■ 文｜東莞市長安鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術服務中心 陳智光 麥耀寶

東莞市水生動物防疫檢疫站 李本旺 黃永強 陳灼均

筍殼魚暴發(fā)傳染性脾腎壞死病毒病的病原為傳染性脾腎壞死病毒（Infectious spleen and kidney necrosis virus，ISKNV）。自從1997年首次從鱖魚上發(fā)現(xiàn)報道 ISKNV以來，該病已經(jīng)在中國大部分的地方被確診，同時在筍殼魚、烏鱧、加州鱸等魚類上都發(fā)現(xiàn)了該病，對我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失。本文主要分析評估 ISKNV在筍殼魚上感染暴發(fā)的風險。

1.危害描述

1.1 病原

ISKNV屬于虹彩病毒科（Iridoviridae），是腫大病毒屬（Megalocytivirus）的代表種。虹彩病毒科是一類直徑為 120～300nm，呈正二十面體對稱結構，遺傳物質(zhì)為直線雙鏈DNA（大約 150～280kbp）的病毒。虹彩病毒可以感染昆蟲、兩棲類、魚類等無脊椎動物和脊椎動物。虹彩病毒粒子一般包括囊膜、衣殼和核心三個部分。付小哲等人通過對 33株不同宿主來源的腫大病毒的外膜蛋白進行同源性比對，發(fā)現(xiàn)腫大病毒可以分為 3個型，I型主要感染海水魚，II型主要感染淡水魚，III型主要感染鲆鰈類，ISKNV則分為Ⅰ型和Ⅱ型 2種基因型。

1.2 易感動物

ISKNV的宿主范圍廣泛，可以感染全世界范圍內(nèi)鱸形目、鳉形目、鯡形目、鲀形目、燈籠魚目、鯔形目和鰈形目等 50多種海水和淡水魚類。近年來，在日本、韓國、新加坡等亞洲國家，甚至在美國、德國、澳大利亞和加拿大等地的觀賞魚和養(yǎng)殖魚類中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了ISKNV的感染案例。

1.3 流行病學

1.3.1 歷史。1997年，吳淑勤等首次在患病的鱖魚中發(fā)現(xiàn)了傳染性脾腎壞死病毒病。1998年，何建國等證實了該病原為 ISKNV。國內(nèi)最早關于筍殼魚 ISKNV的報道是 2009年10月在順德一養(yǎng)殖場暴發(fā)了該病。

1.3.2 臨床癥狀和發(fā)病季節(jié)。感染 ISKNV的筍殼魚，主要表現(xiàn)為從池塘底層游至水面、游泳失衡、反應遲鈍、腹部膨大等；解剖可見脾臟和腎臟腫大，有出血斑點。ISKNV的致病性很強，在水溫20～32℃時，均可引起魚發(fā)病，水溫 28～30℃時致病性最強。試驗研究發(fā)現(xiàn)，在水溫 28℃時，經(jīng)過浸泡或注射感染 ISKNV的魚7～10d后的死亡率可達100%。

1.3.3 傳播方式。ISKNV主要通過水平傳播，一方面通過養(yǎng)殖水體，另一方面通過魚體（包括冰鮮）攜帶。此外，在魚卵上也可檢測到 ISKNV，可能可以進行垂直傳播，但尚未有研究報道。

1.3.4 危害。筍殼魚暴發(fā) ISKNV病的危害嚴重，死亡率最高可達 100%。東莞市這幾年雖然沒有大規(guī)模暴發(fā) ISKNV病，但是也出現(xiàn)了個別養(yǎng)殖場全軍覆沒的情況。2016-2017年，東莞市某養(yǎng)殖場因為投喂了感染 ISKNV的鯪魚，導致整個養(yǎng)殖場的筍殼魚陸續(xù)死亡。在東莞的周邊地區(qū)，如珠海、佛山等地，每年都有因為暴發(fā)ISKNV病而死亡慘重的案例。

1.4 檢測

ISKNV病原檢測是診斷該病害的重要手段，早期的病毒檢測主要通過組織學、細胞分離病原、電鏡觀察等。隨著人們對傳染性脾腎壞死病毒病的重視和分子生物技術的發(fā)展，近年來建立了多種 ISKNV的檢測方法。如 PCR檢測方法、隨機擴增多態(tài)性DNA標記檢測法、巢式PCR檢測法、熒光定量PCR快速檢測方法、環(huán)介導等溫擴增技術檢測方法、ELISA檢測方法等。

表1 不同風險因子的風險評估結果

1.5 防治

目前該病沒有可行的治療方法。國內(nèi)大學和研究機構正在研究鱖魚 ISKNV的疫苗，目前處于中試階段。但是還未見有關筍殼魚ISKNV疫苗的相關研究報道。

2.暴露評估

2.1 風險識別

本項目評估的是筍殼魚中 ISKNV的暴發(fā)風險，因此需要確定可能引入、留存與傳播 ISKNV的各種風險因素，并逐一評估這些因素的風險大小。根據(jù)文獻報道和實地調(diào)查，推測可能導致引入、留存與傳播 ISKNV的風險因素包括：苗種、敏感動物、餌料、污染的水、包裝物、運載工具、操作工具和接觸的人員等。

2.2 引入風險

本項目從筍殼魚苗種場的成魚和苗種上都檢測到了ISKNV，說明苗種可以攜帶ISKNV。因此，苗種引入病原的風險非常高。

草魚可以攜帶 ISKNV，但是不發(fā)病，鱖魚食用這些感染的草魚后發(fā)病死亡。到目前為止，筍殼魚的餌料主要以活餌料或者冰鮮為主，養(yǎng)殖戶使用的冰鮮或活餌料來源不明也沒有經(jīng)過病原檢測，引入ISKNV的風險很大。

水源也是一個引入 ISKNV的重要風險，通過實地調(diào)查，東莞市的筍殼魚養(yǎng)殖場除了洪梅地區(qū)比較集中，其他都比較分散。養(yǎng)殖戶在水源的引入方面的意識還比較高，雖然沒有進行檢測，但是不會在其他魚塘發(fā)病的時候抽水到自己的養(yǎng)殖場?？傮w來說東莞市從水源引入ISKNV的風險一般。

在包裝物、運載工具、操作工具和人員傳播途徑上，基本不會在不同養(yǎng)殖場間交叉使用工具，也不會在患病養(yǎng)殖場直接進行人員的交叉作業(yè)。但是在同一個養(yǎng)殖場的不同魚塘之間，這種交叉感染的風險還是比較大。

2.3 留存風險

檢測結果表明，ISKNV的攜帶率非常高，但是發(fā)病并不是非常嚴重。ISKNV引入筍殼魚養(yǎng)殖場后，長期處于潛伏感染的狀態(tài)，這會使養(yǎng)殖戶麻痹大意，疏于防范。如果某個養(yǎng)殖場因為感染ISKNV導致大規(guī)模死亡，那么他在進行下一次養(yǎng)殖時就會進行徹底的清塘消毒，以殺滅病原。但是只是攜帶 ISKNV的養(yǎng)殖場，在一個養(yǎng)殖周期結束后，很多沒有進行徹底的消毒，導致病原長期存留在養(yǎng)殖魚塘中的風險增加。

2.4 傳播風險

流行病學調(diào)查結果顯示，筍殼魚苗種標粗后，主要銷往其他地區(qū)進行成魚養(yǎng)殖，但是這些賣出的魚苗并沒有經(jīng)過檢測，可能導致病原傳播。發(fā)病魚塘的污水通常都沒有經(jīng)過處理就直接排放到河溝，極易將病原傳給其他養(yǎng)殖場。

3.風險描述

通過對上述幾種不同情況分別進行風險評估后發(fā)現(xiàn)，苗種、冰凍的易感魚類和用做鮮活餌料的易感魚類具有較高的傳入和發(fā)生風險（表1）。

4.風險管理

4.1 筍殼魚

堅決不從疫區(qū)引進親本、魚苗、魚種和魚卵。對引入的筍殼魚進行ISKNV病原檢測。收集死亡的筍殼魚進行病原檢測，確診發(fā)病原因，防止疫情擴散。研發(fā)筍殼魚IKSNV疫苗，進行免疫預防。

4.2 餌料

餌料包括冰鮮和鮮活的易感動物，對投入的餌料要進行 ISKNV病原檢測，杜絕從疫區(qū)購買這些易感動物。

4.3 水源、工具和藥物等

水源、工具和藥物等本身攜帶的病原數(shù)量很少，具有不確定性，因此更多的是要從管理上進行控制。不從疫區(qū)或者發(fā)病魚塘引入水源，對運輸用水、工具和包裝等采用常規(guī)消毒的強制措施，這樣就可將輸入 ISKNV的可能性降低到可以接受的水平。

5.結論

風險評估結果表明，ISKNV感染是一種對我國筍殼魚有嚴重危害的一種病毒病。綜合風險分析認為，傳入 ISKNV的主要威脅是來自疫區(qū)的活的筍殼魚，其次是鮮活易感動物和冰鮮易感動物。因此，首先要杜絕從疫區(qū)引入筍殼魚和易感動物，其次對于引進和購買的筍殼魚和餌料要進行檢疫。若發(fā)生 ISKNV病毒病要及時進行隔離處理，防止疫情擴散。對水源、工具等需要進行強制常規(guī)消毒。加強培訓，提高養(yǎng)殖戶的風險防控意識。