陳志會(huì)

高效液相色譜分析法是現(xiàn)在藥品檢驗(yàn)含量有關(guān)物質(zhì)的常用方法，在色譜圖中出現(xiàn)異常峰的情況比較多，下面我就拿就高效液相色譜分析中出現(xiàn)的污染峰這一情況來(lái)談一下其出現(xiàn)的原因和應(yīng)對(duì)方法。

1.概念及工作原理

高效液相色譜法是采用高壓輸液泵將特定的流動(dòng)相泵入裝有填充劑的色譜柱然后對(duì)供試品溶液進(jìn)行分析測(cè)定的色譜方法。注入的供試品溶液經(jīng)流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱，在色譜柱中實(shí)現(xiàn)其各組分的分離，分離的各組分在依次進(jìn)入檢測(cè)器，由數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)將其處理成為色譜信號(hào)，所以高效液相色譜儀一般由儲(chǔ)液器、高壓泵、進(jìn)樣器、色譜分離柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成（如圖一所示）。

2.引進(jìn)污染的途徑

藥品的質(zhì)量控制一般包含五個(gè)方面：人員、機(jī)器、原料、方法、環(huán)境。所以如果高效液相色譜分析中所檢驗(yàn)的藥品溶液出現(xiàn)了污染峰，引入污染的途徑就可以從檢驗(yàn)員的理論素質(zhì)、高效液相色譜的運(yùn)行狀態(tài)、物料的清潔程度、人員操作的規(guī)范以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔這五大方面入手，抓到引進(jìn)污染的病灶。

3.原因

3.1高效液相色譜儀引進(jìn)的污染

若高效液相色譜儀出現(xiàn)污染從而導(dǎo)致檢驗(yàn)的藥品溶液出現(xiàn)了污染峰，我們就必須從其組成結(jié)構(gòu)出發(fā)，考慮是否是管路污染、色譜柱污染、進(jìn)樣器污染、進(jìn)樣墊污染或者是檢測(cè)器污染。

3.2 人員操作過(guò)程中引進(jìn)的污染

說(shuō)到人員操作引進(jìn)的污染我們就不是不把高效液相色譜分析藥品的檢驗(yàn)過(guò)程做一下簡(jiǎn)單回顧：配制供試品溶液所需溶劑的配制→樣品處理→樣品稱量→供試品溶液的配制→供試品溶液倒入進(jìn)入高效液相色譜儀所需的進(jìn)樣小瓶→高效液相色譜儀分析。

人員操作過(guò)程中引進(jìn)的污染，最終環(huán)節(jié)就是導(dǎo)致供試品溶液的污染，如果供試品溶液出現(xiàn)污染我們就必須反推到整個(gè)配制過(guò)程，分析得出的引入污染原因如下：

3.2.1配制樣品所需的溶劑出現(xiàn)了問(wèn)題

配制樣品所需的溶劑一般都需要用試液、試藥、超純水來(lái)配置，所以如果是溶劑出現(xiàn)問(wèn)題，首先要排查的就是上述三個(gè)物質(zhì)，另外要考慮的就是溶劑配制過(guò)程中引進(jìn)了污染，如配制過(guò)程中與試藥接觸的工具以及配制溶劑過(guò)程中所需的器皿，是否是他們的污染導(dǎo)致溶劑的問(wèn)題。還有就是排查是否是溶劑在濾過(guò)裝置以及最終的溶劑存放裝置中出現(xiàn)了的污染。

3.2.2樣品處理和稱量過(guò)程出現(xiàn)了問(wèn)題

樣品的處理最常見(jiàn)的就是研細(xì)，所以研細(xì)所用的研缽就是我們關(guān)注的重點(diǎn)。另外就是稱樣過(guò)程中引進(jìn)的污染，如稱樣勺、稱量紙、手套、天平托盤(pán)等的污染，造成了稱樣的樣品的污染，最終導(dǎo)致供試品溶液污染，高效液相色譜分析中污染峰的出現(xiàn)。

3.2.3供試品溶液的配制過(guò)程出現(xiàn)了問(wèn)題

存放樣品的稱量瓶、盛放溶劑的燒杯、定容配制供試品溶液的滴管、需要轉(zhuǎn)溶時(shí)所用的移液管，哪個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)污染都可以導(dǎo)致配制的供試品溶液的污染。

3.2.4其他

此外，我們所檢驗(yàn)的樣品一般都需要部分取樣才來(lái)送檢，取樣工具的潔凈度以及存放樣品的包裝也是引進(jìn)污染的風(fēng)險(xiǎn)因素。此外，存放供試品溶液的進(jìn)樣小瓶及其瓶蓋這兩者的污染也可以在高效液相色譜的分析實(shí)驗(yàn)過(guò)程中引入污染峰。

4.應(yīng)對(duì)方法

4.1針對(duì)高效液相色譜污染采取的措施有：

沖洗高效液相色譜整個(gè)管路系統(tǒng)；沖洗或者更換色譜柱；沖洗進(jìn)樣器；更換進(jìn)樣墊；以及清洗檢測(cè)器。

4.2針對(duì)人員操作過(guò)程中引進(jìn)的污染采取的措施有：

規(guī)范各類器皿的清洗操作，確保器皿的清潔性；可采用一次性產(chǎn)品盡量用一次性產(chǎn)品如進(jìn)樣小瓶、瓶蓋還有滴管，避免因清潔不干凈而引進(jìn)污染；規(guī)范實(shí)驗(yàn)員的操作：如試藥稱取時(shí)多稱出來(lái)的試藥不可以放回原瓶；大瓶試液使用時(shí)要倒出一部分，不可以直接用滴管等取用，倒出的溶劑仍然不可以倒回原瓶等；還有定期清理天平以及實(shí)驗(yàn)室，確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的整潔。

5.總結(jié)

質(zhì)檢工作是一項(xiàng)繁瑣而精準(zhǔn)的工作，需要我們時(shí)刻保持謹(jǐn)慎、細(xì)致，認(rèn)真分析和排查出現(xiàn)問(wèn)題的原因，保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，確保數(shù)據(jù)能的真實(shí)反應(yīng)藥品的狀態(tài)，最終保障藥品的質(zhì)量。

（作者單位：天津藥物研究院藥業(yè)有限責(zé)任公司）