biāo)志物Ki67僅表達(dá)于PECs而非足細(xì)胞,提示足細(xì)胞數(shù)量的恢復(fù)可能部分由增生的PECs分化而來。因此,當(dāng)足細(xì)胞大量丟失時(shí),AM可能促進(jìn)PECs向足細(xì)胞分化,以補(bǔ)充受損足細(xì)胞,從而促進(jìn)疾病的修復(fù)。

Notch信號通路不僅參與腎臟的發(fā)生,而且參與調(diào)控成體腎臟中PECs向足細(xì)胞的分化。在腎臟發(fā)生過程中,S形小體的PECs表達(dá)Notch1/2及其下游轉(zhuǎn)錄因子Hes1/Hey1,但在其終末分化過程中表達(dá)下調(diào);當(dāng)處于分化過程中或分化成熟的足細(xì)胞中Notch信號通路被激活時(shí),腎小球病變分別表現(xiàn)為彌漫性系膜硬化或FSGS[10]。體外研究顯示,持續(xù)活化Notch信號通路可促使PECs增生、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,抑制Notch信號通路則促使PECs獲得足細(xì)胞表型;當(dāng)足細(xì)胞的Notch發(fā)生活化時(shí),則導(dǎo)致其發(fā)生有絲分裂災(zāi)難(mitotic catastrophe)而死亡[11-12]。在阿霉素所致小鼠FSGS模型中,PECs和足細(xì)胞的Notch3表達(dá)均顯著上調(diào);若應(yīng)用γ分泌酶抑制劑DAPT抑制Notch通路,在損傷期雖可改善蛋白尿、減少足細(xì)胞丟失,但在恢復(fù)期則因降低PECs增生而加重蛋白尿及腎小球硬化[14]。在本研究中,正常大鼠腎小球不表達(dá)Notch3,PAN造成足細(xì)胞損傷后,Notch3/claudin-1/synaptopodin三重免疫熒光染色顯示PECs和足細(xì)胞中Notch3表達(dá)均顯著上調(diào),提示PAN造成足細(xì)胞損傷及PECs活性改變。經(jīng)AM治療后,足細(xì)胞及PECs中Notch3表達(dá)均顯著下調(diào),遷移至腎小球毛細(xì)血管袢內(nèi)表達(dá)Notch3的PECs顯著減少,但出現(xiàn)在毛細(xì)血管袢內(nèi)的高表達(dá)AM的PECs顯著增多,且共表達(dá)足細(xì)胞標(biāo)志蛋白的PECs亦顯著增多。結(jié)果提示,AM可能通過下調(diào)Notch3信號通路,分別發(fā)揮促進(jìn)PECs分化以及對足細(xì)胞的直接保護(hù)作用。

Notch信號通路由數(shù)個(gè)不同的受體和配體組成,它們在不同細(xì)胞、組織中表達(dá)不同,且處在同一微環(huán)境中的足細(xì)胞、PECs之間存在信號分子的相互串話(cross-talk)[30]。對上述領(lǐng)域的研究有助于深入探索AM對Notch信號通路的調(diào)控作用,以期為其促進(jìn)以足細(xì)胞損傷為主的腎臟疾病的修復(fù)提供更多的理論和實(shí)踐依據(jù)。