陳文翰 孫光裕 陳偉忠 謝彬 林少榮 丁云崗

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是指除了飲酒及其他因素導(dǎo)致肝臟代謝應(yīng)激性損傷的臨床病理綜合征，胰島素抵抗和遺傳易感性與其發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)[1-2]。按病情程度的不同可分為：?jiǎn)渭冃灾靖?、非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化和肝癌[3]。科技的發(fā)展改變了人們的生活習(xí)慣，而不斷提高的物質(zhì)生活水平卻使得NAFLD的發(fā)病率在全球呈現(xiàn)一個(gè)流行化的趨勢(shì)，而且發(fā)病率也逐漸地相對(duì)年輕化，已經(jīng)成為當(dāng)今社會(huì)超過病毒性肝炎的最常見慢性病之一。NAFLD還與高脂血癥、2型糖尿病、心腦血管疾病等一系列代謝性疾病的發(fā)生發(fā)展息息相關(guān)[4]。NAFLD的治療方面，目前尚缺乏十分有效的手段[5]。近年來，隨著人們對(duì)腸道菌群研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)腸道菌群與宿主代謝及NAFLD之間有著非常密切的相關(guān)性。著名的“二次打擊”學(xué)說[6-7]，較好地詮釋了NAFLD的發(fā)病機(jī)制，指出腸道菌群通過“腸-肝軸”可以影響NAFLD的發(fā)生發(fā)展。本研究通過復(fù)合乳酸菌膠囊對(duì)NAFLD的療效進(jìn)行觀察分析，目的為證明復(fù)合乳酸菌膠囊為治療NAFLD的安全有效方法之一?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年3月-2018年3月本院住院的確診NAFLD患者40例為NAFLD組。納入標(biāo)準(zhǔn)：以《非酒精性脂肪性肝病診療指南》作為確診診斷的參考標(biāo)準(zhǔn)[8]；既往無飲酒史。排除標(biāo)準(zhǔn)：其他特殊病因的肝病病史、糖尿病史，排除妊娠及精神病史。按照隨機(jī)數(shù)字表法將NAFLD患者分為A、B組，各20例。另選取同期在本院門診健康體檢者40例為健康對(duì)照組。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，研究對(duì)象均系自愿參加，并已簽署知情同意書。

1.2 方法 A組給予含有乳酸桿菌、嗜乳酸桿菌和乳酸鏈球菌三種活乳酸菌的復(fù)合乳酸菌膠囊（江蘇美通制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H19980184），口服660 mg/次，3次/d，連續(xù)8周。B組為空白對(duì)照組。研究對(duì)象在研究期間均確保沒有使用任何調(diào)控血脂的藥物、含有益生菌成分的食物、抗生素等有可能改變腸道菌群情況的物品。

1.3 觀察指標(biāo) （1）NAFLD患者均在治療前后留取糞便標(biāo)本，健康對(duì)照組均在檢查時(shí)留取標(biāo)本，通過對(duì)糞便標(biāo)本進(jìn)行涂片，分類計(jì)數(shù)，比較腸道菌群中有益菌（主要為含有乳酸菌、雙歧桿菌等G+桿菌）、中性菌及有害菌（主要為G-桿菌、G+球菌和G-球菌）的變化情況，了解腸道菌群的變化情況；（2）血清學(xué)指標(biāo)：NAFLD患者分別在治療前后于空腹?fàn)顟B(tài)下采集靜脈血，通過全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清總膽固醇（TC）和甘油三酯（TG）的水平變化。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 22.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組基線資料比較 健康對(duì)照組與NAFLD組性別、年齡比較差異均統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.897、-0.442，P=0.062、0.660），具有可比性；A、B組性別、年齡比較差異均統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-0.984、-0.936，P=0.331、0.355），具有可比性。見表1。

表1 各組一般資料比較

2.2 各組腸道菌群檢測(cè)結(jié)果比較 治療前，NAFLD組G+桿菌占腸道菌群的百分比例少于健康對(duì)照組，G-桿菌、G+球菌及G-球菌占腸道菌群的百分比例均多于健康對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療前，A、B組腸道菌群檢測(cè)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，A組G+桿菌占腸道菌群的百分比例多于治療前和B組，G+球菌占腸道菌群的百分比例少于治療前，G-球菌占腸道菌群的百分比例少于B組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；B組治療前后腸道菌群檢測(cè)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2、3。

2.3 NAFLD患者治療前后血清學(xué)指標(biāo)比較 治療前，A、B組TG、TC水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，A組TG、TC水平均低于治療前、B組（P＜0.05），但B組治療前后TG、TC水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表4。

表2 健康對(duì)照組與NAFLD組治療前腸道菌群的情況比較[lg%，（±s）]

表2 健康對(duì)照組與NAFLD組治療前腸道菌群的情況比較[lg%，（±s）]

組別 G+桿菌 G-桿菌 G+球菌 G-球菌健康對(duì)照組（n=40） 1.60±0.11 1.45±0.26 0.97±0.23 0.97±0.19 NAFLD 組（n=40） 1.09±0.32 1.59±0.28 1.24±0.33 1.15±0.22 t值 9.629 -2.212 -4.308 -3.969 P值 0.000 0.030 0.000 0.000

表3 NAFLD患者治療前后腸道菌群的情況比較[lg%，（±s）]

表3 NAFLD患者治療前后腸道菌群的情況比較[lg%，（±s）]

組別 G+桿菌G-桿菌治療前 治療后 t值 P值 治療前 治療后 t值 P值A(chǔ) 組（n=20） 1.06±0.34 1.47±0.09 -6.810 0.000 1.57±0.32 1.60±0.10 -0.677 0.507 B 組（n=20） 1.13±0.29 1.26±0.23 -1.560 0.127 1.61±0.24 1.56±0.30 1.298 0.210 t值 -0.677 3.855 -0.496 0.636 P值 0.503 0.001 0.623 0.531

表3 （續(xù)）

表4 NAFLD患者治療前后TC、TG水平比較[mmol/L，（±s）]

表4 NAFLD患者治療前后TC、TG水平比較[mmol/L，（±s）]

治療前 治療后 t值 P值 治療前 治療后 t值 P值A(chǔ) 組（n=20） 6.28±0.99 5.49±0.75 2.828 0.008 1.89±0.65 1.38±0.46 2.852 0.007 B 組（n=20） 5.83±0.83 5.95±0.91 -0.450 0.655 2.39±1.19 2.45±0.97 -0.178 0.860 t值 1.557 -1.742 -1.656 -4.451 P值 0.128 0.090 0.108 0.000組別 TC TG

3 討論

到目前為止，NAFLD的發(fā)病機(jī)制仍沒有完全明確，“二次打擊”學(xué)說是目前公認(rèn)的比較合理的發(fā)病機(jī)制，普遍認(rèn)為NAFLD與胰島素抵抗和遺傳易感性有關(guān)，是一種代謝應(yīng)激性肝損傷[9-10]，胰島素抵抗主要通過高脂血癥和高胰島素血癥這兩個(gè)途徑，使得大量的脂質(zhì)沉積在肝內(nèi)，繼而導(dǎo)致肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性，這是來自胰島素抵抗和高胰島素血癥的第一次打擊。第二次打擊來自脂質(zhì)過氧化對(duì)肝臟的損害，多種因素所致的氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化，反復(fù)作用于肝臟細(xì)胞，導(dǎo)致非特異性炎性損傷的發(fā)生，繼而發(fā)展成為肝纖維化、肝硬化，甚至是肝細(xì)胞癌[11]。近年來，國內(nèi)外有許多項(xiàng)研究均發(fā)現(xiàn)，腸道菌群失調(diào)患者罹患NAFLD率高于腸道健康人群，提示菌群失調(diào)與NAFLD的發(fā)生有關(guān)[12]。人體腸道中菌群有10萬億之多，規(guī)模非常龐大，這些細(xì)菌根據(jù)其對(duì)人體所產(chǎn)生的不同作用，可分為有益菌、有害菌和中性菌三大類。有益菌，也稱之為益生菌，主要包括乳酸桿菌、雙歧桿菌等各種G+桿菌[13-14]。有益菌除了可以合成各種必需的維生素，還能促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，參與食物的消化，另外還能抑制有害菌群的生長(zhǎng)，防止腸道內(nèi)的有毒物質(zhì)侵入機(jī)體。本研究將NAFLD患者與健康人群的糞便涂片進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)分類，并進(jìn)行分析對(duì)比，結(jié)果顯示，治療前NAFLD組G+桿菌占腸道菌群的百分比例少于對(duì)照組，G-桿菌、G+球菌及G-球菌占腸道菌群的百分比例均多于對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），該結(jié)果與國內(nèi)已發(fā)表的研究結(jié)果相符合[15-16]，說明腸道菌群失調(diào)是NAFLD發(fā)生發(fā)展的原因之一。

生活方式干預(yù)和藥物治療為目前NAFLD治療的兩個(gè)主要手段，但是生活干預(yù)方式發(fā)揮作用相對(duì)比較緩慢，而且僅適用于早期輕癥患者，大多數(shù)患者往往還需要給予藥物干預(yù)治療[17]。近年來，腸道益生菌以其價(jià)格低廉、療效明顯、副作用少的特點(diǎn)，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于NAFLD的治療。本研究所采用的復(fù)合乳酸菌膠囊是一種含有乳酸桿菌、嗜乳酸桿菌和乳酸鏈球菌三種活乳酸菌的復(fù)合益生菌，能在腸內(nèi)繁殖，產(chǎn)生乳酸，通過制造腸道內(nèi)局部缺氧環(huán)境，抑制腸道內(nèi)腐敗細(xì)菌的繁殖，同時(shí)促進(jìn)雙歧桿菌等有益菌的生長(zhǎng)，恢復(fù)正常腸道菌群的比例。本研究結(jié)果顯示，治療后，A組G+桿菌占腸道菌群的百分比例多于治療前和B組，G+球菌占腸道菌群的百分比例少于治療前，G-球菌占腸道菌群的百分比例少于B組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；B組治療前后腸道菌群檢測(cè)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果說明，服藥8周后，腸道菌群中有益菌數(shù)量相比空白對(duì)照組有明顯的增加，也驗(yàn)證了復(fù)合乳酸菌膠囊對(duì)于NAFLD患者腸道菌群失調(diào)有一定的治療作用。

NAFLD患者早期的臨床癥狀及體征往往不太明顯，但隨著病程的發(fā)展則可以出現(xiàn)肝功能、血脂等指標(biāo)的異常改變。高血脂會(huì)對(duì)肝臟，甚至心腦血管方面造成嚴(yán)重的危害，因此，NAFLD治療的其中一個(gè)目標(biāo)就是有效地控制血脂水平。腸道益生菌通過與膽固醇相結(jié)合的方式，抑制其吸收入血；還能產(chǎn)生膽鹽水解酶，干擾膽汁酸的肝腸循環(huán)，促進(jìn)其從體內(nèi)排泄，從而增加合成膽汁酸所需膽固醇的數(shù)量，其結(jié)果是增加了體內(nèi)膽固醇的消耗量，降低了血清膽固醇水平[18-20]，改善了高血脂情況。本研究結(jié)果顯示，治療后，A組TG、TC水平均低于治療前、B組（P＜0.05），但B組治療前后TG、TC水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

綜上所述，復(fù)合乳酸菌膠囊能夠調(diào)節(jié)NAFLD患者腸道菌群失調(diào)情況，改善其血脂水平，具有預(yù)防和治療NAFLD的作用。該研究中對(duì)于腸道菌群的分類采取的是一個(gè)涂片革蘭氏染色分類計(jì)數(shù)法，如果在檢驗(yàn)條件支持的前提下，對(duì)腸道菌群做針對(duì)性的培養(yǎng)分類，則其結(jié)果會(huì)更具有臨床意義。