劉庭琨，普茺蔚，李學(xué)興

（云南省玉溪市食品藥品檢驗所，云南 玉溪 653100）

0 引言

微生物檢驗是食品藥品檢驗過程的重要環(huán)節(jié)，微生物檢驗結(jié)果受很多因素的影響，為保證實驗室操作環(huán)境的穩(wěn)定性、檢驗過程的快捷性、檢驗結(jié)果的有效性、可靠性和準(zhǔn)確性，避免偏差的產(chǎn)生，須對微生物潔凈實驗室進(jìn)行科學(xué)的監(jiān)測、合理的驗證，對潔凈實驗室進(jìn)行微生物監(jiān)測和質(zhì)量控制，使受控環(huán)境維持可接受的風(fēng)險水平[1]?，F(xiàn)就如何對微生物潔凈實驗室進(jìn)行質(zhì)量控制做如下分析。

1 人員要求

實驗人員應(yīng)接受無菌操作、培養(yǎng)基制備、消毒、滅菌、注平板、菌落計數(shù)、菌種的轉(zhuǎn)種、傳代和保藏、微生物檢查方法和鑒定技術(shù)、生物安全等培訓(xùn)，經(jīng)考核合格方可上崗，并接受繼續(xù)教育。檢驗人員所有操作須遵守操作規(guī)程和操作規(guī)范的要求。

2 潔凈實驗室參數(shù)確認(rèn)

定期進(jìn)行空氣懸浮粒子、浮游菌和沉降菌、關(guān)鍵檢測臺面、人員操作服表面及五指手套的監(jiān)測。每2年檢測高效空氣過濾器的完整性；每2年監(jiān)測單向流氣流組織；每年監(jiān)測A級平均風(fēng)速：設(shè)備 0.25～0.50m/s，設(shè)施 0.36～0.54m/s；每年監(jiān)測B級單向流平均風(fēng)速：0.25～0.50m/s；每年監(jiān)測B級、C級、D級換氣次數(shù)；每周監(jiān)測一次壓差：潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間壓差不小于10Pa，不同級別潔凈區(qū)之間的壓差不小于10Pa；每周監(jiān)測照度＞300lx、噪音≤65dB；每次實驗監(jiān)測溫度：18～26℃、相對濕度：45%～65%。

3 監(jiān)測方法

懸浮粒子的監(jiān)測按照《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法》[2]的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；沉降菌的監(jiān)測按照《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法》[3]的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；浮游菌的監(jiān)測按照《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法》[4]的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；表面微生物用接觸碟法和擦拭法進(jìn)行監(jiān)測。

4 監(jiān)測項目及監(jiān)測頻次

A級空氣懸浮粒子每季度一次、浮游菌每月一次、沉降菌及表面微生物每次實驗進(jìn)行監(jiān)測；B級空氣懸浮粒子每半年一次、浮游菌每季度一次、沉降菌及表面微生物每周一次，進(jìn)行監(jiān)測：C級空氣懸浮粒子每半年一次、浮游菌每半年一次、沉降菌及表面微生物每季度一次進(jìn)行監(jiān)測；D級空氣懸浮粒子、浮游菌、沉降菌及表面微生物均為每半年一次進(jìn)行監(jiān)測。

5 監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)

見表1、表2。

表1 各潔凈級別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)

表2 各潔凈級別環(huán)境微生物監(jiān)測的動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)

6 警戒限和糾偏限

微生物潔凈實驗室根據(jù)不同潔凈區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn)，制定微生物監(jiān)測警戒限和糾偏限。A級環(huán)境應(yīng)無微生物污染。

7 偏差處理

當(dāng)微生物監(jiān)測結(jié)果超出糾偏限度時，應(yīng)當(dāng)按照偏差處理規(guī)程進(jìn)行報告、記錄、調(diào)查、處理以及采取糾正措施，并對糾正措施的有效性進(jìn)行評估。

8 微生物潔凈實驗室

所使用的儀器和設(shè)備須經(jīng)撿定或校準(zhǔn)合格，有狀態(tài)標(biāo)識。儀器和設(shè)備建立操作規(guī)程、使用記錄和監(jiān)控記錄。并長期進(jìn)行使用監(jiān)測、維護(hù)和保養(yǎng)。

所使用的培養(yǎng)基須經(jīng)適用性檢查、pH值檢查合格，定期進(jìn)行穩(wěn)定性檢查，并按標(biāo)準(zhǔn)制備、貯藏[5-7]。培養(yǎng)基應(yīng)采用經(jīng)驗證的滅菌程序滅菌。潔凈實驗室環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基采用終端滅菌，在使用前進(jìn)行100%預(yù)培養(yǎng)。

微生物潔凈實驗室在使用前和使用后應(yīng)進(jìn)行消毒，所使用的清潔劑和消毒劑既能殺死廣泛的微生物、無毒害、無腐蝕性，又應(yīng)性能穩(wěn)定、作用快、殘留少。定期更換消毒劑以防止產(chǎn)生耐受菌株。A級和B級潔凈區(qū)使用無菌或經(jīng)無菌處理的消毒劑和清潔劑。所使用的紫外消毒燈管應(yīng)定期監(jiān)測輻射強(qiáng)度，輻射強(qiáng)度不合格的燈管及時更換[8-9]。

微生物潔凈實驗室每次使用前潔凈服須清洗、滅菌，工鞋須消毒，防止對實驗室造成污染[10]。

9 陽性對照室和生物安全柜

若有帶菌培養(yǎng)物溢出，必須就地處理，不能使帶菌培養(yǎng)物污染擴(kuò)散。所有帶菌物須滅菌。

生物安全柜和層流超凈工作臺應(yīng)符合安全要求，由有資質(zhì)的人員進(jìn)行安裝及配件的更換，并定期進(jìn)行再驗證。

為維持微生物潔凈實驗室環(huán)境的穩(wěn)定性，應(yīng)減少人員干預(yù)，減少人和物品的移動，減少人員干預(yù)比監(jiān)測更有效。

10 結(jié)語

做好微生物潔凈實驗室的質(zhì)量控制是保證實驗室良好運行，保證微生物檢驗有效、可靠、準(zhǔn)確、快捷的前提和條件，微生物潔凈實驗室的質(zhì)量控制應(yīng)是一長期、持續(xù)的過程，我們應(yīng)為之不懈努力，持之以恒。實驗室全體人員應(yīng)遵守操作規(guī)程和操作規(guī)范、不斷提升檢驗技術(shù)和操作能力，切實做好質(zhì)量控制。