孫洪帥,朱 華,高海燕,萬廣財,于秀艷
(吉林省腫瘤醫(yī)院檢驗科,吉林 長春 130012)
非小細胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)占肺癌總數(shù)的80%~85%[1],常見的病理類型包括腺狀細胞癌、鱗狀細胞癌和大細胞癌。目前NSCLC主要通過低劑量肺部螺旋CT、纖維支氣管鏡和肺部病理活檢等檢查確診,但其起病隱匿,多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時已為晚期,失去了手術(shù)切除的機會,如不治療,中位生存時間僅4~5個月[2]。因此,NSCLC的早期發(fā)現(xiàn)對于延長患者的生存期至關(guān)重要。腫瘤標(biāo)志物是指腫瘤發(fā)生過程中,由腫瘤細胞合成、分泌或脫落到體液或組織中并與腫瘤密切相關(guān)的活性物質(zhì)[3-11]。吳園園等[12]報道了利用腫瘤標(biāo)志物來輔助診斷肺癌。曹耿磊[13]也報道了腫瘤標(biāo)志物在肺部腫瘤臨床研究中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,其可以用于NSCLC早期診斷。本實驗選取靈敏度與特異度相對較高的腫瘤標(biāo)志物[鱗狀細胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC-Ag)[14-15]、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)[16]、細胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA21-1)][17]來輔助診斷NSCLC。最近,有關(guān)D-二聚體(D-D)與NSCLC之間關(guān)系的研究逐漸受到重視,蔡文慧等[18]研究發(fā)現(xiàn):在NSCLC患者中,D-D有升高的趨勢。國內(nèi)外關(guān)于NSCLC早期診斷的研究相對較少,本研究選取腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D聯(lián)合診斷NSCLC,以期為NSCLC的早期診斷提供一種確實有效的方法。
1.1 研究對象 選取2013年6月—2017年9月于本院就診的NSCLC患者(200例,NSCLC組)、肺部良性病變患者(198例,肺部良性病變組)和健康體檢者(196名,對照組)作為研究對象。NSCLC患者由病理學(xué)或組織學(xué)診斷確診,肺部良性病變患者由低劑量肺部螺旋CT和纖維支氣管鏡等方法綜合診斷。排除標(biāo)準(zhǔn):①腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D未同時檢測的患者;②接受過NSCLC系統(tǒng)治療的患者;③既往有其他部位惡性腫瘤病史患者;④伴有肝硬化、充血性心力衰竭和腎病綜合征的患者;⑤在測量腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1與D-D之前,攝入了高劑量利尿劑的患者。
1.2 分組和檢測方法 將研究對象分為NSCLC組、肺部良性病變組(肺結(jié)核瘤、肺錯構(gòu)瘤和肺炎性假瘤等)和對照組,收集每組患者的基線信息。采用雅培ARCHITECT i2000 全自動化學(xué)發(fā)光儀及原裝配套試劑測定SCC-Ag、CEA和CYFRA21-1水平,采用ACL(TOP700)全自動凝血分析儀及原裝配套試劑測定D-D水平。根據(jù)實驗室檢測標(biāo)準(zhǔn),以CEA>5 μg·L-1、SCC-Ag>5 μg·L-1、CYFRA21-1>5 μg·L-1和D-D>5 00 μg·L-1判定為陽性,聯(lián)合檢測時若有1個及1個以上指標(biāo)陽性則判定為陽性,否則判定為陰性。在前期臨床工作中本文作者發(fā)現(xiàn)NSCLC組患者腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平高于肺部良性病變組和對照組,因此,本研究采用腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D聯(lián)合檢測NSCLC,從而放大NSCLC的檢出率;對檢測結(jié)果作圖繪制受試者工作特征曲線(ROC曲線),計算曲線下面積(AUC)。
1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,ROC曲線繪制采用MedCalc 15.0軟件。各組研究對象年齡比較采用單因素方差分析,各組性別構(gòu)成比比較采用χ2檢驗。對于不滿足正態(tài)分布的SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平比較采用秩和檢驗,兩個獨立樣本間比較采用非參數(shù)檢驗Mann-WhitneyU檢驗,多個獨立樣本比較采用非參數(shù)檢驗Kruskal-willsH檢驗。采用ROC曲線比較4種標(biāo)志物與4種標(biāo)志物聯(lián)合檢測的診斷效能,并計算ROC的AUC、靈敏度和特異度。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 各組研究對象一般資料 NSCLC組200例,其中男性108例,女性92例,中位年齡63歲(41~78歲)。肺部良性病變組198例,其中男性98例,女性100例,中位年齡59歲(31~81歲)。對照組196名,其中男性100名,女性96名,中位年齡60歲(36~80歲)。研究對象年齡和性別構(gòu)成比比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.426,P=0.311),具有可比性。見表1。
表1 各組研究對象基線信息
2.2 各組研究對象腫瘤標(biāo)志物和D-D水平 由于NSCLC組、肺部良性病變組和對照組研究對象SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平均呈非正態(tài)分布(P<0.01),因此3組間比較采用Kruskale-WallisH秩和檢驗。結(jié)果顯示:NSCLC組患者SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平明顯高于肺部良性病變組和對照組 (P<0.01),而肺部良性病變組與對照組研究對象SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1及D-D水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(PSCC-Ag=0.312,PCEA=0.780,PCYFRA21-1=0.379,PD-D=0.313)。見表2。
表2 各組研究對象SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平
Pvalue was obtained using Kruskale-WallisHtest;*P<0.05vscontrol group;△P<0.05vsbenign lung disease group.
2.3 不同病理類型NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物和D-D水平 肺腺癌患者CEA水平明顯高于肺鱗癌患者(P=0.005),肺鱗癌患者SCC-Ag和CYFRA21-1水平明顯高于肺腺癌患者(P=0.008,P=0.004),而不同病理類型NSCLC患者D-D水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.923)。見表3。
表3 不同病理類型NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物和D-D水平
Pvalue was obtained using Mann-WhitneyUtest.
2.4 不同疾病分期NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物和D-D水平 Ⅲ-Ⅳ期患者CEA、CYFRA21-1和D-D水平明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者 (P<0.05),而Ⅲ-Ⅳ期患者SCC-Ag水平與Ⅰ-Ⅱ期患者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表4。
表4 不同疾病分期NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物和D-D水平
Pvalue was obtained using Mann-WhitneyUtest.
2.5 ROC曲線分析腫瘤標(biāo)志物及D-D水平對NSCLC的診斷價值 腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平及4項指標(biāo)聯(lián)合檢測在NSCLC診斷中的AUC分別為0.805、0.728、0.746、0.778和0.933,與對照組(AUC=0.5)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見圖1。單項檢測中,SCC-Ag的AUC高于其他單項指標(biāo),其靈敏度和特異度分別為85.42%和4.21%。4項指標(biāo)聯(lián)合檢測的診斷效能均優(yōu)于各單項檢測 (AUC=0.933),其靈敏度和特異度分別為86.46%和88.42%。見表4。
表5 ROC曲線分析各腫瘤標(biāo)志物和D-D水平對NSCLC的診斷價值
AUC: Area under curve;PV+: Positive predict value;PV-: Negative predict value; YI: Youden index.
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圖1 腫瘤標(biāo)志物和D-D水平在NSCLC診斷中的ROC曲線
Fig.1 ROC of levels of tumor markers and D-D in diagnosis of NSCLC
腫瘤標(biāo)志物是腫瘤組織在發(fā)生發(fā)展過程中釋放的微量物質(zhì),在惡性腫瘤中呈高表達,其可用于腫瘤的早期診斷。此外,惡性腫瘤還可使NSCLC患者血液呈高凝狀態(tài), 繼而D-D水平在NSCLC患者血液中相應(yīng)升高,且D-D水平升高程度與病情的嚴(yán)重程度有關(guān)聯(lián),因此,研究腫瘤標(biāo)志物和D-D水平與NSCLC的相關(guān)性對早期診斷NSCLC具有重要意義。
SCC-Ag是從宮頸鱗狀細胞癌患者中分離、提純出的一種糖蛋白,廣泛存在于惡性腫瘤的上皮細胞中。研究[13]表明:SCC-Ag是檢測NSCLC特異性較高的指標(biāo)。CEA是一種酸性糖蛋白,編碼基因位于19號染色體上,為胚胎性癌抗原,國內(nèi)外均有證實,CEA在多數(shù)NSCLC患者血液中呈高水平表達。
CYFRA21-1屬于細胞角蛋白家族,當(dāng)腫瘤細胞破壞或死亡時大量可溶性的細胞角蛋白19片段釋放入血,使其在血液中的水平明顯升高,其為NSCLC特異性最好的腫瘤標(biāo)志物。本研究結(jié)果顯示:腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平在NSCLC組患者中明顯升高,而肺部良性病變組和對照組研究對象各腫瘤標(biāo)志物和D-D水平較低,說明腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平對NSCLC早期診斷具有一定的臨床價值。許利芳等[19]研究表明:腫瘤標(biāo)志物CEA、CYFRA21-1和SCC-Ag對NSCLC診斷和預(yù)后評估具有重要的臨床價值。不同病理類型NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平不同,考慮肺鱗癌時優(yōu)先選擇檢測SCC-Ag和CYFRA21-1,考慮肺腺癌時優(yōu)先選擇檢測CEA。曹耿磊[13]報道:CEA在腺癌中的水平高于鱗癌,SCC-Ag在鱗癌的水平高于腺癌,其結(jié)論與本研究結(jié)果一致。隨著NSCLC分期越高,患者腫瘤標(biāo)志物CEA、CYFRA21-1和D-D水平升高越明顯,提示可根據(jù)腫瘤標(biāo)志物及D-D表達水平來評估NSCLC患者的預(yù)后,與許利芳等[19]研究結(jié)果一致。本研究ROC曲線結(jié)果顯示:單個指標(biāo)SCC-Ag在NSCLC診斷效能最高,AUC為0.805,靈敏度為85.42%;而4項聯(lián)合指標(biāo)AUC為0.933,靈敏度為86.46%;4項聯(lián)合指標(biāo)AUC高于SCC-Ag(0.128),靈敏度高于SCC-Ag(1.02%),說明4項指標(biāo)聯(lián)合檢測的診斷效能大大優(yōu)于單項指標(biāo)。
綜上所述,CEA是診斷肺腺癌較理想的指標(biāo),SCC-Ag和CYFRA21-1是診斷肺鱗癌較理想的指標(biāo);CEA、CYFRA21-1和D-D檢測值大小與NSCLC的分期有關(guān);腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D聯(lián)合檢測對NSCLC的診斷效能和靈敏度最高,本研究與許利芳等[19]結(jié)果比較,具有更高的診斷靈敏度與特異度,從而為早期無創(chuàng)性診斷NSCLC提供了一種確實有效的方法。