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(洛陽(yáng)市中心醫(yī)院肝膽胰脾外科，河南 洛陽(yáng) 471009)

膽管癌是臨床上較少見(jiàn)的惡性腫瘤之一，起源于膽管上皮細(xì)胞，其病因可能與原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管結(jié)石等疾病有關(guān)，手術(shù)治療、放射治療、化學(xué)治療等是目前臨床上治療膽管癌的方法。由于其起病隱匿、易發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移、發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚等，嚴(yán)重威脅著患者的生命。大量臨床研究表明，對(duì)膽管癌患者予以早期診斷和有效治療對(duì)提高其預(yù)后生存率具有重要的臨床意義[1]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)又稱血管通透因子，是最重要的血管內(nèi)皮誘導(dǎo)因子，其表達(dá)與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移有著密切的聯(lián)系?；|(zhì)金屬蛋白酶-7(Matrix metalloproteinase-7，MMP-7)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中最小的成員，可降解如纖維連接蛋白、層黏連蛋白、彈性蛋白等各種細(xì)胞外基質(zhì)成分，其多態(tài)性與多種惡性腫瘤如小細(xì)胞肺癌、卵巢癌等的易感性具有一定的相關(guān)性。有學(xué)者指出，VEGF和MMP-7的檢測(cè)對(duì)膽管癌的早期診斷、有效治療具有一定的臨床價(jià)值，但學(xué)術(shù)界對(duì)于VEGF和MMP-7表達(dá)與膽管癌預(yù)后之間的關(guān)系的研究報(bào)道較為少見(jiàn)[2]。因此，本文選取本院2010年5月至2012年8月手術(shù)切除膽管癌組織標(biāo)本35例及非膽管癌組織標(biāo)本30例為研究對(duì)象，以此探討VEGF和MMP-7在膽管癌組織中的表達(dá)及其預(yù)后的關(guān)系，為提高其臨床診治水平提供參考依據(jù)，具體內(nèi)容報(bào)道如下。

1 臨床資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取本院2010年5月至2012年8月手術(shù)切除膽管癌組織標(biāo)本35例為觀察組。其中男性19例，女性16例，年齡45～75歲，平均年齡46.3±12.32。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有患者術(shù)前均未放化療；(2)均經(jīng)過(guò)病理組織學(xué)檢查確診；(3)患者及患者家屬對(duì)本次研究均知情并簽署同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并心、肝、腎等重要臟器損傷者；(2)凝血功能障礙者；(3)自愿退出本次研究者。另選取同期手術(shù)切除非膽管癌組織標(biāo)本(癌旁膽管組織)30例為對(duì)照組，其中男性17例，女性13例，年齡45～76歲，平均年齡47.5±14.32。兩組患者在性別、年齡等一般臨床資料方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

通過(guò)查閱住院記錄、各種輔助檢查單，隨訪記錄等病案資料，收集入選膽管癌患者的臨床和隨訪資料，使用統(tǒng)一調(diào)查表摘錄相關(guān)內(nèi)容，主要包括基本資料、手術(shù)病理分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。

1.3 隨訪方式

經(jīng)電話隨訪或門診復(fù)查等方式進(jìn)行隨訪，收集資料。隨訪周期為術(shù)后1年內(nèi)每3個(gè)月1次，3年內(nèi)6個(gè)月1次，5年內(nèi)9個(gè)月1次，之后每1年1次。隨訪至患者死亡或2017年8月1日為止，入選患者隨訪率為100%。

1.4 指標(biāo)檢測(cè)

所有標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定24h以上，常規(guī)石蠟包埋，室溫保存，分別做蘇木精-伊紅染色法(HE)及免疫組化染色。免疫組化采用SP法，試劑盒來(lái)源于上海研卉生物科技有限公司，檢測(cè)過(guò)程嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比，陽(yáng)性細(xì)胞<5%為陰性，陽(yáng)性細(xì)胞率5～25%為弱陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞率26～50%為陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞率>50%為強(qiáng)陽(yáng)性，VEGF、MMP-7強(qiáng)陽(yáng)性、陽(yáng)性、弱陽(yáng)性均定性為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料采用率和構(gòu)成比等相對(duì)數(shù)進(jìn)行描述，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±SD)進(jìn)行描述，采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 VEGF和MMP-7在膽管癌組織及非膽管癌組織中的表達(dá)

觀察組VEGF和MMP-7的陽(yáng)性表達(dá)率分別為68.57%、71.43%，對(duì)照組VEGF和MMP-7的陽(yáng)性表達(dá)率分別為23.33%、36.67%，觀察組中VEGF和MMP-7的陽(yáng)性表達(dá)率均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 VEGF和MMP-7在膽管癌組織

注：與對(duì)照組相比，**P<0.01，***P<0.001。

2.2 VEGF和MMP-7的表達(dá)與膽管癌臨床病理特征的關(guān)系

觀察組VEGF以及MMP-7的陽(yáng)性表達(dá)均與患者性別、年齡、腫瘤大小無(wú)關(guān)，與分化程度及腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3 VEGF和MMP-7表達(dá)與膽管癌預(yù)后的關(guān)系

膽管癌患者術(shù)后5年總體生存率為22.86%(8/35)，VEGF和MMP-7的表達(dá)均與生存期<5年相關(guān)(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表2 VEGF和MMP-7表達(dá)與膽管癌臨床病理特征的關(guān)系(例)

注：與高分化相比，aP<0.05；與中分化相比，bP<0.05；與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相比，*P<0.05，**P<0.05。

表3 VEGF和MMP-7表達(dá)與膽管癌預(yù)后的關(guān)系(例(%))

注：與生存時(shí)間<5相比，*P<0.01，**P<0.01。

3 討論

一直以來(lái)，惡性腫瘤對(duì)人們的身體健康造成了嚴(yán)重的威脅，關(guān)于腫瘤方面的研究也是學(xué)界的熱點(diǎn)。膽管癌是一種罕見(jiàn)惡性腫瘤，易發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移，手術(shù)切除全部腫瘤是唯一有效的治療方法[3]。但是膽管癌起病隱匿，不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)病情變化，確診時(shí)已經(jīng)進(jìn)入進(jìn)展期，并且解剖部位復(fù)雜又特殊，徹底切除全部腫瘤的可能性不大，預(yù)后較差。因此，尋找有效的檢測(cè)指標(biāo)對(duì)膽管癌的早期診斷、治療及預(yù)后評(píng)估具有重要的臨床意義。

近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，分子與基因水平檢測(cè)作為了腫瘤的診斷與治療的一種手段[4]。有相關(guān)研究報(bào)道，VEGF和MMP-7表達(dá)與膽管癌的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移預(yù)后有著密切的關(guān)系[5]。其中VEGF是一種糖蛋白，廣泛分布于人和動(dòng)物體內(nèi)組織中，由不同的腫瘤細(xì)胞分泌，也可表達(dá)于正常細(xì)胞及組織，是刺激血管內(nèi)皮增殖最重要的因子之一，具有較強(qiáng)誘導(dǎo)腫瘤血管形成的作用[6]。MMP-7是一種分泌型蛋白，是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中最小的成員，其基質(zhì)降解活性強(qiáng)大和底物特異性廣泛，主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞或腫瘤浸潤(rùn)邊緣的間質(zhì)中，在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起到重要的作用[7]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組VEGF和MMP-7的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組；且VEGF以及MMP-7的陽(yáng)性表達(dá)均與患者性別、年齡、腫瘤大小無(wú)關(guān)，而與分化程度及腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)；這些結(jié)果與梁晶等研究結(jié)果相似[8]。提示若采取有效的手段干預(yù)或抑制VEGF和MMP-7可有效緩解膽管癌患者的病情，從而提高患者的生活質(zhì)量。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，膽管癌患者的VEGF和MMP-7表達(dá)水平均與生存期<5年有關(guān)，提示VEGF和MMP-7高表達(dá)的膽管癌患者生存時(shí)間較短，有助于臨床醫(yī)師對(duì)膽管癌預(yù)后的評(píng)估。

綜上所述，膽囊癌組織中VEGF和MMP-7的陽(yáng)性率和表達(dá)強(qiáng)度均高于非膽管癌組織，VEGF和MMP-7表達(dá)均與膽管癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，是影響膽管癌預(yù)后的重要因素。因此，膽管癌治療的靶點(diǎn)是保護(hù)基底膜的完整性和抑制腫瘤淋巴管的生成。