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[摘要] 目的 建立冰紅消腫膏的質(zhì)量標準。 方法 為保證冰紅消腫膏的質(zhì)量，本文對膏方進行了常規(guī)檢查，從定性方面進行了質(zhì)量標準研究。采用顯微的方法鑒別了方中紅花，采用薄層色譜法鑒別冰紅消腫膏處方中大黃、梔子、白芷等藥材。并同時進行了微生物以及重金屬檢查。 結果 紅花的顯微鑒別，操作方便，指向性好。大黃、梔子、白芷的薄層色譜斑點清晰，分離度好，陰性無干擾。微生物以及重金屬檢查均符合藥典標準。 結論 該實驗方法操作簡便，重現(xiàn)性好，結果準確可靠，可用于控制冰紅消腫膏的質(zhì)量。

[關鍵詞] 薄層色譜法；紅花；大黃；梔子；白芷

[中圖分類號] R285.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2018）12-0039-03

Study on the quality standard of binghongxiaozhong ointment

WANG Mingxi1 GUO Yong2 ZHANG Xumeng1 XING Jiazhen1

1.Department of Pharmacy， Beijing Daxing District Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine， Beijing 100076， China； 2.Department of Orthopedics and Traumatology， Beijing Daxing District Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine， Beijing 100076， China

[Abstract] Objective To establish the quality standard of binghongxiaozhong ointment. Methods To guarantee the quality of binghongxiaozhong ointment， routine tests were performed to evaluate the regimens of ointment and the study on quality standard were conducted by using qualitative methods. Micrography were conducted to distinguish the safflower in the regimen and thin layer chromatography（TLC） were conducted to distinguish the rheum officinale， cape jasmine and radix angelicae in the regimen of binghongxiaozhong ointment. The tests of microorganisms and heavy metal were taken as well. Results Micrography of safflower was easily operated and with good directivity. TLC of rheum officinale， cape jasmine and radix angelicae was spot-clear， with good separation and without interference of the negative. The results of microorganisms and heavy metal tests met the standard of pharmacopoeia. Conclusion The experimental method was easy-operated， reproducible and with accurate and reliable results.It could be used to control the quality of binghongxiaozhong ointment.

[Key words] Thin layer chromatography； Safflower； Rheum officinale； Cape jasmine； Radix angelicae

冰紅消腫膏是我院骨傷科經(jīng)驗方[1]，由紅花、大黃、梔子、白芷、當歸、透骨草、威靈仙、兒茶、薄荷、冰片等10味中藥組成的外用膏劑。組方中紅花，活血化瘀，通經(jīng)。大黃，涼血解毒，活血祛瘀。白芷，消腫排膿，止痛。當歸，活血止痛。威靈仙，通經(jīng)絡，止痹痛。鐵線透骨草，舒筋活絡，祛風勝濕，活血止痛，軟堅消痞。梔子，瀉火除煩、涼血解毒。白芷，消腫排膿、止痛。兒茶止血定痛，收濕斂瘡。薄荷辛，涼。冰片開竅醒神，清熱止痛，諸藥共奏祛風除濕、舒筋活血、活血止痛的功效。為了有效的控制該制劑的質(zhì)量，保證臨床用藥安全有效[2-4]，本次實驗建立了方中紅花的顯微鑒別，大黃、梔子、白芷等藥材的薄層色譜法（Thin layer chromatography，TLC）鑒別，并同時進行了微生物以及重金屬檢查，從而提高冰紅消腫膏膏的質(zhì)控水平。

1 資料與方法

1.1 儀器與材料

1.1.1 儀器 KQ500DB超聲儀，昆山市超聲儀器有限公司；CZY-6S手持黏力測試儀。

1.1.2 材料 實驗用對照品大黃酚（批號110796-200310）、梔子苷（批號749-8902），均來自于中國藥品生物制品檢定所。白芷（批號120945-201309）來自于中國食品藥品檢定研究院。實驗用樣品冰紅消腫巴布膏由北京市衛(wèi)生局臨床藥學研究所制劑室提供。實驗用乙醚、石油醚、甲酸乙酯、乙酸乙酯、甲酸等均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 紅花的顯微鑒別 取冰紅消腫巴布膏本品2片，除去藥品蓋襯，加乙醚40 mL，振搖溶解，去除背襯，靜置片刻，留取下層殘渣，棄去上清液；殘渣剩余殘渣再加乙醚10 mL，振搖，靜置片刻，棄去上清液，重復3次，殘渣揮干乙醚。取殘渣涂片，再置顯微鏡下觀察。

1.2.2 大黃的薄層鑒別 取冰紅消腫巴布膏本品5片，除去蓋襯，剪碎，加乙醚50 mL，攪拌，超聲處理15 min，放置片刻，吸取上清液，揮干乙醚溶劑，加乙醇1 mL使充分溶解，作為供試品溶液。另取大黃酚對照品，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品和對照品兩種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上。展開劑為以石油醚（30℃～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上層溶液為展開劑。展開，取出，晾干，置于紫外光燈（365 nm）下檢視。

1.2.3 梔子的薄層鑒別 取冰紅消腫巴布膏本品8片，除去蓋襯，加乙醚溶劑40 mL，振搖溶解，去除藥品背襯，靜置片刻，棄去上清液，剩余殘渣再加乙醚10 mL，震蕩搖勻振搖，靜置片刻，棄去上清液，重復3次，剩余殘渣加乙醇溶劑20 mL，加熱回流1 h，將殘渣濾過，留取濾液蒸干，濾液蒸干殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取梔子苷對照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述兩種溶液各3～5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上。展開劑為以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20∶3∶0.2）為展開劑，展開，取出，晾干。將10%硫酸乙醇溶液，少量均勻噴于晾干的硅膠板上，于在105℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和紫外光燈（365 nm）下檢視。

1.2.4 白芷的薄層鑒別 取冰紅消腫巴布膏本品5片，除去蓋襯，剪碎，加丙酮溶劑50 mL，超聲處理15 min，放置片刻，取上清液，揮干丙酮，剩余樣品殘渣加溶劑乙醇1 mL，震蕩溶解，作為供試品溶液。另取白芷對照藥材0.5 g，加溶劑乙醚10 mL，浸泡1 h，時時振搖，濾過，取上清濾液揮干，殘渣加乙醇溶劑l mL，震蕩溶解，作為對照藥材溶液。吸取上述兩種溶液供試品和對照品試液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上。選用以石油醚（30℃～60℃）-乙醚（3∶2）為展開劑，在于25℃以下展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。

1.2.5 微生物限度檢查 應符合貼膏劑下有關的各項規(guī)定（中國藥典2015年版四部通則0122），微生物限度 取本品10 g，加至無菌三角瓶中，加入20 mL十四烷酸異丙酯，邊加邊振搖并移至500 mL無菌鹽水瓶中，再加入pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液100 mL，充分振搖，萃取，靜置使油水明顯分層，取其水層作為1∶10的供試液。需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)，分別取1∶10的供試液1 mL，注入平皿中，依法檢查（中國藥典2015年 版四部1005）。金黃色葡萄球菌檢查，取1∶10的供試液10 mL，置100 mL胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，依法檢查（中國藥典2015年版四部1106）。銅綠假單胞菌檢查，取1∶10的供試液10 mL，置100 mL胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，依法檢查（中國藥典2015年版四部1106）。

1 g供試品中，需氧菌總數(shù)不得過103 cfu，霉菌和酵母菌總數(shù)不得過102 cfu，金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌不得檢出。

1.2.6 重金屬檢查 本品1 g，置坩堝中，緩緩加熱至完全碳化，放冷，加硫酸1 mL，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，加硝酸0.5 mL，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，在500℃～600℃熾灼使完全灰化，依法檢查（照中國藥典2015版四部通則0821重金屬檢查法第二法），對三批樣品進行測定。

砷鹽的檢查：運用中國藥典2015版四部通則0822砷鹽檢查法第一法古蔡氏法制備3批樣本。標準砷斑的制備：精密量取標準砷溶液2 mL，置A瓶中，加鹽酸5 mL與水21 mL，再加碘化鉀試液5 mL與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10 min后，加鋅粒2 g，于專用裝置上顯現(xiàn)斑點。取出溴化汞試紙，即得。將生成的砷斑與標準砷斑比較，不得更深。

1.2.7 含膏量、黏附力檢查 取冰紅消腫膏，用乙醚作溶劑，依法（中國藥典2015版四部通則0122第一法）檢查，每100 cm2含膏量不得少于5.5 g。取冰紅消腫膏（剪成40 mm×50 mm）3片，作為供試品。照貼膏劑黏附力測定法（中國藥典2015版四部通則0952第二法）測定，將供試品固定于試驗板表面，沿供試品長度方向加載1000 g砝碼，記錄脫落時間，即得。本品平均脫落時間應不少于24 h。

2 結果

2.1 紅花的顯微鑒別

顯微鏡下觀察：花粉粒黃色或橙黃色，外壁有較密的刺狀突起，并具三個萌發(fā)孔（紅花）。見封三圖1。

2.2 大黃的薄層鑒別

供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，可以看到顯相同的橙黃色熒光斑點。見封三圖2。

2.3 梔子的薄層鑒別

供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點。見封三圖3。

2.4 白芷的薄層鑒別

供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。見封三圖4。

2.5 微生物限度檢查

1 g供試品中，需氧菌總數(shù)不得過103 cfu，霉菌和酵母菌總數(shù)不得過102 cfu，金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌不得檢出。見表2。

2.6 重金屬檢查

三批樣品測定，見表3。砷斑與標準砷斑比較，見封三圖5。

對制劑成品進行重金屬、砷鹽檢查，根據(jù)三批樣品測定結果，重金屬含量均<10 ppm，砷鹽含量均<2 ppm。

2.7 含膏量、黏附力檢查

本品含膏量不得少于5.5 g/100 cm2；黏附力脫落時間不得<24 h。見表4。

3 討論

冰紅消腫膏在臨床上多用于治療多種骨骼創(chuàng)傷造成的腫痛，毒副作用相對西藥較小，患者使用的順應性好，對跌打損傷造成的腫痛有較好的治療效果[5-6]，適用于跌打損傷、積血成瘀、積塊不散、關節(jié)瘀滯之癥，尤其適用于急性軟組織損傷和急性滑膜炎的疼痛、腫脹、功能障礙之癥。因此，我們探討了冰紅消腫膏的薄層色譜法定性鑒別，同時進行了微生物以及重金屬檢查，以保證制劑質(zhì)量，提高療效。膏藥是傳統(tǒng)中國醫(yī)學中較為常用的制劑，古語有曰："膏藥能治病，無殊湯藥，用之得法，其響立應[7-8]?；继幘植渴艿剿幬锏闹苯哟碳?，使藥力直達病所，治療更有針對性。用膏藥，無需經(jīng)過肝腎代謝，只需經(jīng)皮膚吸收發(fā)揮作用，療效直達患處，通過滲透入皮膚，通經(jīng)絡、散寒濕，消腫痛等作用[9]。遵循中醫(yī)辨證論治及中藥的功效、主治與歸經(jīng)的原則，充分調(diào)動藥物互相協(xié)調(diào)為用的效能。

隨著科技的發(fā)展與申請院內(nèi)制劑的需要，原始冰紅消腫膏的質(zhì)量標準已經(jīng)遠遠不能滿足我們的需要。安全有效的醫(yī)療機構配制的中藥制劑能更好地為廣大患者服務，有利于推動我國中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展。膏藥的組成十分復雜，其中不同中藥成分互相作用，生成新物質(zhì)，故選取代表性成分至關重要[10-11]。方中大黃為君藥，大黃的抗菌譜較廣，可廣泛用于外科炎癥性疾病，其中以大黃酸抗菌作用最強。清熱解毒作用：大黃清熱解毒的實質(zhì)是清除組織和血漿內(nèi)炎性介質(zhì)[12]，梔子中含有環(huán)烯醚萜、有機酸、黃酮等化合物，具有抗炎、抗氧化、利膽等藥理活性[13]，白芷中主要含有香豆素類、揮發(fā)油類、氨基酸類成分及微量元素等，具有抗腫瘤、抗菌、解熱、鎮(zhèn)痛、消炎等多種藥理活性[14]，紅花具有擴張冠狀動脈、降血壓、耐缺氧、抑制血小板聚集、免疫和抗炎鎮(zhèn)痛等多種藥理學功效[15]。

本實驗采用薄層鑒別法對大黃、梔子、白芷進行了定性鑒別，建立了方中紅花的顯微鑒別，同時進行了微生物以及重金屬檢查，從而提高冰紅消腫膏的質(zhì)控水平。

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（收稿日期：2017-12-24）