幸娟霞 張麟燕 劉琪 彭軍容 羅國霞 施迎春 王村建(通訊作者)
(1重慶市涪陵中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科 重慶 408000)
(2重慶市涪陵中心醫(yī)院耳鼻喉科 重慶 408000;3重慶市涪陵區(qū)疾控中心 重慶 408000)
SysmexXE-2100為普遍使用的血細(xì)胞分析儀,具有CBC、CBC+DIFF、RET等通道模式。它與很多血細(xì)胞分析儀同樣雖不能很正確識(shí)別異常細(xì)胞,但能提示較可靠的報(bào)警信息,檢驗(yàn)者可據(jù)信息推片復(fù)檢,核對其準(zhǔn)確性。我科對300例儀器提示嗜酸增高樣本中發(fā)現(xiàn)4例報(bào)警信息與鏡檢結(jié)果不一致,最后分析散點(diǎn)圖特征,并結(jié)合儀器原理和鏡下紅細(xì)胞形態(tài),最終發(fā)現(xiàn)瘧原蟲感染。
1.1.1 儀器和試劑
(1)血細(xì)胞分析儀:日本Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀,采用核酸熒光染色技術(shù)(DIFF通道)和激光流式分析技術(shù)(WBC/BASO通道)雙方法檢測WBC總數(shù)和分類,該儀器用側(cè)向散射光(SSC,細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度)和側(cè)向熒光強(qiáng)度(SFL,細(xì)胞內(nèi)RNA和DNA含量)行WBC分類計(jì)數(shù)。同時(shí)在溶血素中加入大分子有機(jī)酸,讓有機(jī)酸特異性結(jié)合到EO顆粒上,以增加EO內(nèi)容物的復(fù)雜性,從而達(dá)到區(qū)分EO的目的[1]。
試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品:Sysmex公司原裝配套產(chǎn)品。
(2)顯微鏡Olympus BX41;BASO劉氏染色液。制片按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版執(zhí)行[2]。
1.1.2 病例及樣本 2016年1月—2017年6月,EO異常的門診和住院患者300例;其中瘧原蟲感染者:男4例,45~49歲,平均年齡46.5歲,均為重慶本地人,均有境外工作或居住史,因發(fā)熱、寒戰(zhàn)、畏寒等就診。
(1)血細(xì)胞分析儀檢測 用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA—K2)抗凝真空管,采集2mL靜脈血充分混勻,于抽血后1h內(nèi)用XE-2100上機(jī)檢測。儀器按期校正,每日室內(nèi)質(zhì)控,雙水平;運(yùn)行良好。
(2)鏡檢 儀器示EO增高或異常報(bào)警的樣本,制備合格的血涂片,用劉氏染液染色鏡檢復(fù)核。若出現(xiàn)鏡檢與儀器結(jié)果不一致時(shí),觀察RBC形態(tài)查找瘧原蟲。
XE-2100檢測300例EO增高樣本中,4例鏡檢與儀器不符,占1.3%,查看WBC散點(diǎn)圖,發(fā)現(xiàn)異常,細(xì)看散點(diǎn)圖上EO與中性粒細(xì)胞間距變小,緊密連接,表現(xiàn)為EO假性增高(瘧疾感染者)。
4例瘧疾感染者鏡檢示EO均正常,同時(shí)RBC內(nèi)見瘧原蟲裂殖體、配子體或滋養(yǎng)體。檢測結(jié)果見表。
表 4例瘧原蟲樣本血液學(xué)檢測結(jié)果
Sysmex XE-2100血液分析儀功能齊全,應(yīng)用廣泛,能對異常信息提示,在總300例EO增高患者中,4例瘧原蟲感染樣本的儀器信息提示與鏡檢不一致,其散點(diǎn)圖示EO與中性粒細(xì)胞間緊密連接,而余296例散點(diǎn)圖無明顯異常。分析原因可能為:該XE-2100 WBC分類計(jì)數(shù)原理是利用SSC和SFL,而瘧原蟲感染的主要發(fā)病原因在于紅細(xì)胞內(nèi)瘧原蟲裂解增值,瘧原蟲感染RBC消化Hb后產(chǎn)生瘧色素,為一種雙折光晶體,當(dāng)RBC破裂,瘧色素釋放出來被WBC所吞噬[3-5],吞噬了瘧色素的WBC側(cè)射光強(qiáng)度發(fā)生改變,顯示在EO散點(diǎn)圖區(qū)域略左側(cè),故儀器上此類樣本被誤認(rèn)EO增高,造成EO+比值增高假象;而現(xiàn)實(shí)正常EO增高與假性EO增高的散點(diǎn)位置有差異,余296例為真性EO增多,顯示為正常散點(diǎn)圖。
回顧總結(jié),雖然此類瘧原蟲標(biāo)本僅占標(biāo)本總量的1.3%,工作中在儀器報(bào)警提示與鏡檢不符時(shí),不能就輕易認(rèn)可報(bào)警信息而不查找真正原因,應(yīng)嚴(yán)格認(rèn)真執(zhí)行復(fù)檢流程。其次需要對儀器工作原理掌握,重視各種報(bào)警信息含義,才能明確引起異常報(bào)警的真正原因。所以在工作中使用SysmexXE-2100時(shí),認(rèn)識(shí)“特征性”的散點(diǎn)圖篩檢瘧原蟲有很好的臨床價(jià)值,但僅用于過篩并不能確認(rèn)瘧原蟲類別,需進(jìn)一步鏡下確認(rèn)。鑒于病例數(shù)有限,仍待進(jìn)一步累積病例,證實(shí)感染瘧原蟲的“特征性”散點(diǎn)圖。