李銳，袁玉偉，錢鳴蓉，肖英平，汪建妹，吉小鳳

(浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所，浙江 杭州 310021)

我國是世界第一養(yǎng)蜂大國，也是世界最大的蜂蜜生產(chǎn)國和出口國，蜂蜜產(chǎn)量約占世界蜂蜜總產(chǎn)量的1/4[1]。浙江省是全國的蜂業(yè)大省，全省養(yǎng)蜂110萬群左右，年產(chǎn)蜂蜜8萬t，產(chǎn)值超過13億元，全省通過QS認(rèn)證的企業(yè)86家[2]。在不良環(huán)境中，蜜蜂容易受到細(xì)菌、病毒、真菌等致病性因素的侵襲，繼而發(fā)生美洲腐臭病、歐洲腐臭病、孢子蟲病、蜂螨等[3]。蜂農(nóng)超劑量、超范圍、甚至使用禁用抗生素來預(yù)防和控制蜂病，可能導(dǎo)致蜂蜜中殘留禁、限用藥物，對(duì)消費(fèi)者的健康帶來風(fēng)險(xiǎn)[4]。目前，蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全問題已經(jīng)成為制約我國蜂產(chǎn)業(yè)發(fā)展和轉(zhuǎn)型升級(jí)的主要因素。本研究對(duì)影響浙江省蜂蜜質(zhì)量安全的風(fēng)險(xiǎn)隱患進(jìn)行調(diào)查和分析，明確浙江省蜂蜜存在的主要風(fēng)險(xiǎn)因子，為制定蜂蜜質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)管控措施提供了支撐。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

根據(jù)浙江省蜂蜜主產(chǎn)區(qū)蜂群規(guī)模、氣候以及蜜源植物分布特點(diǎn)，從生產(chǎn)基地、專賣店和超市共計(jì)抽取125批次蜂蜜樣品作為檢測(cè)和評(píng)估材料(表1)，并開展實(shí)地調(diào)研，探究影響蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全的風(fēng)險(xiǎn)隱患。

表1 檢測(cè)樣品的種類及數(shù)量

1.2 主要儀器與試劑

Ultimate-TSQ Quantum Discovery質(zhì)譜儀，BIOFUGE PRIMOR型高速離心機(jī)購自美國賽默飛世爾科技公司；BS2202S型電子天平購自德國賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；TALBOYS230 V渦旋混合器購自美國Troemner公司；MTN-2800D型氮吹儀購自天津奧特賽恩斯儀器有限公司。

氟喹諾酮類、硝基咪唑類、氯霉素類、四環(huán)素類、磺胺類、鏈霉素、黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)品(純度>99.9%)購自美國Sigam-aldrich公司；同位素內(nèi)標(biāo)NOR-D5(純度≥98%)、DMZ-D3、IPZOH-D3、HMMNI-D3(純度≥98%)；甲醇、乙腈、甲酸(色譜純)、氫氧化鈉、乙酸銨、乙酸乙酯、檸檬酸、乙二胺四乙酸二鈉、草酸、磷酸二氫鈉、庚烷磺酸鈉均為分析純。

1.3 檢測(cè)方法

蜂蜜中氟喹諾酮類藥物(吡哌酸、馬波沙星、氟羅沙星、伊諾沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、培氟沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、丹氟沙星、奧比沙星、恩諾沙星、雙氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、西諾沙星、噁喹酸、氟甲喹、萘啶酸)殘留檢出方法參照GB/T 23412—2009，硝基咪唑類藥物(甲硝唑代謝物、二甲硝咪唑代謝物、甲硝唑、二甲硝咪唑、異丙硝唑代謝物、異丙硝唑、洛硝噠唑)殘留檢測(cè)方法參照GB/T 23410—2009，氯霉素殘留檢出方法參照GB/T 18932.19—2003，四環(huán)素類藥物(土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素)殘留檢出方法參照GB/T18932.4—2002，磺胺類藥物(磺胺甲噻二唑、磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺吡啶、磺胺二甲異噁唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺氯噠嗪、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺鄰二甲氧嘧啶、磺胺甲基異噁唑、磺胺噻唑、磺胺甲氧噠嗪、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺苯吡唑)殘留檢測(cè)方法參照GB/T 18932.17—2003，鏈霉素殘留檢出方法參照GB/T 22995—2008，生物毒素(黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2)殘留檢測(cè)方法參照SN/T 1736—2006，氟胺氰菊酯殘留檢測(cè)方法參照農(nóng)業(yè)部781號(hào)公告-7-2006，氟氯苯氰菊酯殘留方法參照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部781號(hào)公告-7-2006，蜂蜜中雙甲脒殘留檢測(cè)方法參照GB/T 23200.103—2016。

2 結(jié)果與分析

2.1 殺螨劑殘留

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，蜂農(nóng)使用的蜂藥主要是化學(xué)消毒劑(甲酸、苯扎溴銨，升華硫)、殺螨劑(氟胺氰菊酯、氟氯苯氰菊酯和雙甲脒)、中草藥制劑等，共計(jì)24種。其中20種為殺螨劑，1種為殺菌抗病毒藥，1種治療孢子蟲病，1種環(huán)境消毒劑，1種為改善蜜蜂腸道營養(yǎng)的微生態(tài)制劑，殺螨劑占全部蜂藥種類的83.3%，長期使用能夠增加蜂螨抗性，蜂農(nóng)超劑量使用藥劑可能導(dǎo)致蜂產(chǎn)品污染。依據(jù)國內(nèi)外蜂產(chǎn)品藥物殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，氟氰胺菊酯限量標(biāo)準(zhǔn)為0.05 mg·kg-1，氟氯苯氰菊為限量標(biāo)準(zhǔn)為0.01 mg·kg-1，雙甲脒限量標(biāo)準(zhǔn)0.01 mg·kg-1，其他種類的化學(xué)物尚無限量標(biāo)準(zhǔn)[5]。在國家批準(zhǔn)登記使用的藥物中，殺螨劑(氟氰胺菊酯、氟氯苯氰菊酯和雙甲脒)是影響蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全的主要風(fēng)險(xiǎn)因子。分析結(jié)果表明，蜂蜜樣品中殺螨劑氰胺菊酯檢出率為0.8%，檢出值為0.008 mg·kg-1，低于國家殘留限量標(biāo)準(zhǔn)(0.05 mg·kg-1)。其他殺螨劑均未檢出，殺螨劑對(duì)我省蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全造成的風(fēng)險(xiǎn)較低。

2.2 抗生素殘留

由于我國蜂藥研究滯后，低毒低殘留的新產(chǎn)品匱乏，不能滿足產(chǎn)業(yè)需求，迫使蜂農(nóng)使用尚未在蜜蜂上登記的蜂藥，甚至一些土方、偏方，這些尚未登記使用的藥物包括人用、獸用藥物和明確禁止使用的高風(fēng)險(xiǎn)藥物[6]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2016年浙江省蜂蜜中抗生素檢出率為18.2%，2017年蜂蜜中抗生素檢出率為12.3%，抗生素總體殘留檢出率為16.8%。蜂蜜中共檢出10種抗生素藥物，分別屬于氟喹諾酮類、硝基咪唑類、磺胺類、氯霉素、四環(huán)素、磺胺類6大類(圖1)。蜂蜜樣品中環(huán)丙沙星檢出率最高，為13.6%，其他抗生素依次為二甲硝咪唑(2.4%)、甲硝唑代謝物(1.6%)、洛美沙星(1.6%)，余下藥物檢出率均為0.8%。氟喹諾酮類藥物檢出率為15.2%，硝基咪唑類藥物總體檢出率為3.2%，磺胺類藥物檢出率為1.6%。在21個(gè)檢出藥物的蜂蜜中，其中有7個(gè)含有2個(gè)或2個(gè)以上的藥物，最多含有4種藥物。

圖1 蜂蜜中抗生素的檢出率

調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，油菜蜜中抗生素的檢出率為9.6%，顯著高于百花蜜(3.2%)、洋槐蜜(2.4%)、柑橘蜜(1.6%)和枇杷蜜(0.8%)。油菜是蜜蜂第一次采蜜的大宗蜜源植物，油菜蜜中抗生素檢出率偏高的原因在于部分蜂農(nóng)在春繁時(shí)候使用抗生素預(yù)防蜂病，抗生素殘留在巢脾中而影響油菜蜜的質(zhì)量安全。生產(chǎn)基地蜂蜜抗生素檢出率為13.3%，顯著高于專賣店(3.2%)和超市(0.8%)，蜂農(nóng)生產(chǎn)的蜂蜜運(yùn)送到加工企業(yè)，往往受到嚴(yán)格檢測(cè)，因而蜂蜜中抗生素殘留的問題能夠得到一定程度的控制。比較而言，流通環(huán)節(jié)中的蜂蜜抗生素殘留水平低于生產(chǎn)基地，質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)較低。

2.3 微生物和生物毒素污染

蜂蜜在運(yùn)輸、存儲(chǔ)和加工過程中可能被加工設(shè)備、操作人員、包裝容器、昆蟲、動(dòng)物、空氣、水、墻壁、天花板等微生物污染等。蜂蜜具有高滲透壓、低pH值、存在抗菌活性物質(zhì)等特性，不利于細(xì)菌的生長繁殖，因此蜂蜜中微生物超標(biāo)的狀況極少發(fā)生[7]。隨機(jī)抽取20個(gè)的蜂蜜樣品，開展食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)(蜂蜜)中規(guī)定菌落總數(shù)、大腸菌群、致病菌(沙門菌、志賀菌、金黃色葡萄球菌)和霉菌的檢測(cè)，致病菌均未檢出，菌落總數(shù)、大腸菌群和霉菌都符合國家限量標(biāo)準(zhǔn)，有3個(gè)蜂蜜樣品中嗜滲酵母檢測(cè)結(jié)果分別為2 000、1 000、500 CFU·g-1，超過國家限量標(biāo)準(zhǔn)(200 CFU·g-1)。本研究與文獻(xiàn)報(bào)道中蜂蜜微生物污染檢測(cè)結(jié)果類似，蜂蜜中嗜滲酵母應(yīng)當(dāng)進(jìn)行有效的控制[8]。嗜滲酵母主要在蜂蜜采集、生產(chǎn)加工等過程中產(chǎn)生，其含量與蜂蜜發(fā)酵程度相關(guān)，嗜滲酵母超標(biāo)會(huì)影響蜂蜜的品質(zhì)，但并沒有相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道嗜滲酵母會(huì)產(chǎn)生對(duì)人體有害的毒素類物質(zhì)。

生物毒素是農(nóng)產(chǎn)品及其制品的一種重要污染物，在我國長江沿岸及長江以南等高溫高濕地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品中生物毒素污染嚴(yán)重，具有污染蜂產(chǎn)品的可能性[9]。本研究也開展了蜂產(chǎn)品中生物毒素驗(yàn)證分析工作。結(jié)果表明，在所有蜂蜜和蜂花粉中尚未檢出任何黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2。目前蜂產(chǎn)品中微生物和生物毒素污染可能較小，國內(nèi)外鮮有蜂產(chǎn)品中污染微生物和生物毒素的報(bào)道。

3 討論

蜂病防治是蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全隱患產(chǎn)生的主要根源，通過對(duì)麗水地區(qū)、桐廬縣、江山市等地78家生產(chǎn)基地調(diào)研和風(fēng)險(xiǎn)排查發(fā)現(xiàn)，我省養(yǎng)蜂業(yè)普遍發(fā)生的蜜蜂疾病有螨病、白堊病、孢子蟲病、爬蜂病、囊狀幼蟲病、美洲幼蟲腐臭病、歐洲幼蟲腐臭病等。由于蜂農(nóng)的用藥習(xí)慣、認(rèn)知偏差和經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)使，部分蜂農(nóng)使用違禁藥物和未批準(zhǔn)使用的藥物進(jìn)行預(yù)防和治療細(xì)菌性、病毒性和真菌性疾病，以及使用甲硝唑治療孢子蟲病等，蜂病防治用藥是引起蜂產(chǎn)品安全隱患的主要根源。

目前我國批準(zhǔn)使用的蜂藥數(shù)量較少，尤其抗生素類蜂藥僅有土霉素和紅霉素2種。甲硝唑和氯霉素為國家禁用蜂物，設(shè)定限量為不得檢出；磺胺類限量值為0.05 mg·kg-1；氟喹諾酮類尚未制定國家限量標(biāo)準(zhǔn)，國外限量標(biāo)準(zhǔn)為0.01 mg·kg-1；土霉素類國家限量標(biāo)準(zhǔn)為0.05 mg·kg-1[5]。減少和消除這些尚未登記藥物的使用，成為蜂產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)管控的關(guān)鍵控制點(diǎn)。

由于我國蜜源植物生長的環(huán)境、水源被重金屬污染，蜂蜜中會(huì)不同程度出現(xiàn)重金屬殘留[10]，例如油菜對(duì)鎘、鉻、銅均具有不同的富集效應(yīng)，報(bào)道在個(gè)別蜂蜜中能夠檢出極微量的重金屬殘留，但遠(yuǎn)低于國家限量標(biāo)準(zhǔn)(1.0 mg·kg-1)，環(huán)境中重金屬遷移對(duì)蜂蜜造成的污染水平極低。

浙江省連續(xù)兩年蜂蜜質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)排查和驗(yàn)證結(jié)果顯示，依據(jù)我國現(xiàn)有的蜂蜜中藥物殘留判定標(biāo)準(zhǔn)，浙江省蜂蜜產(chǎn)品合格率超過96%，質(zhì)量安全水平較高。為了進(jìn)一步提升浙江省蜂蜜產(chǎn)品質(zhì)量安全水平，仍需深入查明蜂蜜中抗生素殘留根源和成因，包括蜂農(nóng)防治蜂病使用、蜂藥中抗生素隱形添加、老舊巢脾中藥物殘留、蜂蠟中藥物殘留，以及環(huán)境因素中抗生素污染等原因。