熊本華 諶倫富 陳 林 成國濤談文輝 唐亞軍 柴春利 杜華茂

(1. 重慶市蠶業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院 重慶 400700， 2. 西南大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院 重慶 400716)

蠶桑生產(chǎn)中消毒防病主要通過貫徹桑園管理，蠶前、蠶中、蠶后消毒等技術(shù)措施來實(shí)現(xiàn)養(yǎng)蠶無病高產(chǎn)的目標(biāo)，目前消毒使用最多的是漂白粉、硫磺、甲醛、石灰，然而以上消毒藥品存在如下弊端：漂白粉的強(qiáng)氧化性、腐蝕性會加快養(yǎng)蠶設(shè)施設(shè)備及蠶室的損壞速度，同時(shí)使用過程中產(chǎn)生的揮發(fā)性氯嚴(yán)重危害操作人員健康；硫磺在使用中產(chǎn)生的刺激性氣味對人的呼吸系統(tǒng)會產(chǎn)生嚴(yán)重影響，它還屬于公安部管控藥品；石灰在使用過程中產(chǎn)生揚(yáng)塵，極易吸入，危害健康。甲醛的毒害作用是眾所周知。蠶業(yè)科研生產(chǎn)單位、蠶業(yè)工作人員、特別是廣大蠶農(nóng)迫切需求無毒、優(yōu)質(zhì)的消毒替代產(chǎn)品。為此，重慶市蠶業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院與西南大學(xué)合作，探討納米銀在蠶業(yè)制種過程中的消毒防病作用，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間及地點(diǎn)

2017年春季(5-6月): 重慶市蠶業(yè)科學(xué)研究院第九蠶室。

2017年晚秋(9-10月): 合川原蠶基地，蠶桑專業(yè)合作社。

1.2 試驗(yàn)環(huán)境條件

蠶室蠶前消毒：用1%的漂白粉液浸泡蠶具并對蠶室及環(huán)境噴撒消毒；蠶具及蠶室用2%甲醛、硫磺熏煙消毒。對環(huán)境抽樣鏡檢，無微粒子孢子檢出算消毒合格。所有消毒工作在收蟻前7d完成。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

春季：以871，872為試驗(yàn)蠶種，每組10區(qū)。對照組是按常規(guī)消毒法，即桑葉用0.33%漂白粉浸洗(1-4齡)并脫水，蠶房每天用1%漂白粉液進(jìn)行地面噴霧消毒，蠶體每天用石灰消毒。試驗(yàn)組僅用納米銀進(jìn)行桑葉葉面噴霧消毒，每10kg桑葉噴1L納米銀膠體溶液(20mg/L),地面噴霧相同濃度的納米銀，每天一次，入眠時(shí)用焦糠除濕。

晚秋：以871、872為試驗(yàn)蠶種，對照組和試驗(yàn)組各20張?jiān)N。消毒方法與春季相同。

1.4 調(diào)查內(nèi)容

春季：全齡經(jīng)過、飼養(yǎng)及制種成績、病蛾率檢疫。

秋季：公斤繭顆粒數(shù)、飼養(yǎng)及制種成績、病蛾率檢疫。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 春蠶全齡經(jīng)過

2017年春季是首次用納米銀進(jìn)行田間消毒試驗(yàn)，嚴(yán)格考查了消毒劑對家蠶齡期的影響(見表1)。調(diào)查結(jié)果顯示，872的試驗(yàn)組在小蠶階段(1-3齡)延長了52h，而在大蠶階段(4-5齡)縮短了12h；871的試驗(yàn)組在小蠶階段延長了72h，在大蠶階段縮短了32h。這種情況在早期的小規(guī)模實(shí)驗(yàn)室添飼實(shí)驗(yàn)中沒有出現(xiàn)，通過現(xiàn)場技術(shù)分析，主要原因是蟻蠶期飼養(yǎng)人員噴霧納米銀膠體溶液時(shí)劑量偏大，且噴霧后桑葉沒有充分干燥，嚴(yán)重影響了蟻蠶發(fā)育和全齡經(jīng)過。及時(shí)糾正后情況得到好轉(zhuǎn)。大蠶階段齡期縮短的原因還不明確。

表1 2017年春季試驗(yàn)各組蠶的齡期經(jīng)過時(shí)間

2.2 飼養(yǎng)與制種成績

春季試驗(yàn)飼養(yǎng)及制種成績從總體上來看，納米銀消毒組上比常規(guī)的漂白粉消毒組差，主要表現(xiàn)為兩個(gè)品種每公斤繭粒數(shù)分別增加了8.0%、11.0%，其中，872與此871的蛹重分別減輕了12.4%、4.0%；繭殼重分別減輕了15.3%、6.7%。就其原因可能是大蠶階段縮短了13-36h。納米銀消毒組的死籠率比漂白粉消毒組高0.5%-2.5%，但發(fā)蛾率都達(dá)到99.0%左右。綜合不良卵率與圈卵粒數(shù)，納米銀組依然略遜色于漂白粉組，872的正常卵數(shù)低1.0%，871的正常卵粒數(shù)低16.0% (見表2)。

表2 2017年春季飼養(yǎng)及制種成績

2017年秋季在養(yǎng)蠶專業(yè)戶進(jìn)行了規(guī)模放大的對比試驗(yàn)，每組20張蠶種。本次試驗(yàn)沒有發(fā)生齡期的影響，從結(jié)果來看，用兩種不同消毒方法所飼養(yǎng)家蠶的生產(chǎn)性指標(biāo)(包括公斤繭顆粒、健蛹率、繭層率、克蟻產(chǎn)繭量、公斤繭制種量等)無明顯差異(見表3)。

表3 2017年秋季飼養(yǎng)及制種成績

2.3 病蛾率檢疫

分別將春、秋季各組的蠶制種，對一代雜交種按NY/T327-1997進(jìn)行微粒子檢驗(yàn)，結(jié)果見表4。檢驗(yàn)結(jié)果顯示，春季在重慶市蠶業(yè)科學(xué)研究院第九蠶室飼養(yǎng)的兩個(gè)組蠶，制種后按22.2%抽樣(共74個(gè)集團(tuán))，沒有檢出病蛾。秋季在養(yǎng)蠶專業(yè)戶家飼養(yǎng)的蠶，制種后按12.2%抽樣(共81個(gè)集團(tuán))，分別檢出1、0、2、1個(gè)病蛾，但都小于NY/T327-1997規(guī)定的陽性域值3。所以，兩批試驗(yàn)中納米銀消毒防微合格。

表4 母蛾集團(tuán)檢疫情況

2 討論

納米銀是一種廣譜的抗微生物材料，近30年來，大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明它對人源和動(dòng)物源性細(xì)菌、真菌和病毒具有殺滅作用，特別是對耐藥性細(xì)菌的殺滅作用引起業(yè)界的關(guān)注。納米銀已被廣泛用于多種醫(yī)療植入性材料和燒傷敷料、包裝材料、電子及日用品等。近年來，有學(xué)者報(bào)道納米銀對家蠶多角體病毒、白僵菌、粘質(zhì)沙雷氏菌等有殺滅作用，本項(xiàng)目研究發(fā)現(xiàn)一定濃度的納米銀能抑制家蠶微粒子孢子出芽(另文報(bào)道)。因此萌生了將納米銀用于蠶業(yè)消毒，以替代對人和環(huán)境有較大影響的甲醛、硫磺、漂白粉等消毒劑。從實(shí)驗(yàn)室小規(guī)模飼養(yǎng)試驗(yàn)(結(jié)果未發(fā)表)及2017年春、秋兩季的試驗(yàn)結(jié)果可以看出，對桑葉葉面和蠶室地面進(jìn)行納米銀噴霧消毒，其防病效果接近目前廣泛應(yīng)用的消毒方法，但前者投入在消毒環(huán)節(jié)的勞動(dòng)量較少，且干凈輕松，無刺激性。除此以外，我們注意到納米銀消毒組公斤繭顆粒數(shù)增多，繭變小，這可能與5齡縮短有關(guān)，因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)室小試中并未出現(xiàn)該現(xiàn)象。兩組間發(fā)蛾率、圈卵粒數(shù)和不良卵率三個(gè)指標(biāo)因品種不同而表現(xiàn)不一致，暫不能分析其中原因，需要進(jìn)一步試驗(yàn)。

本次試驗(yàn)未用納米銀作大面積的蠶前、蠶后的蠶室、蠶具及外周環(huán)境的消毒試驗(yàn)，也沒有做詳細(xì)的納米銀消毒經(jīng)濟(jì)成本分析。從環(huán)評的角度還應(yīng)考慮納米銀在蠶沙中的蓄積量及處理辦法。因此，今后需要反復(fù)試驗(yàn)，在傳統(tǒng)蠶業(yè)消毒體系中整合上納米銀消毒環(huán)節(jié)，形成一個(gè)適合當(dāng)代環(huán)保要求的新的家蠶消毒技術(shù)體系。