李小梅, 章 斌, 葉群麗
(雅安職業(yè)技術(shù)學(xué)院,四川 雅安 625000)
酸棗又名山棗、野棗、五眼果、棘刺,為鼠李科棗屬植物,是廣泛分布于我國各省多個地區(qū)的野生藥用植物。酸棗仁是酸棗中重要的藥用部位,有寧心安神、養(yǎng)肝、斂汗之功效,常用來治療焦慮失眠、心肝血虛之心悸等病癥[1-3]。果實為核果,為圓形和橢圓形,氣味酸甜。酸棗具有抗氧化、抗衰老、養(yǎng)顏益壽的作用,常飲用酸棗汁可以改善膚色,利于健康[4]。因此,野生酸棗是一種重要的資源,具有較大的開發(fā)利用空間。維生素C作為人體必需的維生素之一具有良好的抗氧化性,能夠清除自由基延緩衰老[5]。維生素C是酸棗中重要的組成成分,故研究酸棗中維生素C的含量具有重要意義。本實驗采用紫外分光光度法對酸棗中果肉、種仁以及紅心獼猴桃和冬棗中的維生素C含量進行了測定比較,為綜合開發(fā)野生酸棗資源奠定了基礎(chǔ)。
試劑:2%草酸溶液;維生素C標準品,Solarbio公司;100 μg/mL維生素C標準溶液(現(xiàn)配制);蒸餾水;
材料:野生酸棗(采于雅安市雨城區(qū)金鳳寺山上)、紅心獼猴桃(產(chǎn)自雅安市名山縣)、冬棗(采購于雅安市雨城區(qū)農(nóng)貿(mào)市場)。
儀器:ME204E型電子天平,梅特勒-托利多有限公司; FS-200g中藥粉碎機,成都漢正科技有限公司; KDC-1044離心機,安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司; 752型紫外可見分光光度計,上海光譜儀器有限公司。
1.2.1 VC標準儲備液(100 μg/mL)的配制
準確稱取0.050 4 g VC對照品置于小燒杯中,用2%的草酸溶液溶解,轉(zhuǎn)移到500 mL容量瓶中,稀釋定容得100 μg/mL的VC標準儲備液。使用前用2%的草酸溶液稀釋至10 μg/mL標準使用液。
1.2.2 標準曲線的繪制
在6個50 mL容量瓶中,準確移取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL 10 μg/mL VC標準使用液,用2%草酸溶液稀釋定容,搖勻。在波長265 nm處,以2%草酸溶液作參比,測定吸光度。以VC標準溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標,繪制標準曲線。
1.2.3 樣品溶液的配制
依次用自來水、蒸餾水將酸棗、紅心獼猴桃和冬棗清洗干凈,自然風(fēng)干,精確稱取果肉部分10 g。放入研缽中研磨出汁液,用紗布包裹擠壓,得VC原液。轉(zhuǎn)入50 mL容量瓶,用2%草酸溶液稀釋定容至刻度。使用前根據(jù)VC含量高低分別進行不同倍數(shù)的稀釋,待用。
將酸棗果肉去除,挑選出顆粒飽滿的酸棗仁洗凈,自然風(fēng)干,用粉碎機粉碎后,過60目(250μm)篩子,精確稱取酸棗仁粉末10 g,置于50 mL容量瓶中,用2%草酸稀釋定容至刻度,在4 ℃溫度下超聲20 min,離心10 min,取上清液待用。
備注:酸棗果肉稀釋1 000倍,紅心獼猴桃和冬棗稀釋500倍,酸棗仁稀釋20倍。
將樣品溶液分別裝入比色皿,在265 nm波長下,平行3次測定每個樣品溶液的吸光度,取算術(shù)平均值作為測定結(jié)果。根據(jù)線性方程計算出樣品溶液中VC的質(zhì)量濃度(μg/mL),再按照公式(1)計算出樣品中VC含量(mg/100 g)。
(1)
式中:由線性方程計算出樣品溶液中所含VC的質(zhì)量濃度(μg/mL);V總為定容后樣品溶液的體積,本實驗為 50 mL;M總為樣品的質(zhì)量,本實驗為10 g;n為稀釋倍數(shù)。
以2%草酸溶液為參比,取一定量的VC標準液,在200 nm~350 nm范圍內(nèi)對其進行光譜掃描,結(jié)果如圖1所示。由圖1可知λmax=265 nm。
圖1 維生素C溶液的吸收曲線
根據(jù)表1所得數(shù)據(jù),繪制標準曲線見圖2。線性方程為:y=0.373 2x+0.005 6,R2=0.999 1。
結(jié)果顯示,在質(zhì)量濃度為0 μg/mL~2 μg/mL,VC標準溶液的吸光度與質(zhì)量濃度之間具有良好的線性關(guān)系。
表1 標準溶液吸光度與VC濃度
根據(jù)樣品溶液的吸光度計算出樣品溶液的質(zhì)量濃度,再將所得質(zhì)量濃度帶入公式計算出樣品中VC含量,結(jié)果見表2。
圖2 VC溶液的標準曲線
表2 樣品溶液吸光度與VC含量
實驗結(jié)果表明,酸棗果肉中VC含量遠大于冬棗和紅心獼猴桃,為人們?nèi)粘:侠頎I養(yǎng)獲得VC提供了另一種選擇。酸棗中VC成分主要在果肉部分,不在酸棗仁。目前,酸棗仁被廣泛應(yīng)用在臨床上,而酸棗果肉作為加工酸棗仁的副產(chǎn)物,往往被扔掉,開發(fā)利用不夠,造成了較大的資源浪費,應(yīng)加強對酸棗果肉的分析研究。