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        不同劑量鏈脲佐菌素聯(lián)合高脂飼料對大鼠血糖作用的研究

        2018-08-25 08:51:14吳裕穎林潔孫鈺燁王若琦
        科教導(dǎo)刊 2018年5期
        關(guān)鍵詞:血糖

        吳裕穎 林潔 孫鈺燁 王若琦

        摘要 目的:探索不同劑量鏈脲佐菌素(STZ)聯(lián)合高脂飼料對大鼠血糖作用的影響。方法:高脂飼料喂養(yǎng)4周后將SD大鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對照組。對照組繼續(xù)給予高脂飼料,實(shí)驗(yàn)組在高脂飼料喂養(yǎng)的同時(shí)分別給予劑量為30mg/kg、40mg/kg和50mg/kg的鏈脲佐菌素腹腔注射,于注射鏈脲佐菌素10天和20天后測量體重與空腹血糖,并且與對照組進(jìn)行比較。結(jié)果:各組20天后血糖均明顯升高,與對照組的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其中40mg&g;和50mg&g;組的血糖升高超過11.1mmol/L;30mg/kg和40mg/kg組大鼠耐受性較50mg/kg組好。結(jié)論:40mg/kg的鏈脲佐菌素聯(lián)合高脂飼料對升高大鼠血糖作用明顯,對大鼠生理功能影響小,可能是比較理想的選擇。

        關(guān)鍵詞 鏈脲佐菌素 高脂飼料 血糖

        中圖分類號:R318 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A DOI:10.16400/j.cnki.kjdkz.2018.02.030

        建立高血糖動(dòng)物模型在修改研究中具有極其重要的意義。高脂高糖飲食結(jié)合小劑量的鏈脲佐菌素(STZ)是建立高血糖動(dòng)物模型的常用方法,此法具有簡單、成本低廉和模型穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。查閱文獻(xiàn),對于STZ劑量的選擇有不同報(bào)道。本研究以大鼠血糖的升高值和對生理功能的影響為靶標(biāo),通過嘗試不同劑量的STZ聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)對大鼠血糖的作用探尋可能更加適宜用于建立高血糖動(dòng)物模型的STZ劑量。

        1材料和方法

        1.1材料

        1.1.1動(dòng)物和飼料

        SPF級雄性SD大鼠,體重(300~50)g,由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物合格證號:SYXK桂2014-0002。高脂飼料,其中含豬油18%,蔗糖20%,蛋黃3%,基礎(chǔ)飼料59%,由江蘇協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司提供,生產(chǎn)批號:201601008。普通飼料由右江民族醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

        1.1.2主要試劑和器材

        鏈脲佐菌素(STZ),純度≥98.9%,水分≤3%;檸檬酸緩沖液:檸檬酸(FW:210.14),檸檬酸鈉(FW:294.10)由北京博愛港商貿(mào)中心提供,生產(chǎn)批號:B37917。三諾安穩(wěn)免調(diào)血糖儀,由百色歐文醫(yī)療科技有限公司提供,生產(chǎn)批號:20150053。

        1.2方法

        1.2.1動(dòng)物分組喂養(yǎng)

        12只大鼠喂養(yǎng)一周后給與高脂飼料連續(xù)喂養(yǎng)4周。4周后隨機(jī)分2組,實(shí)驗(yàn)組9只,對照組3只。實(shí)驗(yàn)組再隨機(jī)分為3個(gè)亞組:低劑量、中劑量和高劑量組各3只。低劑量組使用的STZ劑量為30mg/kg,中劑量組為40mg&g;,高劑量為50mg/kg,對照組注射生理鹽水3ml/只。所有大鼠均繼續(xù)同時(shí)給予高脂飼料。

        1.2.2注射鏈脲佐菌素

        檸檬酸緩沖液的配制:檸檬酸(FW:210.1 4)2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液,檸檬酸鈉(FW:294.10)2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液,將A、B液按照1:1的比例混合,并測定ph值,調(diào)節(jié)ph值范圍為4.2-4.5,即是所需配置STZ的檸檬酸緩沖液,需現(xiàn)用現(xiàn)配。將鼠過夜禁食后稱重,按鼠重比稱取STZ,放入緩沖液中溶解,比例為10mg:1ml,確保STZ完全溶解后,30分鐘內(nèi)按照對應(yīng)的劑量將其注射到大鼠腹腔內(nèi)。

        1.2.3測量血糖值

        開始前測量所有大鼠體重,采用尾靜脈取血測量法,使用電子血糖儀測量所有大鼠的空腹血糖值。實(shí)驗(yàn)組STZ注射完畢分別于10和20天后同法測量所有大鼠的體重和空腹血糖值。

        1.2.4生理狀態(tài)觀察

        實(shí)驗(yàn)期間注意防止感染及創(chuàng)口清潔,多喂水并勤換墊料,觀察是否有鼠出現(xiàn)死亡的情況。

        1.2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        記錄數(shù)據(jù),所有計(jì)數(shù)資料均以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示;組間比較采用單因素方法分析,組內(nèi)比較采用單樣本t檢驗(yàn),采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。

        2結(jié)果

        2.1用藥前后各組大鼠在體重變化(見表1)

        與模型對照組比較,用藥10天時(shí),中劑量組體重明顯增加(P<0.05),高劑量組體重顯著增加(P<0.01);用藥20天時(shí),高劑量組體重顯著下降(P<0.01);給藥各組用藥前與用藥10天后比較,實(shí)驗(yàn)組體重明顯增加(P<0.05),給藥各組用藥10天后與用藥20天后比較,低劑量組無明顯差別(P>0.05),中劑量組明顯下降(P<0.05),高劑量組體重顯著下降(P<0.01)。

        2.2用藥前后各組大鼠空腹血糖變4L(見表2)

        與模型對照組比較,用藥10天時(shí),各實(shí)驗(yàn)組空腹血糖顯著升高(P<0.01),用藥20天時(shí),各實(shí)驗(yàn)組空腹血糖顯著升高(P<0.01)。

        2.3用藥前后各組大鼠死亡情況(見表3)

        對照組、低劑量組、中劑量組大鼠未死亡,高劑量組大鼠用藥20天后,身體情況欠佳(體重下降,四肢傷口感染,進(jìn)食少,活動(dòng)能力降低),23天后2只大鼠出現(xiàn)死亡。

        3討論與分析

        鏈脲佐菌素(stz)為一廣譜抗菌素,具有抗菌、抗腫瘤性能,副作用是對胰島β細(xì)胞具有高度選擇性毒性作用。已有研究證明,胰島β細(xì)胞可分泌胰島素,引起血糖下降。胰島素與胰高血糖素共同維持體內(nèi)的血糖濃度維持在正常范圍波動(dòng),而當(dāng)機(jī)體長時(shí)間處于高糖高脂的狀態(tài)時(shí),會(huì)誘發(fā)機(jī)體出現(xiàn)胰島素抵抗,使胰島素分泌代償性增加,久而久之,胰島B細(xì)胞因胰島素抵抗而進(jìn)一步損害,出現(xiàn)糖耐量異常導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生。而諸多實(shí)驗(yàn)表明,STZ藥物對胰島β細(xì)胞有毒性,胰島β細(xì)胞受到破壞致使胰島素分泌受損從而控制血糖系統(tǒng)受到破壞,導(dǎo)致血糖升高,易造成糖尿病。用STZ來誘導(dǎo)高血糖鼠模型,其成模率與其劑量有所聯(lián)系,劑量過小難以成模,劑量過大易導(dǎo)致死鼠現(xiàn)象,為此必須選用合適的劑量。

        本研究參考相關(guān)文獻(xiàn),觀察了不同劑量的STZ聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)對大鼠血糖的作用。研究結(jié)果提示低劑量組STZ聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)難以達(dá)到預(yù)期的升高血糖值,中劑量組和高劑量組STZ聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)都可以達(dá)到預(yù)期的升高血糖值。達(dá)到預(yù)期的升高血糖值需要采用中劑量組和高劑量組STZ聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)的方法。本研究同時(shí)提示了高劑量組STZ聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)對動(dòng)物的生理功能影響嚴(yán)重。因此,本研究認(rèn)為中劑量組STZ聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)可能是更加適宜的用于建立高血糖動(dòng)物模型的方法。本研究為高血糖動(dòng)物模型的制作提供了參考,我們將在以后的研究中進(jìn)一步探索,探尋可能更加適宜用于建立高血糖動(dòng)物模型的STZ劑量并且研究其可能的機(jī)制。

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