李鵬宇，采 云，郗 科

艾滋病(AIDS)，又稱(chēng)獲得性免疫缺陷綜合征，主要是由艾滋病病毒(HIV)攻擊人體免疫系統(tǒng)而引起的[1]。近年來(lái)，我國(guó)艾滋病流行趨勢(shì)正處于上升階段，對(duì)部隊(duì)選取健康兵員，保證戰(zhàn)斗力提出了嚴(yán)峻的考驗(yàn)。為此部隊(duì)投入了大量的人力物力來(lái)對(duì)新兵進(jìn)行健康復(fù)檢工作，艾滋病的篩查就是其中非常重要的一項(xiàng)內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)室診斷HIV感染的常規(guī)手段是檢測(cè)HIV抗體，以往經(jīng)典的檢測(cè)方法是酶聯(lián)免疫法，隨著技術(shù)的發(fā)展，金標(biāo)法也逐漸被醫(yī)院和體檢中心等機(jī)構(gòu)應(yīng)用于HIV抗體篩查工作中。筆者對(duì)兩種方法檢測(cè)HIV抗體的結(jié)果進(jìn)行比較分析，以為新兵復(fù)檢工作提供可靠的檢驗(yàn)方法。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇武警某部2017年度新兵共9325例為檢測(cè)者，其中男9275例，女50例，年齡18～21歲，平均為18.9歲，檢測(cè)時(shí)間為2017年9—10月。收集檢測(cè)者3～5 ml靜脈血樣本，離心分離出血清備用。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 選用北京金豪公司的ELISA-雙抗原夾心法試劑，儀器為 Anthos2010型酶標(biāo)儀，全自動(dòng)洗板機(jī)，進(jìn)口10～200 μl規(guī)格的微量移液器，37 ℃水浴恒溫箱。金標(biāo)法采用廈門(mén)英科新創(chuàng)公司的HIV抗體膠體金免疫層析快速診斷試劑。

1.2.2 檢測(cè)方法 (1)酶聯(lián)免疫法：嚴(yán)格按照試劑盒中的操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè)，使用酶標(biāo)儀對(duì)樣品的吸光度(A)值進(jìn)行測(cè)量，并和所用試劑的臨界值(CUT OFF)進(jìn)行對(duì)比，使用比較得出的S/CO值對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷,所測(cè)定的A 值高于CO值則判斷為陽(yáng)性[2]。陽(yáng)性標(biāo)本排除溶血、血清分離不完全等干擾因素，單獨(dú)進(jìn)行復(fù)測(cè)，并采用手工洗板，判定標(biāo)準(zhǔn)不變。(2)金標(biāo)法嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)和判斷結(jié)果，初篩陽(yáng)性結(jié)果同樣排除干擾因素進(jìn)行復(fù)測(cè)，標(biāo)本不合格的重新抽血進(jìn)行檢測(cè)。用兩種方法分別對(duì)9325份標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)試人員有操作經(jīng)驗(yàn)并相對(duì)固定，試劑批號(hào)為同一批號(hào)。兩種方法復(fù)測(cè)后的陽(yáng)性標(biāo)本送上級(jí)確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行結(jié)果確認(rèn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.4 結(jié)果 酶聯(lián)免疫法初篩首次陽(yáng)性標(biāo)本為18例，出現(xiàn)假陽(yáng)性原因分別為洗板機(jī)清洗不徹底8例，嚴(yán)重溶血5例，血清分離不完全2例。初篩陽(yáng)性標(biāo)本排除干擾因素(重新抽血、離心徹底、手工洗板)在使用相同試劑的情況下進(jìn)行復(fù)檢，初篩陽(yáng)性率0.032%；金標(biāo)法首次初篩檢測(cè)出陽(yáng)性標(biāo)本10例，初篩陽(yáng)性率0.096%。兩種方法的篩查陽(yáng)性率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由表1可以看出，酶聯(lián)免疫法的初篩陽(yáng)性率較高，排除干擾后假陽(yáng)性率為0.021%(2/9325)，金標(biāo)法假陽(yáng)性率為0.086%(8/9325)，兩種方法對(duì)比，酶聯(lián)免疫法假陽(yáng)性率較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 9325例新兵酶聯(lián)免疫法和金標(biāo)法HIV抗體篩查結(jié)果 (n; %)

注：與金標(biāo)法相比，①P<0.05

2 討 論

新兵是一個(gè)特殊的群體，具有年輕，身體健康狀況普遍良好的特點(diǎn)，因此新兵的HIV抗體篩查既要保證檢測(cè)質(zhì)量、避免漏檢，又要減少經(jīng)濟(jì)消耗，選擇高效、高質(zhì)量的篩查手段尤為關(guān)鍵。

金標(biāo)法在進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)時(shí)，具有敏感性高、快捷、方便等優(yōu)點(diǎn)，不需要特殊的儀器設(shè)備，所以衛(wèi)生隊(duì)(所)的衛(wèi)生員經(jīng)簡(jiǎn)單培訓(xùn)就能熟練掌握，適用于平時(shí)小批量的標(biāo)本或遠(yuǎn)離體系醫(yī)院的偏遠(yuǎn)地區(qū)使用。不過(guò)金標(biāo)法也具有特異性低、假陽(yáng)性率高等缺點(diǎn)[3]。新兵入伍集訓(xùn)人員較集中，檢測(cè)量較大，這就對(duì)檢測(cè)方法的特異性和經(jīng)濟(jì)性提出較高的要求，因此金標(biāo)法不太適用于新兵的HIV抗體集中篩查。

酶聯(lián)免疫法的特異性及敏感性都相對(duì)金標(biāo)法要高，且試劑成本低，可以批量操作，通量較大，因此是新兵HIV抗體篩查的首選方法。本實(shí)驗(yàn)中我們選用的ELISA試劑為HIV三代試劑盒，主要檢測(cè)HIV(1+2)抗體。近年來(lái)，隨著HIV檢測(cè)技術(shù)的提高，ELISA方法的HIV四代試劑正逐漸取代HIV三代試劑，它能在同一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)同時(shí)檢測(cè)HIV(1+2)抗體與P24抗原[4]。HIV感染機(jī)體后，自身各種抗原隨著感染時(shí)間的延長(zhǎng)而先后出現(xiàn)，其中P24抗原為早期感染的檢測(cè)指標(biāo)。P24抗原是HIV的核心蛋白，主要特點(diǎn)在于急性感染的開(kāi)始階段其滴度相當(dāng)高，而且其出現(xiàn)早于特異性抗體[5]。比較第三代試劑，第四代試劑可以大大縮短窗口期，檢測(cè)時(shí)間提前了8～10 d。P24抗原檢測(cè)用于HIV感染的早期檢測(cè)和HIV新近感染的檢測(cè)都具有積極的意義[6,7]。酶聯(lián)免疫法也存在局限性，比如操作相對(duì)復(fù)雜，干擾因素多，需要各種儀器設(shè)備，且要求操作人員具有一定的專(zhuān)業(yè)技能等[8]。

針對(duì)上述問(wèn)題，我們總結(jié)出幾點(diǎn)處理措施：(1)制訂完整的操作規(guī)范，認(rèn)真對(duì)待工作中的每一個(gè)細(xì)節(jié)，保證高效率地完成檢測(cè)工作；(2)選擇靈敏度高、特異性好的三代乃至四代試劑，從而避免由于檢測(cè)中所用試劑的原因造成假陽(yáng)性結(jié)果和窗口期漏檢的發(fā)生；(3)先期對(duì)工作人員進(jìn)行培訓(xùn)，以保證采集血液樣本的合格率，標(biāo)本處理流程的科學(xué)性，完善試驗(yàn)條件的同一性，最大限度地提高實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確率、減少假陽(yáng)性率。