文│陶家樹(shù)（山東省畜牧獸醫(yī)信息中心）

張淑二（山東省畜牧總站）

劉云峰 程堯（山東省青島市即墨區(qū)農(nóng)業(yè)局）

7月23日，筆者跟隨中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)以及山東畜牧總站的專家領(lǐng)導(dǎo)，前往山東省嘉祥縣濟(jì)寧東三大蒲蓮豬原種場(chǎng)，對(duì)國(guó)內(nèi)首次將克隆技術(shù)用于動(dòng)物遺傳資源保護(hù)以及此次成功克隆三頭大蒲蓮豬進(jìn)行調(diào)研。

1.普通豬與克隆豬的區(qū)別。山東農(nóng)業(yè)大學(xué)教授姜運(yùn)良介紹：和別的豬沒(méi)有差別說(shuō)明克隆的成功，現(xiàn)在這三頭克隆大蒲蓮豬已健康生長(zhǎng)2個(gè)多月，體型外貌符合大蒲蓮豬特征，體重、體長(zhǎng)等各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)正常。這是我國(guó)首次利用克隆技術(shù)進(jìn)行動(dòng)物遺傳資源保護(hù)，三頭克隆大蒲蓮豬的誕生，標(biāo)志著我國(guó)采用克隆技術(shù)實(shí)施種質(zhì)資源保護(hù)的初步成功，后期還將開(kāi)展繁殖對(duì)比試驗(yàn)，成功后不僅可以豐富地方豬品種改良以及地方優(yōu)良豬種保種的技術(shù)，也將對(duì)優(yōu)良畜種培育保護(hù)具有重大意義。

2.克隆技術(shù)早已成熟，大蒲蓮豬依然成為焦點(diǎn)。中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)教授趙興波介紹：自1997年克隆羊多利在英國(guó)誕生，隨后，牛、豬、馬、犬等相繼克隆成功，時(shí)至今日，已有超過(guò)20種哺乳動(dòng)物的克隆由全球多個(gè)生物醫(yī)學(xué)機(jī)構(gòu)相繼實(shí)現(xiàn)。2005年8月5日，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)成功獲得我國(guó)第一頭體細(xì)胞克隆豬，克隆技術(shù)已相當(dāng)成熟，但以前的克隆豬重點(diǎn)是應(yīng)用于人類器官移植的醫(yī)學(xué)研究，此次克隆大蒲蓮豬的成功，是我國(guó)第一次在養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行克隆，標(biāo)志著克隆技術(shù)走出實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)向了產(chǎn)業(yè)發(fā)展、轉(zhuǎn)向了生產(chǎn)普及。

3.克隆大蒲蓮豬對(duì)地方品種資源的保護(hù)意義。山東省畜牧總站副站長(zhǎng)劉展生介紹：目前，山東省經(jīng)認(rèn)定的37個(gè)地方畜禽品種，其中有大蒲蓮豬、萊蕪豬、里岔黑豬、煙臺(tái)黑豬、五蓮黑豬、沂蒙黑豬6個(gè)品種。37個(gè)地方畜禽品種是祖先留給我們的寶貴財(cái)富，也將在保持畜禽物種生態(tài)多樣性、地方特色畜產(chǎn)品開(kāi)發(fā)與動(dòng)物種質(zhì)資源可持續(xù)利用及歷史文化傳承中，起到舉足輕重的作用。但是伴隨經(jīng)濟(jì)生活水平的提高，現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方式已替代傳統(tǒng)生產(chǎn)方式，加之國(guó)外品種的引進(jìn)沖擊、生態(tài)環(huán)境變化和保護(hù)意識(shí)欠缺，商品性能較低的地方畜禽品種逐漸被淘汰，地方畜禽品種數(shù)量銳減，處于瀕危狀況，甚至滅絕。山東省已有榮成元寶雞、沾化黑豬等6個(gè)品種滅絕；糝糠雞、蒙山牛、大尾寒羊等5個(gè)品種瀕臨滅絕。所以實(shí)施地方品種資源的保護(hù)任務(wù)重大而艱巨。

近年來(lái)，國(guó)家和山東省持續(xù)推進(jìn)畜禽遺傳資源保護(hù)與利用，政策法規(guī)支撐體系逐步健全，資源保護(hù)能力明顯增強(qiáng)，省里推行了保種場(chǎng)活體保種和遺傳材料保種。此次克隆豬在全省尚屬首例，是全省在畜禽遺傳資源保護(hù)上做出的新探索。

4.克隆大蒲蓮豬主要的技術(shù)路線。趙興波介紹：此次研究的主要路線分為三個(gè)階段，一是大蒲蓮豬胎兒成纖維細(xì)胞的構(gòu)建、體細(xì)胞克隆和胚胎移植。具體先在濟(jì)寧東三大蒲蓮豬原種場(chǎng)選取純種大蒲蓮公豬與母豬配種后，待母豬妊娠35日齡時(shí)，取大蒲蓮豬胚胎，構(gòu)建純種大蒲蓮豬胎兒成纖維細(xì)胞。二是將細(xì)胞通過(guò)性別鑒定，選擇一個(gè)雌性胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)。三是將大蒲蓮豬的胎兒成纖維細(xì)胞與去核的卵母細(xì)胞融合為一個(gè)細(xì)胞，將細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)后，在大蒲蓮豬場(chǎng)選擇了10頭二元雜交母豬進(jìn)行胚胎移植。5月14日晚8點(diǎn)，一頭代孕母豬產(chǎn)出了3頭大蒲蓮克隆豬。

姜運(yùn)良介紹：此次克隆具體實(shí)施中，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)主要負(fù)責(zé)體細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)和山東農(nóng)業(yè)大學(xué)一起負(fù)責(zé)胎兒成纖維細(xì)胞的構(gòu)建、胚胎移植實(shí)驗(yàn)，濟(jì)寧東三大蒲蓮豬原種場(chǎng)主要負(fù)責(zé)豬只的配種工作、代孕母豬和克隆豬的飼養(yǎng)與指標(biāo)檢測(cè)。