王鈉 馬顯杰 栗勇

[摘要]目的：研究乳房肥大患者外周血中雌激素表達(dá)水平，為乳房肥大患者病因?qū)W研究奠定基礎(chǔ)，為腺性乳房肥大癥的臨床治療提供相關(guān)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：將乳房肥大（95例）和正常體積乳房患者（84例）按照入院時處于月經(jīng)周期的卵泡期、排卵期、黃體期進(jìn)行分類，抽取患者入院當(dāng)天外周血5ml，采用17β-雌二醇放射免疫藥盒及SN-682放射免疫計(jì)數(shù)器測定外周血中17β-雌二醇表達(dá)水平，根據(jù)各指標(biāo)OD值計(jì)算其濃度，結(jié)果采用放射免疫γ計(jì)數(shù)器及配套統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行計(jì)數(shù)和數(shù)據(jù)處理。結(jié)果：在體重指數(shù)同一范圍內(nèi)，乳房肥大組與正常體積乳房組17β-雌二醇表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：外周血中17β-雌二醇可能與乳房肥大的發(fā)生無關(guān)。

[關(guān)鍵詞]乳房肥大癥；雌激素；17β-雌二醇；外周血；體重指數(shù)

[中圖分類號]R622 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A [文章編號]1008-6455（2018）05-0119-03

Study on Expression of Estrogen in Peripheral Blood of Patients with Mammary Hypertrophy

WANG Na，MA Xian-jie，LI Yong

（Department of Plastic Surgery，Xijing Hospital of the Military Medical University of the Air Force，Xi'an 710032，Shaanxi，China）

Abstract： Objective To study the expression of estrogen in peripheral blood of patients with mammary hypertrophy， and to lay a foundation for the study of etiology of mammary hypertrophy in the future， and to provide relevant experimental evidence for the clinical treatment of glandular mammary hypertrophy. Methods After admission， mammary hypertrophy （95 cases） and normal volume breast patients （84 cases） were classified according to the follicular phase， ovulation phase， and luteal phase during the menstrual cycle at the time of admission， and 5ml of peripheral blood was collected on the day of admission， using 17β-estradiol Radioimmunoassay kit and SN-682 radioimmunoassay counter were used to measure the expression level of 17β-estradiol in peripheral blood. The concentration was calculated according to the OD value of each index. The results were counted and processed by radioimmunoassay r counter and statistical software. Results There was no significant difference in the expression level of 17β-estradiol between hypertrophic breast and normal breast in the same range of body mass index（P>0.05）. Conclusion 17β-estradiol in peripheral blood may not be related to the occurrence of mammary hypertrophy.

Key words： mammary hypertrophy； estrogen； 17β- estradiol； peripheral blood； body mass index

乳房肥大癥，指女性乳房腺體及脂肪結(jié)締組織過度增生導(dǎo)致的體積和重量增加[1-2]。乳房肥大多發(fā)生在青春期和妊娠后女性的一側(cè)或兩側(cè)乳房，給年輕女性帶來巨大的痛苦。雌激素（estrogen）是一種女性激素，由卵巢和胎盤產(chǎn)生，腎上腺皮質(zhì)也產(chǎn)生少量雌激素。雌激素是生物體內(nèi)許多生物學(xué)過程如生長、發(fā)育和復(fù)制的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑，在男性和女性體內(nèi)都包括許多雌激素的靶器官如生殖道、乳房組織、骨骼、心血管和中樞神經(jīng)系統(tǒng)[3-4]。乳房組織在體內(nèi)作為一個性激素作用的重要靶器官，性激素在其生長、發(fā)育、成熟及功能方面發(fā)揮著重要作用。有關(guān)外周血中雌激素水平與乳房肥大是否有關(guān)系一直存在爭議，課題組在乳房肥大患者和正常體積乳房患者的外周血中檢測雌激素的水平，分析雌激素對乳房肥大的Z作用。由于前來就診的患者處于絕經(jīng)期的稀少，臨床資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，本次只研究卵泡期、排卵期和黃體期3個時期各組患者外周血中17β-雌二醇水平的差異。

1 材料和方法

1.1 一般資料：實(shí)驗(yàn)組為2012年12月-2014年2月西京醫(yī)院整形外科收治的因乳房肥大行乳房縮小整形術(shù)的患者95例（見圖1），其中卵泡期37例，排卵期32例，黃體期26例，均為女性，年齡14～51歲，平均29歲，平均體重指數(shù)22.25kg/m2，選擇單側(cè)乳房體積600ml以上，單側(cè)乳房切除量均在300g以上。

對照組（正常體積乳房組）為2012年12月-2014年2月收治的乳房下垂行乳房上提懸吊術(shù)患者84例，乳房體積正常行單純?nèi)榉肯麓箲业跣g(shù)81例，女復(fù)男乳房全切術(shù)3例（未服用激素）。其中卵泡期27例，排卵期31例，黃體期26例，均為女性，年齡17～45歲，平均年齡29歲，平均體重指數(shù)21.65kg/m2，乳房體積為250～350ml。經(jīng)文獻(xiàn)回顧及臨床病例分析，目前學(xué)者們認(rèn)為正常乳房體積250～350ml較合適[5]。兩組年齡等基本資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。兩組手術(shù)時間均不在月經(jīng)期，選自月經(jīng)周期后的第2～3周。所有患者均無全身其他系統(tǒng)疾病，無不良嗜好，飲食規(guī)律，生活健康，無明顯手術(shù)禁忌證。

1.1.1 乳房體積計(jì)算：采用Sigurdson[6]等報(bào)道的方法。計(jì)算公式：乳房體積=33.5×PP+37.7×FP-1305（患者雙手叉腰，背靠墻站立，用軟卷尺沿乳房基底部測量其周長計(jì)為PP，在乳房表面標(biāo)記一點(diǎn)P，該點(diǎn)為乳房下皺襞最低點(diǎn)在乳房前表面的投影，乳房下皺襞最低點(diǎn)到P點(diǎn)的直線距離為FP）。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①人流及引產(chǎn)手術(shù)未滿2月者；②近期內(nèi)或1個月內(nèi)有服用雌激素及相關(guān)藥物史者；③6個月內(nèi)有乳房手術(shù)史者；④有乳腺癌或乳腺癌家族病史者；⑤2個月內(nèi)有乳房急慢性炎癥史者；⑥停止哺乳未滿6個月者；⑦乳房觸診可以摸到硬塊及結(jié)節(jié)者；⑧既往有乳腺雙側(cè)或單側(cè)的非典型增生者；⑨12個月內(nèi)有子宮及卵巢等生殖系統(tǒng)切除及部分切除者；⑩長期月經(jīng)周期不規(guī)律及行藥物治療者； 雙側(cè)或單側(cè)乳腺痛及乳頭溢液者； 乳房皮膚顏色及質(zhì)地發(fā)生改變者。

1.2 主要試劑與儀器：17β-雌二醇試劑盒購自R-biopharm（德國拜發(fā)），血漿購自R-biopharm（德國拜發(fā)），甲基叔丁基醚購自R-biopharm（德國拜發(fā)），石油醚購自R-biopharm（德國拜發(fā)）。微孔板酶標(biāo)儀（德國拜發(fā)），冰柜（美國Thermo Scientific公司），移液器（德國Eppendorf公司），刻度移液管（德國Eppendorf公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法：①將乳房肥大（95例）和正常體積乳房患者（84例）按照入院時處于月經(jīng)周期的卵泡期、排卵期、黃體期進(jìn)行分類，詳細(xì)記錄患者資料，抽取患者入院當(dāng)天外周血5ml后靜置并離心，取上清液（血清）；②取1ml樣品于標(biāo)記好的玻璃試管中，加入5ml醚混合物中[甲基叔丁基醚/石油醚（30/70 v/v）]，室溫下（20℃～25℃）搖床內(nèi)震蕩20min；③提取液在-20℃冰箱內(nèi)冷凍60min（或-80℃冰箱內(nèi)冷凍30min），收集上清液于一個標(biāo)記好的試管中；④含醚上清液在60℃水浴鍋中蒸干，干燥殘留物用400μl樣品稀釋液稀釋并充分吹打混勻，每孔取20μl樣品進(jìn)行檢測；⑤將稀釋后的酶連接物溶液50μl與標(biāo)準(zhǔn)品或處理好的樣品溶液20μl吹打混勻后逐一的加入到對應(yīng)的微孔中；⑥向每一個微孔中加入50μl提前稀釋的17β-雌二醇抗體溶液，充分吹打混勻，靜置10min，在室溫（25℃）條件下孵育2h；⑦將微孔中的液體棄去，將微孔架倒置于濾紙上，輕輕拍打微孔架，直至微孔中的液體完全干燥，蒸餾水清洗微孔；⑧向每個清洗過的微孔中加入提前預(yù)冷好的50μl底物和50μl發(fā)色劑，充分混合后在室溫（25℃）條件下避光處孵育1h；⑨恢復(fù)光照，將100μl反應(yīng)終止液仔細(xì)加入前面每一個微孔中，充分混合；⑩向微孔中加入反應(yīng)終止液，靜置20min后于450nm處測量吸光度值； 根據(jù)各指標(biāo)OD值計(jì)算其濃度并記錄，采用放射免疫γ計(jì)數(shù)器及配套統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行計(jì)數(shù)和數(shù)據(jù)處理。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS 18.0版本統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，兩組間體重指數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，外周血激素水平比較采用t檢驗(yàn)的Mann-Whtney U進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 體重指數(shù)檢測結(jié)果：如圖1所示，實(shí)驗(yàn)組95例患者體重指數(shù)為（22.25±5.11）kg/m2，對照組84例患者體重指數(shù)為（21.65±5.07）kg/m2，組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.9462），本次選擇的患者來源排除了由于肥胖原因造成的乳房體積的差異，為后面進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。

2.2 外周血17β-雌二醇水平檢測結(jié)果：如圖3所示，實(shí)驗(yàn)組卵泡期患者外周血17β-雌二醇水平為（174.43±42.32）pmol/L，對照組為（189.11±57.45）pmol/L，組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.3029）；如圖4所示，實(shí)驗(yàn)組排卵期患者外周血17β-雌二醇水平為（121.11±31.23）pmol/L，對照組為（132.77±41.42）pmol/L，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.8160）；如圖5所示，實(shí)驗(yàn)組黃體期患者外周血17β-雌二醇水平為（229.66±74.98）pmol/L，對照組為（214.11±63.25）pmol/L，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.5526）。

3 討論

至今，乳房肥大癥只能通過手術(shù)治療而達(dá)到緩解，對于腺性乳房肥大的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。有學(xué)者認(rèn)為體內(nèi)雌激素在乳房的正常發(fā)育過程中起著重要的作用[7-8]。另有學(xué)者認(rèn)為，乳房肥大的發(fā)生可能與乳腺組織局部的雌激素水平增多或靶細(xì)胞對雌激素的反應(yīng)性增強(qiáng)有關(guān)[3，9]。雌激素相關(guān)的乳房肥大癥多發(fā)生在青春期和妊娠后婦女，因其體內(nèi)的激素水平處于比較敏感的變化時期，臨床上有少部分青春期乳房肥大患者有著明顯的遺傳傾向[10]。

雌激素在人體內(nèi)發(fā)揮著重要的作用，雌激素的主要成分是17β-雌二醇，17β-雌二醇在人體內(nèi)許多器官的生長、發(fā)育過程中起著關(guān)鍵性的作用[11-13]，例如乳房、子宮、卵巢、前列腺等。雌激素能促進(jìn)人類乳房正常生長發(fā)育，還在體內(nèi)通過與雌激素受體的共同作用參與了各種乳房疾病的發(fā)生，例如：乳房的各種良惡性腫瘤等[11，14]。

目前有關(guān)外周血中雌激素水平與乳房肥大的統(tǒng)計(jì)學(xué)研究數(shù)據(jù)及病例較少。所以，為了使乳房肥大的病因?qū)W研究更好地服務(wù)于臨床，本次收集了西京醫(yī)院乳房肥大患者95例和正常體積乳房患者84例作為研究對象，為了確保所選患者均為腺性乳房肥大，排除一些由于過度肥胖所導(dǎo)致的脂肪性乳房肥大，對患者的體重指數(shù)及其他全身性疾病進(jìn)行了嚴(yán)格篩選，排除由于肥胖原因造成的乳房體積的差異。女性患者的生理周期分為卵泡期、排卵期、黃體期及絕經(jīng)期，由于處于絕經(jīng)期的患者稀少，且絕經(jīng)期婦女激素水平相對穩(wěn)定，所以本次研究主要以卵泡期、排卵期和黃體期患者為主。3組處于不同生理周期的研究資料顯示，乳房肥大組與正常體積乳房組患者外周血中17β-雌二醇比較，無明顯升高，提示探索乳房肥大的病因應(yīng)該從局部著手。大量的研究資料表明，乳房肥大可能是局部雌激素增多或乳房局部組織對雌激素的敏感性增強(qiáng)有關(guān)，所以進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)需要從局部去尋找與乳房肥大有關(guān)的雌激素水平及其受體的表達(dá)情況。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Tarallo M，Cigna E，F(xiàn)ino P，et al.sMacromastia surgical therapy[J].Ann Ital Chir，2011，82（3）：191-195.

[2]Mundy LR，Homa K，Klassen AF，et al. Understanding the Health Burden of Macromastia： Normative Data for the BREAST-Q Reduction Module[J].Plast Reconstr Surg，2017，139（4）： 846e-853e.

[3]Karagüzel G，Bilen S，Kara?al N，et al.Virginal Breast Hypertrophy： Different Presentations of 2 Cases and the Role of Tamoxifen as an Adjuvant Therapy[J].J Pediatr Adolesc Gynecol，2016，29（5）：e71-e74.

[4]Zhao P，Soukup ST，Hegevoss J，et al.Anabolic effect of the traditional Chinese medicine compound tanshinone IIA on myotube hypertrophy is mediated by estrogen receptor[J].Planta Med，2015，81（7）：578-585.

[5]Zimman OA，Butto CD，Rostagno R，et al.Volumetric Mammogram Assessment： A Helpful Tool in the Treatment of Breast Asymmetries[J].Aesthetic Plast Surg，2017，41（6）：1261-1274.

[6]Sigurdson LJ，Kirkland SA.Breast volume determination in breast hypertrophy anaccurate method using two anthropomorphic measurements[J].Plast Reconstr Surg，2006，l18（2）：313-320.

[7]Dancey A，Khan M，Dawson J，et al.Gigantomastia-a classification and review of the literature[J].J Plast Reconstr Aesthet Surg，2008，61（5）：493-502.

[8]Beraldo FN，Veiga DF，Veiga-Filho J，et al.Sexual Function and Depression Outcomes Among Breast Hypertrophy Patients Undergoing Reduction Mammaplasty： A Randomized Controlled Trial[J].Ann Plast Surg，2016，76（4）：379-382.

[9]Mueller SO，Clark JA，Myers PH，et al.Mammary gland development in adult mice requires epithelial and stromal estrogen receptor alpha[J].Endocrinology，2002，143（6）：2357-2365.

[10]Zhou M，Jin M，Wang L，et al.Pregnancy-associated gigantomastia recurrence and ectopic breast after reduction mammaplasty： A case report[J].Cancer Biomark，2017，20（2）：225-229.

[11]Portincasa A，Ciancio F，Cagiano L，et al.Septum-Enhanced Mammaplasty in Inferocentral Pedicled Breast Reduction for Macromastia and Gigantomastia Patients[J].Aesthetic Plast Surg，2017，41（5）：1037-1044.

[12]Zelazniewicz A，Pawlowski B.Breast size and asymmetry during pregnancy in dependence of a fetus's sex[J].Am J Hum Biol，2015，27（5）：690-696.

[13]Dickson RB，Huff KK，Spencer EM，et al.Induction of epidermal growth factor-related polypeptides by 17b-estradiol in MCF-7 human breast cancer cells[J].Endocrinology，1986，118（1）：138-142.

[14]Peker F，Yuksel F，Karagoz H，et al.Breast reconstruction using de-epithelialized dermal flap after vertical-pattern skin-sparing mastectomy in macromastia[J].ANZ J Surg，2015，85（1-2）：64-68.

[收稿日期]2018-01-28 [修回日期]2018-04-10

編輯/朱婉蓉