劉建國，惠軍來，陳 軍

（1.商洛市洛南縣保安鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西洛南 726115；2.洛南縣職教中心，陜西洛南 726100；3.洛南縣巡檢鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站，陜西洛南 726104）

熱應(yīng)激是指在高溫環(huán)境中對(duì)機(jī)體提出的任何要求所做的非特異性生理反應(yīng)的總和。其主要原因是環(huán)境溫度增高，主要發(fā)生在夏季及溫度較高的地區(qū)，雛雞多發(fā)生，生理反應(yīng)多為呼吸速度加快，心率加快，水及電解質(zhì)平衡紊亂。動(dòng)物表現(xiàn)食欲降低，張口呼吸，少動(dòng)懶動(dòng)，嚴(yán)重者大量死亡，給養(yǎng)雞業(yè)造成巨大損失。當(dāng)環(huán)境溫度高于26℃時(shí)，雞生長速度緩慢且在一定范圍內(nèi)成正相關(guān)（孔麗娜等，2015），發(fā)現(xiàn)在雞處于熱應(yīng)激條件下其肉品質(zhì)下降（李軍喬，2012）。國內(nèi)外對(duì)此進(jìn)行大量研究，但尚未有較好的解決方法。

常用抗熱應(yīng)激劑有微量元素類、有機(jī)酸類、維生素類、抗生素類、鎮(zhèn)靜劑類和中草藥類等。化藥作為抗熱應(yīng)激有很好的效果，由于化藥純度較高，對(duì)機(jī)體造成的傷害較大，獸藥殘留較高。中草藥是在中醫(yī)基礎(chǔ)理論和臨床辨證基礎(chǔ)上，依據(jù)藥物的四氣五味對(duì)機(jī)體進(jìn)行調(diào)理，具有療效顯著、副作用小，殘留少等特點(diǎn)，同時(shí)我國中草藥資源豐富，因此，將中草藥作為飼料添加劑對(duì)資源的利用有重要意義（于翠平，2014；陳國順，2007）。本研究以金銀花、地榆、白術(shù)、石膏等中草藥為原料，依據(jù)中草藥組方原則對(duì)其進(jìn)行組方，并添加到飼料中，觀察自擬中草藥復(fù)方對(duì)仔雞熱應(yīng)激的影響。

1 材料

1.1 試劑 試驗(yàn)藥材：金銀花、地榆、白術(shù)、黃芪，以2∶1∶1∶1的比例進(jìn)行組方，然后對(duì)各個(gè)藥物進(jìn)行粉碎。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 80只健康仔雞來自洛南縣秦豐源養(yǎng)雞專業(yè)合作社王明亮養(yǎng)雞場(chǎng)，試驗(yàn)于夏天環(huán)境溫度，5 d平均溫度在30℃以上進(jìn)行。

2 方法

2.1 動(dòng)物分組 選取80只健康仔雞，隨機(jī)分為中草藥飼料添加劑高劑量組、中劑量組、低劑量組和空白對(duì)照組，中草藥飼料添加劑高劑量組、中劑量組、低劑量組分別按照基礎(chǔ)日糧的1.5%、1.0%、0.5%進(jìn)行添加?？瞻讓?duì)照組不添加，正常飼喂，飼喂方式為自由采食和飲水，連續(xù)飼喂14 d。

2.2 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞臨床表現(xiàn)的影響 試驗(yàn)期間，在稱飼料，飼喂飼料及定時(shí)對(duì)試驗(yàn)雞進(jìn)行觀察，主要觀察試驗(yàn)雞的精神狀態(tài)，運(yùn)動(dòng)情況、呼吸情況、采食和飲食情況及糞便狀態(tài)等臨床表現(xiàn)。

2.3 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞生長性能的影響 試驗(yàn)前對(duì)試驗(yàn)雞稱重。每天上午定時(shí)給予飼料并稱上一天沒吃完的飼料，記錄其日采食量。在第2天給料時(shí)稱重并記錄，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)試驗(yàn)雞稱末重。計(jì)算其日增重，料重比。計(jì)算公式如下：

2.4 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞組織器官的影響 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)試驗(yàn)雞每組隨機(jī)取3只進(jìn)行剖檢，觀察試驗(yàn)雞各臟器狀態(tài)，有無肉眼可見的病變，若有進(jìn)行病理切片制作，觀察中草藥添加劑對(duì)試驗(yàn)雞組織的影響。

2.5 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞血液生化指標(biāo)的影響 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)試驗(yàn)雞翅靜脈采血2 mL，置于抗凝管中，分離血清，使用全自動(dòng)血液生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，其檢測(cè)項(xiàng)目主要包括總蛋白，白蛋白，球蛋白，葡萄糖，谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶。

2.6 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞血清熱休克蛋白含量的影響 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)試驗(yàn)雞翅靜脈采血2 mL，置于抗凝管中，分離血清，利用ELISA試劑盒測(cè)定試驗(yàn)雞血清中熱休克蛋白含量的影響。2.7 數(shù)據(jù)處理 利用SPSS20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan’s法多重比較，試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。P＜0.01表示差異極顯著，P＜0.05表示差異顯著。

3 結(jié)果

3.1 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞臨床表現(xiàn)的影響 試驗(yàn)期間，試驗(yàn)雞精神狀態(tài)良好，反應(yīng)靈敏，運(yùn)動(dòng)姿勢(shì)正常，無扎堆現(xiàn)象，被毛光亮不雜亂，采食飲水正常，糞便正常。

3.2 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞生長性能的影響 由表1可知，飼料中添加中草藥后，試驗(yàn)動(dòng)物的末重增加，但以高劑量組效果最好，與空白對(duì)照組相比差異極顯著（P＜0.01）；添加劑中、低劑量組對(duì)日增重效果影響不顯著，與空白對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05），而高劑量與空白對(duì)照組相比日增重顯著增加（P＜0.05）；日采食量各組之間無顯著性差異（P＞0.05），但添加劑組有升高趨勢(shì)，料重比降低，與空白對(duì)照組相比，中草藥添加劑高劑量組差異顯著（P＜0.05）。

3.3 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞組織器官的影響 試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)試驗(yàn)雞進(jìn)行解剖，試驗(yàn)雞內(nèi)臟無出血，無結(jié)節(jié)，無潰瘍，臟器均正常，表明中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞組織器官無不良影響。

3.4 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞血液生化指標(biāo)的影響 由表2可見，給藥中草藥飼料添加劑后，各試驗(yàn)組雞甘油三脂、球蛋白、白蛋白均無顯著性差異（P＞0.05），但中草藥飼料添加劑組球蛋白、白蛋白含量有上升趨勢(shì)。血清總膽固醇含量升高，與空白對(duì)照組相比，中草藥添加劑中、低劑量組差異顯著（P＜0.05）；血清總蛋白含量升高，與空白對(duì)照組相比，中草藥飼料添加劑低劑量組差異顯著（P＜0.05）。

表1 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞生長性能的影響

表2 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞血液生化指標(biāo)的影響 g/L

3.5 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞血清熱休克蛋白含量的影響 由表3可知，飼料中添加中草藥后，熱應(yīng)激試驗(yàn)雞的血清熱休克蛋白含量升高，其中中草藥添加劑高劑量組效果明顯，與空白對(duì)照組相比，差異顯著（P＜0.05）。

表3 中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞血清熱休克蛋白含量的影響 ng/L

4 討論

隨著集約化養(yǎng)殖方式的發(fā)展，空氣流通和熱量散發(fā)成了重要問題，加之夏天天氣較熱，濕度較大，因此，在溫度較高地區(qū)熱應(yīng)激的發(fā)生率較高。對(duì)基礎(chǔ)設(shè)施的改建又耗資較大。因此，在飼料中添加中草藥或者某些藥物來減少動(dòng)物熱應(yīng)激是種較好的方式（胡永靈，2015；賀紹君，2014）。化藥添加劑療效顯著，但長期添加可能出現(xiàn)耐藥性或者器官毒性問題。由于中草藥具有毒性小、殘留低等特點(diǎn)，所以作為添加劑有較明顯的優(yōu)勢(shì)，本研究以熱應(yīng)激臨床表現(xiàn)對(duì)其進(jìn)行辯證組方，選取具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱的金銀花；具有涼血解毒的地榆；清熱解毒，涼血止痢的白頭翁；補(bǔ)氣升陽，固表的黃芪進(jìn)行組方，并以梯度劑量進(jìn)行添加。試驗(yàn)中，臨床表現(xiàn)結(jié)果表明：自擬的中草藥復(fù)方添加劑對(duì)試驗(yàn)雞并無不良影響，對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物安全。

生長性能是通過動(dòng)物增重、采食量等指標(biāo)進(jìn)行判斷的，可以直接表現(xiàn)試驗(yàn)動(dòng)物的生長發(fā)育情況，研究表明，中草藥飼料添加劑對(duì)熱應(yīng)激試驗(yàn)雞有促生長作用，這種作用可能是通過改善試驗(yàn)雞的熱應(yīng)激狀態(tài)完成的。

血液是由血漿和血細(xì)胞組成。血漿為淺黃色半透明液體，含有無機(jī)鹽、纖維蛋白原、白蛋白、球蛋白、酶、激素、各種營養(yǎng)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物等，對(duì)機(jī)體功能的行使具有重要作用（李振，2011；孫友林，2006）。血液生化指標(biāo)可以間接反映機(jī)體代謝和正常情況，如總蛋白和白蛋白是機(jī)體蛋白質(zhì)，是反映機(jī)體營養(yǎng)的重要指標(biāo)，同時(shí)球蛋白是維持機(jī)體免疫功能的重要物質(zhì)（楊恒偉，2010），研究結(jié)果表明，飼料中添加中草藥可以增加血清總蛋白，這與陳靜等（2006）研究結(jié)果一致。其余各生化指標(biāo)雖無顯著性差異但有升高趨勢(shì)，如球蛋白含量，可以推測(cè)中草藥添加劑亦有增強(qiáng)免疫的功能。

熱休克蛋白是一類功能性相關(guān)蛋白質(zhì)，當(dāng)細(xì)胞受到溫度或其他壓力時(shí)，其表達(dá)會(huì)增長。熱休克蛋白的主要功能是提高細(xì)胞抗應(yīng)激能力，特別是耐熱能力。熱休克蛋白70家族最為重要和保守（TISSI RESA）。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)熱應(yīng)激時(shí)，熱休克蛋白70會(huì)被大幅度誘導(dǎo)，以提高細(xì)胞的耐熱性和對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用（王丹，2011；孫培明，2006），因此，熱休克蛋白70可以作為熱應(yīng)激指標(biāo)。本研究結(jié)果表明，當(dāng)試驗(yàn)動(dòng)物在高溫狀態(tài)下，熱休克蛋白70含量增加，使機(jī)體抵抗高熱環(huán)境，飼喂添加中草藥的飼料后，熱休克蛋白70含量下降，表明飼喂中草藥飼料添加劑能改善動(dòng)物的熱應(yīng)激狀態(tài)。