宋永青，莫重輝

(1.青海省湟中縣畜牧獸醫(yī)工作站，青海湟中 811600；2.青海大學農(nóng)牧學院，青海西寧 810016)

瑞香狼毒(Stellerachamaejasme)屬于瑞香科狼毒屬有毒植物，主要生長在海拔2 300 m～4 200 m的干燥向陽山坡、高山、亞高山草地，主要分布于我國東北、西北、華北、西南等退化草地上[1]。瑞香狼毒對草原主要危害為爭奪營養(yǎng)空間，影響植被群落中優(yōu)良牧草正常生長，可食牧草減少，導致草地產(chǎn)量和質(zhì)量下降，直接影響到畜牧業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展[2]。瑞香狼毒全株有毒，由于成株莖葉中含有萜類成分，家畜一般不采食，但在早春放牧時，家畜由于處于饑餓狀態(tài)或貪青而誤食引起中毒，母畜可導致流產(chǎn)[3-4]。目前國內(nèi)外學者在瑞香狼毒的生物學特性、危害、分布、有毒成分、藥理學等方面做了大量工作，特別在抗腫瘤、抗病毒、抗菌活性等方面取得了可喜成果[5-8]。季麗萍等[9]研究表明，瑞香狼毒各營養(yǎng)成分含量與紫花苜蓿相當，如能實現(xiàn)植株脫毒，則可成為一種潛在的牧草資源。但能否將瑞香狼毒作為飼料進行開發(fā)利用，還未見到相關報道，特別是在瑞香狼毒對放牧家畜中毒后血清離子的影響，因此本試驗進行了不同劑量瑞香狼毒對試驗羊4種血清離子的影響，以期為瑞香狼毒飼料化開發(fā)利用奠定理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 瑞香狼毒 采自青海省湟中縣土門關鄉(xiāng)，采集瑞香狼毒盛花期地上部分，陰干粉碎后保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 試驗用動物 臨床健康試驗羊8只，雌雄兼有，購于自由市場。臨床觀察1周，確認臨床健康后手術植入永久性瘤胃瘺管，待傷口痊愈后進行編號，隨機分為瑞香狼毒低劑量組和高劑量組。

1.1.3 主要試劑 血清鎂(Mg)試劑盒(批號:20160709)、鈉(Na)試劑盒(批號:20160718)、鐵(Fe)試劑盒(批號:20160714)和鉀(K)試劑盒(批號:20160716)，南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 攻毒方法 試驗前所有試驗綿羊空腹稱重定為原始體重，每天清晨空腹，高劑量和低劑量組分別按每千克體重2.5 g/kg和5 g/kg的劑量經(jīng)瘤胃瘺管一次投服，然后使其自由采食青干草和自由飲水。每天觀察試驗羊飲食、精神狀態(tài)、運動情況、中毒癥狀及中毒癥狀出現(xiàn)的時間。連續(xù)飼喂30 d時，停止投服瑞香狼毒粉，并繼續(xù)觀察2周。

1.2.2 血清離子濃度的測定 試驗前和試驗后每間隔4 d空腹采血1次，迅速分離血清，測定血清鎂(Mg，絡合指示劑法)、鈉(Na， 比沖法)、鐵(Fe，比色法)和鉀(K，比沖法)。

2 結(jié)果

2.1 臨床觀察結(jié)果

低劑量組試驗羊在試驗第12天開始體重顯著降低(P<0.05)，高劑量組試驗羊在第8天開始體重顯著降低(P<0.05)，且在整個試驗期間體重呈下降趨勢(圖1)。試驗羊食欲正常，飲水量增加，試驗第18天試驗羊出現(xiàn)不同程度的腹瀉癥狀，高劑量組試驗羊腹瀉較嚴重，糞便稀軟不成形，試驗第19天和第23天，低劑量組和高劑量組分別死亡1只試驗羊，試驗第32天停止投服瑞香狼毒粉后所有試驗羊逐漸停止腹瀉，精神好轉(zhuǎn)。

2.2 血清離子濃度測定結(jié)果

低劑量組和高劑量組試驗羊血清鉀含量分別在試驗第12天和第16天極顯著下降(P<0.01)；試驗羊血清鈉低劑量組在試驗第20天極顯著升高(P<0.01)、試驗第24天極顯著下降(P<0.01)；低劑量組試驗羊血清鐵在試驗第28天極顯著升高(P<0.01)，高劑量組沒有明顯變化；低劑量組試驗羊血清鎂含量在試驗第20天極顯著升高(P<0.01)，在試驗第24天極顯著下降(P<0.01)，高劑量組試驗羊血清鎂在試驗第16天極顯著升高(P<0.01)(表1和表2)。

3 討論

現(xiàn)代毒理學研究表明，瑞香狼毒全株有毒，植株中主要含有二萜類、香豆素類、木脂素類以及黃酮類等化合物[8]。家畜一般不采食瑞香狼毒鮮草，但在早春放牧或干旱年份牧草匱乏時，家畜由于貪青或饑餓，常因誤食而中毒[3]。此外，從異地新引進的家畜在瑞香狼毒滋生的草地上放牧時，由于識別能力差，常因誤食而發(fā)生中毒[4]。家畜瑞香狼毒中毒多為急性中毒，主要表現(xiàn)為腹痛腹瀉、臥地不起、全身痙攣、糞便帶血，嚴重時虛脫或驚厥而死亡[10-11]。從本試驗羊的臨床表現(xiàn)來看，所有試驗羊在整個試驗期間食欲正常，飲水量增加，體重明顯下降，腹瀉隨劑量增加而嚴重，最后因衰竭而死亡，與資料報道的瑞香狼毒中毒癥狀相似，說明本試驗中所用瑞香狼毒具有一定的毒性。在本試驗中試驗羊腹瀉癥狀最明顯，這可能瑞香狼毒總黃酮對胃腸道直接刺激作用，胃腸道組織結(jié)構破壞而使其出現(xiàn)功能異常有關[12]。

圖1 試驗羊體重變化趨勢

時間/d Time血清鉀/(mmoL·L-1) Serum potassium低劑量組/(2.5 g·kg-1) Low-dose group高劑量組/(5 g·kg-1) High-dose group血清鈉/(mmoL·L-1) Serum sodium低劑量組/(2.5 g·kg-1) Low-dose group高劑量組/(5 g·kg-1) High-dose group04.272±0.824bc4.703±0.701a0.516±0.201b0.680±0.136ab44.609±0.657abc4.715±0.649a0.652±0.171ab0.711±0.280ab84.893±0.458abc5.193±0.102a0.613±0.144ab0.673±0.161ab126.209±0.717a5.068±0.842a0.695±0.073ab0.525±0.159ab163.633±0.512bc3.621±0.773b0.662±0.054ab0.780±0.138a202.984±0.642c2.895±0.748b0.851±0.235a0.511±0.061ab244.204±1.693bc3.075±0.940b0.245±0.021c0.698±0.350ab285.373±2.746ab2.987±0.570b0.535±0.142b0.402±0.214b323.206±0.280c2.889±0.084b0.426±0.277bc0.556±0.154ab

注：角標相同字母表示差異不顯著(P>0.05)；不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

Note：The same letters indicate no significant difference in the same column(P>0.05),and with different letters mean significant difference(P<0.05).

表2 試驗羊血清鐵和鎂含量變化

注：角標相同字母表示差異不顯著(P>0.05)；不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

Note：The same letters indicate no significant difference in the same column(P>0.05),and with different letters mean significant difference(P<0.05).

關于家畜瑞香狼毒中毒血清離子的變化，目前還未見相關報道。從本試驗血清鉀測定結(jié)果來看，低劑量組試驗羊血清鉀含量在試驗第12天與試驗前相比較明顯下降(P<0.01)，試驗期間其他時間沒有明顯變化，高劑量組試驗羊在試驗第16天開始與試驗前相比較極顯著下降(P<0.01)，說明隨著試驗時間的延長，高劑量的瑞香狼毒引起試驗羊出現(xiàn)明顯的腹瀉癥狀而導致鉀流失，而低劑量的瑞香狼毒雖然引起試驗羊腹瀉，但對血清鉀影響不大，這與高劑量組試驗羊比低劑量組試驗羊腹瀉較為嚴重相符合。從血清鈉測定結(jié)果來看，試驗羊血清鈉除在低劑量組在試驗第20天與試驗前相比較極顯著升高(P<0.01)、試驗第24天極顯著下降(P<0.01)外，低劑量組其他時間和高劑量組試驗期間與試驗前相比較沒有明顯變化，說明瑞香狼毒對試驗羊的血清鈉影響不大。從血清鐵測定結(jié)果來看，低劑量組試驗羊血清鐵僅在試驗第28天與試驗前相比較極顯著升高(P<0.01)，而高劑量組沒有明顯變化，但從數(shù)據(jù)來看，試驗羊的血清鐵逐漸升高，這是否與瑞香狼毒有關，還需要進一步研究。從血清鎂測定結(jié)果來看，低劑量組試驗羊血清鎂含量在試驗第20天與試驗前相比較極顯著升高(P<0.01)，而在試驗第24天突然極顯著下降(P<0.01)，而高劑量組試驗羊血清鎂僅在試驗第16天明顯升高，其他時間與試驗前相比較沒有明顯變化，引起這種變化是否與瑞香狼毒有關，還有待于進一步研究。