李占君　張厚良　范瑞紅

摘要： 對云南林下塔拉多糖進(jìn)行研究的結(jié)果表明，塔拉多糖是一種β型糖苷鍵的多糖類物質(zhì)，具有多糖的一般共性特征。塔拉多糖與半乳甘露聚糖結(jié)構(gòu)存在明顯性差異，其內(nèi)部結(jié)構(gòu)與葡萄甘露聚糖更貼近，數(shù)均分子量為（3～6）×104。XRD分析時發(fā)現(xiàn)，在區(qū)間為10～100的Ze條件下只有較少的小型峰存在。塔拉多糖形態(tài)結(jié)構(gòu)方面具有一定程度上的不穩(wěn)定性，并且主要以單晶體形式予以存在。

關(guān)鍵詞： 塔拉多糖； 紅外光譜； 圖譜分析； X射線衍射

中圖分類號： S 566. 9， TN 219 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A

塔拉（Caesalpinia spinosa）又名刺云實(shí)，為豆科蘇木亞科云實(shí)屬多年生植物，是我國作為單寧植物資源從南美洲引種栽培的物種[ 1 - 3 ]。主要在云南、四川、廣西、貴州、海南省等干熱、干暖河谷地區(qū)多地引種成林[ 4 ]。塔拉種子內(nèi)含的一層較厚的內(nèi)胚乳層為塔拉膠，主要成分為雜多糖[ 5 ， 6 ]。塔拉膠的熱穩(wěn)定性相較于其他植物膠更強(qiáng)，化學(xué)性質(zhì)也更穩(wěn)定[ 7 - 9 ]，可以作為穩(wěn)定劑、乳化劑、改性劑、增稠劑、醫(yī)藥佐劑應(yīng)用于各領(lǐng)域。鑒于塔拉國內(nèi)生產(chǎn)總量遠(yuǎn)低于國家現(xiàn)階段所需的現(xiàn)狀，本研究采用紅外光譜儀（FTIR）、X射線衍射儀（XRD）、差示掃描量熱儀（DSC-TG）對塔拉多糖內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行了系統(tǒng)性的研究與分析，以期為塔拉多糖在食品、醫(yī)療、化工等行業(yè)內(nèi)的綜合利用與開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所使用的塔拉種子2013年采收于云南昆明。溴化鉀、水楊酸、無水乙醇、乙醇、ABTS、DPPH、硫酸亞鐵、過氧化氫、過硫酸鉀、三氟乙酸、NaBH4、蒸餾水、醋酸、鹽酸、甲醇、吡啶、醋酸酐、二氯甲烷、重水等試劑均為分析純，均購于天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。

1. 2 試驗(yàn)儀器

101-1型電熱鼓風(fēng)干燥箱（北京科偉永興儀器有限公司）、JA2003型電子天平（上海精科廠）、電熱恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器有限公司）、紅外光譜儀（安捷倫儀器有限公司）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海青浦滬西儀器廠）、X-射線衍射儀（丹東通達(dá)科技有限公司）、掃描電鏡儀（上海永傲精密儀器有限公司）、核磁共振儀（北京歐倍爾科學(xué)儀器有限公司）、DSC-7型差示掃描量熱儀（上海研錦科學(xué)儀器有限公司）。

1. 3 試驗(yàn)方法

1. 3. 1 塔拉多糖

選用超聲輔助提取法對塔拉多糖予以純化、提取，并提取適量用于分析、檢測。

1. 3. 2 塔拉多糖紅外光譜分析

取干燥塔拉多糖樣品10 mg，與溴化鉀100 mg進(jìn)行充分混合，經(jīng)瑪瑙研缽充分研磨后壓片進(jìn)行紅外光譜掃描，紅外掃描波長所在區(qū)間為4000～400 cm-1，對其具體光譜波形出峰情況進(jìn)行觀察、記錄。

1. 3. 3 塔拉多糖分子量分析

塔拉多糖分子量的測定主要采用高效凝膠色譜法（GPC），試驗(yàn)選用的色譜柱子為： YMC Pack Diol-200A，色譜操作所具備的條件為：攜帶樣品流動相為蒸餾水，進(jìn)樣總劑量為50 μL，具體流動速度為1 mL/min，檢測核心檢測器為RID，具體實(shí)際操作溫度為室內(nèi)常溫[ 11 ]。

1. 3. 4 塔拉多糖XRD、DSC-TG分析

XRD衍射圖譜分析 由于塔拉多糖常態(tài)是以結(jié)晶形式存在，所以選用射線衍射方法對其射線情況下相應(yīng)的衍射圖譜進(jìn)行測定，進(jìn)而得知具體結(jié)構(gòu)信息[ 12 ]。X射線試驗(yàn)過程中，相應(yīng)具體實(shí)際操作性條件為輻射方式：CukQ，實(shí)際管內(nèi)電壓：40 kV，實(shí)際管內(nèi)電流：50 mA，相應(yīng)掃描運(yùn)行速度：15 ℃/min[ 13 ]。

DSC-TG圖譜分析 對塔拉多糖進(jìn)行量熱分析的過程中主要以差示掃描的形式 進(jìn)行測定，其實(shí)際分析測試條件為：以氮?dú)鉃檩d氣，同時載氣在系統(tǒng)內(nèi)部的流速為20 mL/min，溫度升高速率為10 ℃/min，溫度變化區(qū)間為40～400 ℃。

熱重分析測定時相應(yīng)參數(shù)條件為：以氮?dú)鉃椴僮鬏d氣，系統(tǒng)內(nèi)部載氣流速為20 mL/min，溫度升高速率為10 ℃/min，溫度變化區(qū)間范圍為40～800 ℃。

2 結(jié)果與分析

2. 1 塔拉多糖紅外光譜分析

對經(jīng)過脫蛋白和脫色提純處理后的干燥塔拉多糖樣品進(jìn)行紅外光譜分析測定的結(jié)果（圖1）表明，塔拉多糖樣品在3 375 cm-1具有有效吸收值，其峰值合理，這主要是由于多糖內(nèi)部的O-H會發(fā)生一定程度的伸縮性振動；同時在2 923 cm-1塔拉多糖樣品也具有有效吸收峰，主要是由于多糖內(nèi)部C-H也發(fā)生了一定程度的伸縮性振動。

對紅外總離子流圖觀察、分析可知：塔拉多糖樣品在1 630 cm-1和1 092 cm-1這兩處均具有一定程度的吸收峰，主要是由于C-O會發(fā)生一定幅度的伸縮性振動，這可以說明樣品在400 cm-1波長區(qū)域范圍內(nèi)是具有多糖類物質(zhì)的一般性共性特征。在890 cm-1的周圍具有一定程度的吸收峰，而在890 cm-1處并無吸收峰值，充分說明塔拉多糖內(nèi)部結(jié)構(gòu)中存在一種特異性的β型糖苷鍵[ 14 - 16 ]。

2. 2 塔拉多糖分子量測定

塔拉多糖的理化性質(zhì)與分子量之間具有一定程度上的密切聯(lián)系，由圖2可以看出，總離子流圖中第2出峰處為塔拉多糖分子量所對應(yīng)的峰值，而第1出峰處可能與塔拉多糖的純度有關(guān)，因混有少量雜質(zhì)而引起，這說明塔拉多糖樣品的純化程度還有待提高。試驗(yàn)得出，塔拉多糖樣品所具有的數(shù)均分子量為1.82×104，重均分子量為1.91×104，同時一般性半乳甘露聚糖分子量具有較高的分散性特點(diǎn)。通過對塔拉多糖分子量的測定得出其與半乳甘露聚糖具有一定程度上的差異性，而與葡萄甘露聚糖相似程度更高，且數(shù)均分子量的具體數(shù)值為（3～6）×104。

2. 3 XRD、DSC-TG結(jié)果分析

2. 3. 1 XRD分析結(jié)果

對塔拉多糖樣品進(jìn)行X射線衍射儀分析的結(jié)果（圖3）表明，塔拉多糖在Ze具體區(qū)間范圍為10～100時，只有少量峰值較小的峰出現(xiàn)，并無較明顯性吸收峰產(chǎn)生，這說明塔拉多糖在該條件下無法形成多糖類單體或單體形式得以存在，而是以一種不穩(wěn)定形態(tài)予以存在。

2. 3. 2 DSC、TG分析結(jié)果

由圖4可知，塔拉多糖的DSC圖譜具有熱吸收峰和熱流變化性臺階，表明塔拉多糖在加熱情況下會發(fā)生崩解、突變等類型的固態(tài)構(gòu)型變化。在保護(hù)性氣體（氮?dú)猓┑谋Ｗo(hù)下并無放熱峰的產(chǎn)生，說明塔拉多糖TPS4-l是一種無定形性多糖，這與X射線條件下的試驗(yàn)結(jié)果一致。當(dāng)試驗(yàn)過程中處理溫度為89.5℃時，塔拉多糖具有較高的吸熱峰，說明塔拉多糖會在該種溫度條件下發(fā)生固態(tài)構(gòu)型性突變，這種檢測結(jié)果與塔拉多糖溶液處于相同溫度范圍時的CD譜所發(fā)生的突變相互對映。塔拉多糖在所處條件為加熱狀態(tài)時，會在89.5 ℃這一溫度點(diǎn)具有較大的吸收峰，同時在120 ℃和130 ℃這兩個溫度點(diǎn)具有較小的負(fù)峰產(chǎn)生（放熱峰），這種現(xiàn)象說明塔拉多糖在處于空氣中時，會因所處環(huán)境空氣溫度的變化（加熱）而發(fā)生2次放熱性反應(yīng)。

由圖5可知，塔拉多糖在90、160、330 ℃這三個溫度點(diǎn)左右會有失重現(xiàn)象產(chǎn)生，在對DSC圖譜進(jìn)行系統(tǒng)性分析后得出，塔拉多糖在溫度為90℃左右時所產(chǎn)生的失重現(xiàn)象，主要是因?yàn)樗嗵亲陨硭哂械奈叫运膯适б稹Ｋ嗵翘幱?60、330 ℃所產(chǎn)生的失重峰會與溫度為120、130 ℃下所產(chǎn)生的放熱峰之間具有一定程度上的關(guān)聯(lián)性，且關(guān)聯(lián)程度較高；其中溫度為120 ℃時所產(chǎn)生的放熱峰，可能是塔拉多糖自身的分解作用而引起的；同時塔拉多糖在130 ℃的條件下會因自身性結(jié)晶水與鐵核二者之間的相互轉(zhuǎn)化作用而出現(xiàn)一個較小的放熱峰， 這兩個放熱過程并不是各自單純性發(fā)生的，而是伴隨一系列復(fù)雜的物理、化學(xué)過程。一方面，塔拉多糖會因自身性脫水和結(jié)晶水的失去而吸收熱量；另一方面，塔拉多糖也會因其自身性分解與失水而釋放熱量，綜合來講，塔拉多糖熱效應(yīng)會具體表現(xiàn)為2個小的放熱峰的產(chǎn)生。

3 結(jié) 論

3. 1 在對塔拉多糖進(jìn)行紅外光譜掃描的過程中，多糖在波長3 375 cm-1處因多糖羥基O-H 的伸縮性振動而具有一定幅度的吸收峰，同時也因C-H的伸縮性振動而在1 630 cm-1、1 092 cm-1波長處具有吸收峰，這充分說明塔拉多糖樣品在4 000～400 cm-1波長區(qū)域范圍內(nèi)具有多糖類物質(zhì)所具有的一般共性。與此同時，塔拉多糖樣品在波長890 cm-1附近具有有效吸收峰，而在波長840 cm-1處并無有效吸收峰存在，這再次說明塔拉多糖內(nèi)部結(jié)構(gòu)中β型糖苷鍵的存在。

3. 2 由塔拉多糖分子量的測定可以得出，其與半乳甘露聚糖具有一定程度上的差異性，而與葡萄甘露聚糖相似程度更高，且數(shù)均分子量的具體數(shù)值為（3～6）×104。塔拉多糖在Ze為10～100范圍內(nèi)并無有效明顯性強(qiáng)吸收峰的產(chǎn)生，其多糖結(jié)構(gòu)主要表現(xiàn)為無定形態(tài)。塔拉多糖DSC-TG圖譜說明塔拉多糖在該種條件下無法形成多糖類單體或單體形式得以存在，而是以一種無定形狀態(tài)予以存在，其圖譜結(jié)構(gòu)與X射線衍射結(jié)果與梅光明等[ 10 ]多糖提取純化及結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果趨于一致。

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第1作者簡介： 李占君（1988-）， 男， 助理工程師， 主要從事植物資源方向的研究。

通訊作者： 楊逢建（1971-）， 男， 教授， 主要從事植物資源方向的研究。

收稿日期： 2018 - 03 - 20

（責(zé)任編輯： 張亞楠）