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        天水地區(qū)蘋(píng)果腐爛病病菌對(duì)3種殺菌劑的敏感性測(cè)定

        2018-09-10 06:27:05惠娜娜李繼平張大為郭建明王立鄭果
        甘肅農(nóng)業(yè)科技 2018年12期

        惠娜娜 李繼平 張大為 郭建明 王立 鄭果

        摘要:采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了采自天水地區(qū)的8個(gè)蘋(píng)果腐爛病菌株對(duì)殺菌劑戊唑醇、噻霉酮及吡唑醚菌酯的敏感性。結(jié)果表明:戊唑醇對(duì)供試8株蘋(píng)果腐爛病病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果最為明顯, EC50值均小于1.0 μg/mL,平均為0.03 917 μg/mL;其次為吡唑醚菌酯,EC50值為0.362? 9~1.0262 6 μg/mL,平均為0.609 4 μg/mL;噻霉酮的抑制率較低, EC50值平均為20.226 39 μg/mL。

        關(guān)鍵詞:蘋(píng)果;蘋(píng)果腐爛病病菌;殺菌劑;敏感性;天水地區(qū)

        中圖分類號(hào):S436.611.1? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A? ? ? ? ?文章編號(hào):1001-1463(2018)12-0064-03

        doi:10.3969/j.issn.1001-1463.2018.12.019

        甘肅是我國(guó)的蘋(píng)果優(yōu)勢(shì)產(chǎn)區(qū)和生產(chǎn)大省,具有發(fā)展蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)得天獨(dú)厚的自然條件。全省有18個(gè)縣被農(nóng)業(yè)部列為全國(guó)蘋(píng)果生產(chǎn)優(yōu)勢(shì)區(qū)域,其中天水地區(qū)氣候溫暖,雨量適中,土層深厚,適宜多種果樹(shù)生長(zhǎng),是甘肅省優(yōu)質(zhì)果品產(chǎn)區(qū),是馳名中外的花牛蘋(píng)果的故鄉(xiāng)[1 ]。由蘋(píng)果黑腐皮殼菌(Valsa mali MiyabeYamada)侵染所致的蘋(píng)果腐爛病是蘋(píng)果的毀滅性病害,被稱為蘋(píng)果樹(shù)“癌癥”,各蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生。隨著栽培面積的不斷擴(kuò)大和樹(shù)齡增加,蘋(píng)果樹(shù)腐爛病發(fā)生日趨嚴(yán)重。該病過(guò)去通常在老果園普遍發(fā)生嚴(yán)重,近年來(lái)一些幼樹(shù)、甚至苗木也出現(xiàn)了腐爛病,常常造成死枝、死樹(shù)甚至毀園,給蘋(píng)果生產(chǎn)造成巨大損失,嚴(yán)重影響我國(guó)蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)的持續(xù)增長(zhǎng)[2 ]。生產(chǎn)上對(duì)該病害的防治主要依賴化學(xué)藥劑,常用的藥劑有福美胂、腐必清等。前期調(diào)查發(fā)現(xiàn),市場(chǎng)上防治腐爛病的藥劑種類繁多,魚(yú)目混雜。我們選用新型高效低毒藥劑戊唑醇、噻霉酮、吡唑醚菌酯進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定,以期為天水地區(qū)蘋(píng)果腐爛病防治提供支持。

        1? ?材料與方法

        1.1? ?供試材料

        從甘肅省天水市果樹(shù)研究所果園采集病樣,采用組織分離法[3 ],從病果果皮部病健交界處切下3 mm×3 mm×1 mm的小塊,放入3%次氯酸鈉溶液中消毒30 s,然后用70%酒精消毒 30 s,無(wú)菌水清洗 3 遍后置無(wú)菌濾紙上自然晾干,接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 培養(yǎng)基上。在25 ℃條件下培養(yǎng)5 d后挑取菌落邊緣的菌絲進(jìn)行初步純化,按照柯赫氏法則進(jìn)行驗(yàn)證。將純化后的菌株接種在PDA試管斜面中,于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。菌株編?hào)等見(jiàn)表1。

        供試藥劑:98%戊唑醇原藥,青島瀚生生物科技股份有限公司生產(chǎn);97.5% 吡唑醚菌酯原藥,青島瀚生生物科技股份有限公司生產(chǎn);95%噻霉酮原藥,江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司生產(chǎn)。

        1.2? ?室內(nèi)毒力測(cè)定方法

        1.2.1? ? 藥液配制? ? ?將戊唑醇、吡唑醚菌酯、噻霉酮原藥溶于二甲基亞砜中,配成10 000 μg/mL 的母液,于冰箱( 4 ℃) 中貯存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2.2? ? 含藥培養(yǎng)基的配制? ? ?在預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,根據(jù)培養(yǎng)基的用量,用移液槍吸取一定量的藥劑母液,將其加入溶化并冷卻至50 ℃左右的PDA培養(yǎng)基中,充分搖勻后等量倒入直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中,配制成含系列濃度藥劑的培養(yǎng)基。重復(fù) 4 次,以加入等量二甲基亞砜溶液處理為空白對(duì)照。

        1.2.3? ? 蘋(píng)果腐爛病病菌對(duì)供試藥劑的敏感性測(cè)定

        采用生長(zhǎng)速率法。先將蘋(píng)果腐爛病菌在PDA培養(yǎng)基上活化5 d,用直徑為4.0 mm的打孔器從菌落邊緣打取菌餅,分別移接到含有戊唑醇、吡唑醚菌酯、噻霉酮5個(gè)梯度濃度(吡唑醚菌酯0.10、0.50、2.50、12.50、62.50 μg/mL;異菌脲 0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 μg/mL;戊唑醇0.05、0.10、0.20、0.40、0.80 μg/mL;噻霉酮0.80、1.60、3.20、6.40、12.80 μg/mL)的PDA平板上,置25 ℃恒溫培養(yǎng)箱暗培養(yǎng)。

        連續(xù)培養(yǎng)4 d后,用游標(biāo)卡尺測(cè)定菌落徑向線性生長(zhǎng)量,求平均值,再減去4.0 mm菌餅直徑,即菌落增長(zhǎng)直徑。測(cè)量每次重復(fù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,計(jì)算每處理對(duì)病原菌菌絲增長(zhǎng)的抑制率。通過(guò)菌絲生長(zhǎng)抑制概率值和藥劑濃度對(duì)數(shù)值之間的線性回歸分析,計(jì)算各藥劑對(duì)菌株的有效抑制中濃度(EC50)值。

        菌絲抑制生長(zhǎng)率 =[(對(duì)照菌落生長(zhǎng)直徑-處理菌落生長(zhǎng)直徑) /對(duì)照菌落生長(zhǎng)直徑]×100。

        2? ?結(jié)果與分析

        3種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果腐爛病病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果見(jiàn)表2。其中戊唑醇對(duì)供試8株蘋(píng)果腐爛病病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制作用最好,EC50值為0.000 29~0.109 54 μg/mL,均低于1.00 μg/mL,相關(guān)系數(shù)均在0.8以上。不同菌株間的敏感性差異顯著,戊唑醇對(duì)菌株P(guān)GFL-1抑制活性最高,EC50值為0.000 29 μg/mL;對(duì)菌株P(guān)GFL-2抑制活性最低,EC50值為0.109 54 μg/mL,兩者之間相差377倍。其次為吡唑醚菌酯,其對(duì)供試蘋(píng)果腐爛病病菌菌絲的生長(zhǎng)抑制作用顯著,其EC50值為0.362 90~1.026 26 μg/mL,相關(guān)系數(shù)均在0.97以上,不同菌株間的敏感性差異較小,表現(xiàn)相對(duì)穩(wěn)定。噻霉酮對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌的菌絲生長(zhǎng)有一定的抑制作用,EC50為8.473 55~66.904 12 μg/mL,相關(guān)系數(shù)在0.91以上,不同菌株間的敏感性差異明顯。噻霉酮對(duì)菌株P(guān)GFL-1的抑制活性較好,EC50值為8.473 55 μg/mL;對(duì)菌株P(guān)GFL-3的抑制活性較差,EC50值高達(dá)66.904 14 μg/mL。從表3可知,同一菌株對(duì)不同殺菌劑的敏感性均表現(xiàn)出明顯差異,但從總體來(lái)看,3種殺菌劑的抑制活性由高到低為戊唑醇、吡唑醚菌酯、噻霉酮。

        3? ?小結(jié)與討論

        試驗(yàn)結(jié)果表明,戊唑醇對(duì)天水地區(qū)蘋(píng)果腐爛病病菌的抑制作用最強(qiáng), 其EC50均低于1.0 μg/mL,平均EC50值為0.039 17 μg/mL;其次為吡唑醚菌酯,平均EC50值為0.609 40 μg/mL;噻霉酮對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌的抑制作用較弱。該結(jié)果僅為室內(nèi)毒力測(cè)定的結(jié)果,田間防效有待于驗(yàn)證。

        戊唑醇一種三唑類殺菌劑,具有高效、內(nèi)吸、廣譜等特點(diǎn),為目前頗具開(kāi)發(fā)應(yīng)用潛力的藥劑,對(duì)蘋(píng)果主要病害有較好的防治效果。王磊等 [4 ]研究表明,戊唑醇對(duì)蘋(píng)果腐爛病病菌菌絲生長(zhǎng)抑制作用明顯,優(yōu)于其他藥劑。吡唑醚菌酯是一種新型、高效、低毒的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑,對(duì)作物具有保護(hù)作用、治療作用、內(nèi)吸傳導(dǎo)性和耐雨水沖刷性能,持效期較長(zhǎng),應(yīng)用范圍較廣,也是防治蘋(píng)果病害的主要推薦藥劑。周建波等[5 ]等研究發(fā)現(xiàn),室內(nèi)毒力測(cè)定吡唑醚菌酯對(duì)蘋(píng)果腐爛病病菌生長(zhǎng)抑制作用強(qiáng)。噻霉酮屬于有機(jī)雜環(huán)類化合物,具有高效、廣譜、低毒、綠色環(huán)保等優(yōu)良特性,是防治多種細(xì)菌、真菌性病害的殺菌劑。馬永強(qiáng)等[6 ]研究表明,戊唑醇、吡唑醚菌酯對(duì)蘋(píng)果腐爛病病菌菌絲生長(zhǎng)有一定的抑制作用。我們推薦選用戊唑醇、吡唑醚菌酯等藥劑對(duì)甘肅天水果區(qū)的蘋(píng)果腐爛病進(jìn)行化學(xué)防治,同時(shí)注意藥劑的交替和混配使用。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 馬麗榮,李紅霞,張國(guó)和.? 天水市蘋(píng)果出口基地現(xiàn)狀及發(fā)展對(duì)策[J] . 甘肅農(nóng)業(yè)科技,2015(11):70-73.

        [2] WANG X,ZANG R,YIN Z,et al. Delimiting cryptic pathogen species causing apple Valsa canker with multilo cusdata[J].? Ecology and Evolution,2014,4(8):1369-1380.

        [3] 方中達(dá).? 植病研究方法[M].? 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2007.

        [4] 王? ?磊,郜佐鵬,黃麗麗,等.? 防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病殺菌劑的室內(nèi)篩選[J].? 植物病理學(xué)報(bào),2009,39(5):549-554.

        [5] 周建波,殷? ?輝,秦? ?楠,等.? 不同藥劑對(duì)山西省蘋(píng)果樹(shù)腐爛病優(yōu)勢(shì)種群的室內(nèi)毒力及田間防效測(cè)定[J].? 山西農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,43(9):1169-1171;1206.

        [6] 馬永強(qiáng),李繼平,王? ?立,等.? 5種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌的抑制作用[J].? 甘肅農(nóng)業(yè)科技,2012(6):20-22.

        (本文責(zé)編:陳? ? 珩)

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