夏晨陽，劉建枝，宋天增，翁浩博，卓 嘎，單曲拉姆，石 斌，唐文強

（1.西藏自治區(qū)農牧科學院畜牧獸醫(yī)研究所，拉薩 850009；2.西藏那曲地區(qū)畜牧獸醫(yī)技術推廣總站，那曲 852000；3.西藏日喀則動物疫病預防控制中心，日喀則 857000）

羊球蟲?。╟occidiosis）是由孢子蟲綱（Sporozoasida）真球蟲目（Eucoccidiorida）艾美耳科（Eimeriidae）艾美爾屬（Eimeria）的多種球蟲寄生于山羊或綿羊腸黏膜上皮細胞內引起的一種常見的原蟲性疾?。?］。球蟲呈世界性分布［2］，羔羊主要表現(xiàn)為下痢、消瘦、貧血、發(fā)育不良為特征的疾病，綿羊球蟲病病原共有16種［3］。青年羊和成年羊多為亞臨床感染，不表現(xiàn)臨床癥狀，但會導致生長發(fā)育遲緩和繁殖性能下降，羊肉、羊奶、羊毛（絨）、羊腸衣及皮革的產量和品質均降低，給養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大的經濟損失，嚴重阻礙了小反芻動物養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。西藏是我國五大牧區(qū)之一，羔羊球蟲病危害嚴重，為了解球蟲感染狀況，筆者等于2016年6—9月對西藏日喀則白朗縣、康馬縣、亞東縣，那曲地區(qū)那曲縣，山南地區(qū)乃東縣及阿里地區(qū)日土縣的綿山羊球蟲種類及感染現(xiàn)狀進行了調查，以便為更好地控制該病提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 糞樣

共隨機采集西藏日喀則白朗縣44只、康馬縣50只、亞東縣50只，那曲地區(qū)那曲縣31只，山南地區(qū)乃東縣40只，共計215只綿羊的糞便。采集阿里地區(qū)日土縣48只白絨山羊糞便。每只約10 g，密封于塑料袋中，置4℃冰箱內待檢。

1.2 卵囊的分離與培養(yǎng)

每份糞樣取1 g，用飽和食鹽水漂浮法鏡檢。將有球蟲卵囊的陽性糞樣每份再取5 g，置干凈的燒杯內加少許飽和食鹽水，用玻璃棒搗碎，將糞便轉入燒杯中，加入自來水并不斷攪拌至糊狀，靜置10 min再次攪拌，倒入20目篩子中（如果糞樣較多，可分多次過濾），不斷攪拌使濾液依次通過50目、100目糞篩，20目篩子中要間隔加入300 mL自來水，50目、100目糞篩分別加200 mL和100 mL，最后收集濾液。分裝于50 mL帶蓋離心管，3 000 r/min離心10 min；取沉淀加50 mL飽和食鹽水攪拌均勻，1 500 r/min離心10 min；取上清5倍體積稀釋，分裝于50 mL帶蓋離心管內，3 000 r/min離心10 min；取沉淀鏡檢，2.5%重鉻酸鉀28℃培養(yǎng)48～72 h，每隔3～5小時吹打1次。

卵囊孢子化完成的時間、內外殘體的有無，參照文獻［4］、圖譜作出種類鑒定，并記數(shù)球蟲數(shù)量，計算感染率。

1.3 球蟲形態(tài)學鑒定

于光學顯微鏡下觀察孢子化卵囊大小、顏色、形態(tài)結構等特征，根據(jù)Eckert J等［4］介紹的方法進行球蟲種類鑒定。

2 結果

2.1 球蟲感染情況

2.1.1 綿羊球蟲感染情況 經飽和鹽溶液漂浮法檢查，215份糞便樣本中185份發(fā)現(xiàn)有球蟲卵囊，總感染率86.05%，各縣球蟲感染率分別為乃東縣87.50%（35/40）、那曲縣 87.10%（27/31）、白朗縣 81.82%（36/44）、康馬縣88.00%（44/50）、亞東縣 86.00%（43/50）。

2.1.2 山羊球蟲感染情況 經飽和鹽溶液漂浮法檢查，日土縣48份糞便樣本中40份發(fā)現(xiàn)有球蟲卵囊，羊球蟲感染率 83.33%（40/48）。

2.2 球蟲種類及各種球蟲感染率

2.2.1 綿羊球蟲種類、感染率及其分布 對185份陽性樣品采用Eckert J等［4］方法進行球蟲卵囊收集與培養(yǎng)，鑒定綿羊球蟲8種，具體種類、感染率及其分布見表1。致病性最強的阿撒他艾美耳球蟲（E.ahsata）感染率達30.23%，且各地均有分布。

2.2.2 山羊球蟲種類、感染率及其分布 對40份陽性糞便樣品采用Eckert等［4］方法進行球蟲卵囊收集與培養(yǎng)，鑒定山羊球蟲7種，具體種類、感染率見表2。致病性最強的雅氏艾美爾球蟲（E.ninakohlyakimovae）感染率達27.08%，潛在危害嚴重。

2.3 球蟲混合感染情況

2.3.1 綿羊混合感染情況 鑒定的185份陽性糞便樣本中有185份感染2種以上球蟲，混合感染率100.00%，最多可混合感染7種球蟲，多數(shù)為3～5種；感染3種、4種和5種球蟲的羊占球蟲陽性羊的比例分別為24.32%（45/185）、48.65%（90/185）和 19.46%（36/185）；感染 6種和7種球蟲的羊占球蟲陽性羊的比例分別為5.95%（11/185）和 1.62%（3/185）。

表1 綿羊球蟲種類、感染率及其分布

表2 山羊球蟲種類、感染率及其分布

2.3.2 山羊混合感染情況 鑒定的40份陽性糞便樣本中有40份感染2種以上球蟲，混合感染率100.00%，最多可混合感染6種球蟲，多數(shù)為3～5種；感染3種、4種和5種球蟲的羊占球蟲陽性羊的比例分別為10.00%（4/40）、27.50%（11/40）和 57.50%（23/40）；感染 6 種球蟲的羊占球蟲陽性羊的比例為5.00%（2/40）。

2.4 球蟲的形態(tài)結構特征

2.4.1 綿羊球蟲形態(tài)特征 顆粒艾美耳球蟲（E.granulosa）：壇狀，后部寬大，有較大的極帽、卵膜孔，黃棕色，有卵囊殘體、孢子囊殘體，22～35 μm×17～25 μm，孢子化時間 3～4 d。

綿羊艾美耳球蟲（E.ovinoidalis）：橢圓形，卵膜孔不明顯，白色或淺黃色，無卵囊殘體，有孢子囊殘體，17～25 μm×13～20 μm，孢子化時間 1～3 d。

小艾美耳球蟲（E.parva）：球形或亞球形，無極帽、卵膜孔，無色，無卵囊殘體，孢子囊殘體附著一些沉著顆粒，13～22 μm×11～13 μm，孢子化時間 1～3 d。

阿撒他艾美耳球蟲（E.ahsata）：卵圓形，極帽明顯，黃棕色，無卵囊殘體，有孢子囊殘體，29～37μm×17～28μm，孢子化時間2～3 d。

溫布里吉艾美耳球蟲（E.weybridgensis）：寬橢圓形或亞圓形，卵膜孔有或無極帽，無卵囊殘體或孢子囊殘體，17～30 μm×14～19 μm，孢子化時間 1～3 d。

浮氏艾美爾球蟲（E.faurei）：卵形，淡黃棕色，無卵囊殘體或孢子囊殘體，28～37 μm×21～27 μm，孢子化時間 1～3 d。

2.4.2 山羊球蟲形態(tài)特征 艾麗艾美耳球蟲（E.alijevi）：卵形或橢圓形，無色或淡黃色，卵膜孔模糊，無卵囊殘體，有孢子囊殘體，15～23 μm×12～22 μm，孢子化時間1～5 d。

阿氏艾美耳球蟲（E.arloingi）：橢圓形，胞壁厚，無卵囊殘體，有孢子囊殘體，17～42 μm×13～27 μm，孢子化時間 1～2 d。

約奇艾美耳球蟲（E.jolchijevi）：卵形或橢圓形，淡黃色，無卵囊殘體，有孢子囊殘體，26～37 μm×18～26 μm，孢子化時間2～4 d。

柯氏艾美耳球蟲（E.christenseni）：卵形，胞壁厚，無色或淡黃色，無卵囊殘體，有孢子囊殘體，34～41 μm×23～28 μm，孢子化時間 6 d。

山羊艾美耳球蟲（E.caprina）：橢圓形，深褐色至褐黃色，無卵囊殘體，有孢子囊殘體，27～40 μm×19～26 μm，孢子化時間2～3 d。

雅氏艾美耳球蟲（E.ninakohlyakimovae）：橢圓形，胞壁薄，無色，無卵膜孔或卵膜孔模糊，無卵囊殘體，有孢子囊殘體，20～22 μm×14～16 μm，孢子化時間 1～4 d。

家山羊艾美耳球蟲（E.hirci）：略卵圓形，淺黃色，無卵囊殘體，孢子囊卵圓形，有孢子囊殘體，18～23 μm×14～19 μm，孢子化時間 2～3 d。

3 討論

衛(wèi)九健等［5］報道，河南及重慶、安徽部分地區(qū)山羊共鑒定出12種艾美耳球蟲，優(yōu)勢蟲種為阿氏、艾麗、家山羊克氏艾美耳；鮑鳴等［6］報道，安徽鳳臺縣山羊鑒定出10種艾美耳球蟲，優(yōu)勢蟲種為雅氏、阿氏、浮氏和小型艾美耳球蟲；汪明等［7］報道，北京、河北地區(qū)綿羊球蟲總感染率87.8%，共鑒定出10種球蟲，主要流行的蟲種為小型艾美耳球蟲（58.65%）、艾美耳球蟲（53.5%）、阿撒他艾美耳球蟲（50.65%）和巴庫艾美耳球蟲（49.65%），混合蟲種感染為普遍現(xiàn)象；史萬貴等［8］對甘肅30個縣1 476只綿羊球蟲感染情況進行了調查，總感染率90.31%，共發(fā)現(xiàn)艾美爾屬球蟲9種；李春花等［9］對青海祁連縣默勒鎮(zhèn)96只綿羊進行了球蟲感染情況和種類調查研究，結果顯示總感染率70.8%，其中1歲羊感染率83.3%，2歲羊感染率76.7%，成年羊感染率46.7%，多為 2～5 種球蟲混和感染；閻曉菲等［10］對新疆烏魯木齊綿羊球蟲感染季節(jié)動態(tài)變化進行了調查，結果表明，綿羊全年總感染率71.38%，其中夏季感染率65.28%，秋季感染率78.24%，冬季感染率62.18%，春季感染率81.58%，羔羊感染率最高，經形態(tài)學鑒定共發(fā)現(xiàn)7種綿羊球蟲。Balicka等［11］調查波蘭110只山羊群球蟲感染情況，結果共檢出9種艾美耳球蟲，羔羊和成年羊球蟲感染率分別為100%和81%，有50%羔羊出現(xiàn)臨床癥狀。王利明等［12］調查發(fā)現(xiàn)，新疆庫車縣綿羊球蟲總感染率100%，共鑒定出5種球蟲。蔣維東等［13］調查發(fā)現(xiàn)，新疆和田某規(guī)?；B(yǎng)殖場和田羊和策勒黑羊球蟲的總感染率50.90%。此結果與王利明等［12］在庫車縣調查結果相差較大，說明不同地區(qū)，羊球蟲感染情況存在較大差異。有關西藏地區(qū)球蟲研究較少。夏晨陽等［14］2013年5月—2014年4月對西藏尼木縣山羊球蟲進行了系統(tǒng)研究，研究結果顯示，山羊球蟲年平均感染率91.16%，感染率存在季節(jié)性，夏季感染率低（70.00%～86.67%），春秋冬季感染率高（90.00%～100%），在山羊體內發(fā)現(xiàn)感染有致病性強的球蟲9種。

本次調查結果顯示，西藏上述地區(qū)綿羊球蟲平均感染率86.05%，阿里地區(qū)日土縣山羊球蟲感染率83.33%，總體平均感染率85.55%，各地均有綿山羊感染致病力強的球蟲蟲種。本次調查主要集中于6—9月份，綿、山羊球蟲感染率與劉建枝等［14］調查尼木縣夏季期間山羊球蟲感染率結果基本一致。全國各地不同地區(qū)的綿、山羊球蟲感染率不盡相同，感染種類也不盡相同，可能與各地自然生態(tài)環(huán)境等諸多因素相關，本文報道的綿羊羔羊球蟲感染情況與李春花等［9］的報道相近。

筆者調查走訪了西藏各地農牧民及基層獸防組織，發(fā)現(xiàn)截至目前項目區(qū)內綿、山羊從未做過任何球蟲防治工作，因此，致病力強的球蟲種類在西藏項目區(qū)內春季產羔季節(jié)羔羊死亡過程中是否扮演重要角色，仍有待深入研究。