柴方紅， 孫興忠， 李 航， 謝素珠， 張賀洋 賈立軍*

(1.吉林省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 吉林 長春 130000；2.白城市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 吉林 白城 137000；3.延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)系 吉林 延吉 133000)

新孢子蟲病(Neosporiasis) 是由犬新孢子蟲(Neosporacaninum) 寄生于犬、牛、羊等多種動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)而引起的一種原蟲病[1]。該病對牛的危害最為嚴(yán)重，能夠感染各種奶牛、肉牛和黃牛，主要引起孕畜流產(chǎn)或死胎以及新生兒運(yùn)動(dòng)神經(jīng)障礙等，從而降低牛的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。新孢子蟲病呈世界性分布，美、英、澳、日等30多個(gè)國家都有發(fā)生，嚴(yán)重危害養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展[2]。新孢子蟲病在我國的新疆、青海、河北、山東、北京、吉林、黑龍江等多個(gè)省、市、自治區(qū)都有報(bào)道[3-5]。血清學(xué)調(diào)查表明，新疆奶?？贵w陽性率10.3%、牦牛18.8%，青海黃牛15.84%，北京奶牛26.67%，上海奶牛5.08%，河南奶牛16.88%，河北奶牛37.0%，內(nèi)蒙古奶牛3.3%，山東奶牛17.0%、吉林黃牛22.4%[6-7]。近年來，新孢子蟲病的流行區(qū)域逐漸擴(kuò)大，已給養(yǎng)牛業(yè)發(fā)展造成了嚴(yán)重影響。Reichel等統(tǒng)計(jì)顯示，每年因犬新孢子蟲感染或流產(chǎn)所造成的全球經(jīng)濟(jì)損失最低為12.98億美元，最高達(dá)23.8億美元[2]。為了解吉林省西部地區(qū)牛新孢子蟲病的流行情況，試驗(yàn)首次對吉林省西部地區(qū)洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)及乾安縣等5個(gè)縣市區(qū)進(jìn)行牛新孢子蟲病的抗體檢測，以期為該病的防控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清樣本

208份牛血清樣本于2016年采自吉林省西部地區(qū)白城市所轄的洮南市、洮北區(qū)、通榆縣，以及松原市所轄的寧江區(qū)和乾安縣等5個(gè)縣市區(qū)養(yǎng)牛場。無菌分離血清，于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑盒與藥品試劑

牛血清犬新孢子蟲ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司；其他藥品試劑均為國產(chǎn)分析純級。

1.3 血清樣本檢測

按照試劑盒說明書對采自吉林省西部地區(qū)洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)及乾安縣等5個(gè)縣市區(qū)的208份牛血清樣本進(jìn)行新孢子蟲病抗體檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用GraphPad Prism軟件，對檢測結(jié)果進(jìn)行不同地區(qū)、不同飼養(yǎng)方式、不同品種、不同性別及不同年齡段的統(tǒng)計(jì)學(xué)方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地區(qū)的牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，吉林省西部地區(qū)洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)及乾安縣等地牛新孢子蟲抗體陽性率分別為18.75%、19.51%、12.50%、14.29%和13.64%(表1)，表明吉林省西部地區(qū)洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)和乾安縣均為牛新孢子蟲病的流行地區(qū)，其中，洮南市和洮北區(qū)抗體陽性率較高。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，通榆縣與洮北區(qū)之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)，而其他地區(qū)之間抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)。

表1 不同地區(qū)牛新孢子蟲病感染情況

2.2 不同飼養(yǎng)方式的牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，在208份牛血清樣本中，放養(yǎng)牛的陽性率為19.01%，圈養(yǎng)牛的陽性率為10.34%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，放養(yǎng)牛與圈養(yǎng)牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)(表2)。

表2 不同飼養(yǎng)方式牛新孢子蟲病感染情況Table 2 The situation of the prevalence of bovine neosporosis infections between grazing and no grazing

2.3 不同類別牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，在208份牛血清樣本中，黃牛的陽性率為14.10%，肉牛的陽性率為16.15%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，黃牛與肉牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)(表3)。

表3 不同類別牛新孢子蟲病感染情況Table 3 The situation of the prevalence of bovine neosporosis infections of different category

2.4 不同性別的牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，在208份牛血清樣本中，公牛的陽性率為14.53%，母牛的陽性率為16.48%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，公牛與母牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)(表4)。

表4 不同性別牛新孢子蟲病感染情況

2.5 不同年齡的牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，在208份牛血清樣本中，1～3歲牛的陽性率為13.29%，4～6歲牛陽性率為20.00%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，1～3歲牛和4～6歲牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)(表5)。

表5 不同年齡牛新孢子蟲病感染情況

3 討論與結(jié)論

2006年丁德等對吉林省的梅河、舒蘭、琿春、雙陽地區(qū)黃牛進(jìn)行了新孢子蟲病調(diào)查，其抗體陽性率最高，為16.67%[8]。2015年李男禮等對吉林省白山地區(qū)的長白縣、靖宇縣、撫松縣、江源區(qū)、渾江區(qū)等5個(gè)縣區(qū)的黃牛和奶牛進(jìn)行了新孢子蟲病調(diào)查，其檢測樣本的總體陽性率為35.8%，顯著高于丁德等檢測地區(qū)抗體陽性率[9]。2017年張賀洋等對吉林省梅河、松原、長春、吉林和延邊等5個(gè)地區(qū)的黃牛和奶牛血清樣本進(jìn)行了檢測，總體陽性率為21.24%[10]。本試驗(yàn)對吉林省西部地區(qū)的洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)和乾安縣等5個(gè)縣市區(qū)共計(jì)208份牛血清樣本進(jìn)行了牛新孢子蟲抗體檢測，總體陽性率為15.38%。證實(shí)了吉林省西部地區(qū)也是牛新孢子蟲病的流行區(qū)域，其抗體陽性率顯著低于前期吉林省其他地區(qū)的調(diào)查結(jié)果。

通過對208份牛血清樣本的牛新孢子蟲抗體檢測，并對其不同地區(qū)、不同飼養(yǎng)方式、不同類別、不同性別及不同年齡段的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，不同地區(qū)之間通榆縣與洮北區(qū)牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)，而其他地區(qū)之間差異不顯著(P>0.05)。放養(yǎng)牛和圈養(yǎng)牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)，這可能與放養(yǎng)牛有更多機(jī)會(huì)接觸被孢子化卵囊污染的飼料或飲水有關(guān)。黃牛和肉牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)；公牛與母牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)，說明牛新孢子蟲病感染與牛的類別和性別無關(guān)，不同類別和性別牛均可感染。1～3歲牛和4～6歲牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)，其高齡?？贵w陽性率顯著高于低齡牛，這可能與犢牛多以垂直傳播，而成年牛多以水平傳播為主有關(guān)。本試驗(yàn)采集樣本的5個(gè)地區(qū)均為首次牛新孢子病抗體檢測，而且檢測牛的類別為黃牛和肉牛，并對不同性別的牛新孢子病抗體陽性率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，均不同于蔡光烈等對吉林省其他地區(qū)新孢子蟲病調(diào)查的報(bào)道[8-11]。

新孢子蟲的傳播方式分為水平傳播和垂直傳播。食肉動(dòng)物由于吞噬了含有組織包囊的動(dòng)物組織很可能被感染，草食動(dòng)物也會(huì)由于采食了被孢子化卵囊污染的飼料或飲水而感染新孢子蟲。垂直傳播是新孢子蟲的主要傳播方式，新孢子蟲速殖子可以在母體懷孕期間經(jīng)胎盤垂直傳播給胎兒，造成流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎或新生胎兒帶蟲。犬和牛作為新孢子蟲的終末宿主和中間宿主，在傳播新孢子蟲的同時(shí)，也是其他寄生蟲的傳播媒介，因此新孢子蟲等寄生蟲病的防控研究越來越引起重視[12-15]。該結(jié)果為吉林省西部地區(qū)牛新孢子病防控提供了科學(xué)的流行病學(xué)資料。