郭天宇 ，王江水，李凱旋，王 倩，占秀安

（浙江大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 310029）

在肉雞的養(yǎng)殖生產(chǎn)中，環(huán)境溫度是影響肉雞生長最重要的因素之一，溫度過高或過低都會增加肉雞維持能量需要，降低生產(chǎn)性能[1]。在當(dāng)前的集約化飼養(yǎng)中，高溫對肉雞養(yǎng)殖效益的影響日益突出，熱應(yīng)激使肉雞飼料利用率降低，死亡率升高[2-3]。據(jù)報道，美國每年因熱應(yīng)激造成的家禽生產(chǎn)損失達1.25億～1.65億美元，肉雞損失約5 200萬美元[4]。同時，高溫環(huán)境下，家禽由于全身覆蓋羽毛且沒有汗腺，散熱困難，極易發(fā)生熱應(yīng)激并誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，對機體產(chǎn)生嚴(yán)重危害[5]。此前對適宜溫度的探索主要集中于環(huán)控艙的試驗研究，本試驗通過規(guī)模實地養(yǎng)殖試驗進一步驗證，探索肉雞生長后期的適宜環(huán)境溫度，同時以夏季肉雞生產(chǎn)中普遍出現(xiàn)的高溫為熱應(yīng)激源，研究熱應(yīng)激對肉雞生產(chǎn)性能和消化及相關(guān)生理生化指標(biāo)的影響，旨在為生產(chǎn)實踐提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 試驗動物為29 日齡嶺南黃羽肉雞，試驗所用4臺掛式空調(diào)為格力KFR-32GW/(32592)FNhAa-A3型號，使用年限相同，試驗飼糧參照黃羽肉雞營養(yǎng)需要（NY/T 33-2004）配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理 試驗采用單因素隨機試驗設(shè)計，將840只29日齡健康嶺南黃羽肉雞隨機分為4組，每組含3個重復(fù)，每重復(fù)70只（公、母各半），試驗期28 d。選用4間處于同一水平位置的40 m2左右雞舍，統(tǒng)一將空調(diào)安裝在雞舍墻壁中央位置，分別設(shè)定并維持舍內(nèi)實際溫度20、25、28、30℃ 24 h恒定。飼養(yǎng)試驗開始之前對雞舍進行全面消毒、沖洗（包括雞舍的地面、墻壁、料筒和飲水器）。飼養(yǎng)密度為7只/m2，24 h光照（每雞舍2只相同3 w燈泡），采用50%木屑+50%稻殼地面平養(yǎng)模式，保證墊料厚度相同，自由采食和充足飲水，保持雞舍衛(wèi)生，空調(diào)通風(fēng)。在每個雞舍正中央距離地面10 cm處放置同款干濕球溫度計和水銀溫度計，每日 06:00、10:00、14:00、18:00、22:00記錄雞舍溫度、濕度及雞的死亡淘汰情況，并對空調(diào)進行定期清理。

表1 基礎(chǔ)飼糧配方及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，每重復(fù)選擇體重基本一致的公雞3只，進行屠宰試驗，常規(guī)采血，制備血清樣品，-20℃保存；斷頸處死后，解剖同取肝大葉、胸大肌、十二指腸內(nèi)容物，速凍后于-80℃保存，取十二指腸中段1 cm于4%甲醛中固定。

1.3 指標(biāo)測定與方法

1.3.1 生產(chǎn)性能指標(biāo) 分重復(fù)統(tǒng)計29 d和56 d體重、29～56 d耗料量、死亡雞數(shù)及其重量、分組分重復(fù)計算采食量、日增重、耗料增重比及死亡率。

1.3.2 十二指腸結(jié)構(gòu)及消化酶活力 十二指腸內(nèi)容物中胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活力均用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定；十二指腸腸段制成切片后，在光鏡下觀察統(tǒng)計其絨毛高度、隱窩深度，計算絨毛高度/隱窩深度。

1.3.3 血清和組織中熱應(yīng)激相關(guān)指標(biāo) 血清促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）和皮質(zhì)酮（Cort）水平，血清肌酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶（LDH）活力，肝臟、胸肌中熱應(yīng)激蛋白（HSP70）含量均采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定，試劑配制和操作步驟按說明書進行。

1.3.4 血清和肝臟抗氧化相關(guān)指標(biāo) 血清和肝臟中總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）活力、丙二醛（MDA）含量均采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定，試劑配制和操作步驟按說明書進行。

1.4 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件的單因素方差法進行顯著性分析，差異顯著則進行Duncan's多重比較分析，對肉雞日增重及耗料增重比的回歸分析采用Excle 2015進行，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié) 果

2.1 雞舍實際溫度統(tǒng)計 圖1為20、25、28、30℃組肉雞29～56 日齡的實際舍內(nèi)在06:00、10:00、14:00、18:00、22:00時的測定溫度所統(tǒng)計的日均溫度，其與設(shè)定溫度變化幅度均不超過0.2℃。

圖1 各組日均溫度記錄

2.2 環(huán)境溫度對黃羽肉雞生產(chǎn)性能的影響 通過對不同溫度下肉雞生產(chǎn)性能的回歸分析發(fā)現(xiàn)，日增重對溫度的二次回歸方程為Y=-0.077X2+3.319 7X+4.013 1，R2=0.992 9，日增重最大值時溫度為21.6℃；耗料增重比對溫度的二次回歸方程為Y=0.005 8X2-0.266 2X+5.975 2，R2=0.994 6，耗料增重比最小值時溫度為22.9℃。

由表2可見，隨著環(huán)境溫度升高，肉雞的生產(chǎn)性能整體逐漸降低。20℃和25℃組、28℃和30℃組組間日增重、采食量、耗料增重比均無顯著差異（P＞0.05）。同比30℃組，20℃組生產(chǎn)性能所有指標(biāo)更佳（P＜0.05），25℃組的耗料增重比和死亡率均顯著降低（P＜0.05）。

表2 環(huán)境溫度對肉雞29～56 d生產(chǎn)性能的影響

2.2 環(huán)境溫度對黃羽肉雞消化功能的影響 由表3可知，20℃和25℃組間的胰蛋白酶和脂肪酶活力、絨毛高度/隱窩深度均無顯著差異（P＞0.05），但皆顯著高于28℃和30℃組（P＜0.01）。28℃組脂肪酶活力、絨毛高度/隱窩深度均顯著高于30℃組（P＜0.05）。各組的淀粉酶活力皆無顯著差異（P＞0.05）。

表3 環(huán)境溫度對黃羽肉雞消化功能的影響

2.3 環(huán)境溫度對黃羽肉雞血清和組織生化指標(biāo)的影響由表4可見，隨著環(huán)溫升高，血清Cort和ACTH水平、血清CK和LDH活力、肝臟和胸肌HSP70含量均逐漸升高。同比20℃組，30℃組血清Cort和ACTH水平、血清CK和LDH活力、肝臟和胸肌HSP70含量均顯著升高（P＜0.05）。20℃和25℃組所有指標(biāo)均無顯著差異（P＞0.05），28℃和30℃組除了血清Cort外其余指標(biāo)均無顯著差異（P＞0.05）。

表4 環(huán)境溫度對黃羽肉雞血清和組織生化指標(biāo)的影響

2.4 環(huán)境溫度對黃羽肉雞抗氧化功能的影響 由表5可見，隨著環(huán)溫升高，血清和肝臟T-AOC水平、血清GSH-Px和肝臟T-SOD活力均逐漸降低，血清和肝臟MDA水平皆逐漸升高。20℃和25℃組中血清和肝臟T-AOC水平、血清GSH-Px和肝臟T-SOD活力均顯著高于30℃組（P＜0.05），血清和肝臟MDA水平均顯著低于30℃組（P＜0.05）。各組間血清T-SOD和肝臟GSH-Px活力、血清和肝臟CAT活力均無顯著差異（P＞0.05）。

表5 環(huán)境溫度對黃羽肉雞抗氧化功能的影響

3 討 論

3.1 環(huán)境溫度對黃羽肉雞生產(chǎn)性能的影響 溫度是影響肉雞生長發(fā)育最重要的環(huán)境因素，高溫或低溫都會降低肉雞的生產(chǎn)性能[6]。由于實際生產(chǎn)中肉雞遭遇熱應(yīng)激比較普遍，故溫度對肉雞生產(chǎn)性能影響的研究多集中于高溫環(huán)境。前人研究表明，環(huán)境溫度過高可引起肉雞熱應(yīng)激，造成肉雞采食量、日增重等生產(chǎn)性能指標(biāo)顯著下降[7]。肉雞持續(xù)35℃熱暴露7 d，日增重顯著降低[8]。將21日齡肉雞分別飼養(yǎng)于20、25、30、35℃條件下，肉雞采食量、體重和飼料利用率在30℃、35℃組均有下降，而15℃和20℃組間沒有差別[9]。本試驗中，30℃組肉雞的日增重、耗料增重比、死亡率均顯著差于20℃和25℃組，同前人研究結(jié)果相似，說明30℃高溫降低了肉雞的飼料轉(zhuǎn)化效率，減少了日采食量，從而導(dǎo)致生產(chǎn)性能顯著下降。同時，環(huán)境溫度對日增重及耗料增重比影響的二次回歸分析表明，日增重和耗料增重比分別在21.6℃、22.9℃達到最優(yōu)值，且R2＞0.99，因此判斷在20℃以上的環(huán)境溫度中，21.6～22.9℃可能是黃羽肉雞生長后期的最適溫度，但由于本試驗未探索20℃以下生產(chǎn)性能隨環(huán)境溫度的變化，因此21.6～22.9℃是否為黃羽肉雞生長后期的最適溫度仍待驗證。

3.2 環(huán)境溫度對黃羽肉雞消化功能的影響 本試驗中，30℃組的十二指腸胰蛋白酶和脂肪酶活力、絨毛高度/隱窩深度均顯著低于20℃和25℃組，這與前人研究結(jié)果一致。Al-Fataftah等[10]報道，熱應(yīng)激肉雞十二指腸和回腸的絨毛高度、絨毛表面積和吸收區(qū)上皮細(xì)胞面積顯著減低。余進[11]研究指出，熱應(yīng)激肉雞空腸絨毛高度降低，隱窩深度增加，且絨毛高度/隱窩深度顯著降低。馬愛平[12]研究表明，27～33℃高溫使肉仔雞十二指腸胰蛋白酶活性顯著降低。由于肉雞沒有汗腺，皮膚蒸發(fā)散熱有限，環(huán)境得熱和自身產(chǎn)熱遠大于蒸發(fā)散熱，造成機體熱調(diào)節(jié)失敗，體內(nèi)熱量積蓄導(dǎo)致體溫升高[13]，使得消化酶活性降低。熱應(yīng)激下，腸道組織容易缺血缺氧，腸道細(xì)胞遭受氧化應(yīng)激，引起細(xì)胞凋亡，從而損傷腸道發(fā)育[14]。

3.3 環(huán)境溫度對黃羽肉雞血清和組織生化指標(biāo)的影響熱應(yīng)激導(dǎo)致機體細(xì)胞膜通透性升高，促進細(xì)胞內(nèi)酶釋放進入血液，造成血液中酶活力升高。多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)熱應(yīng)激造成血漿CK和LDH等活力升高[15]。熱應(yīng)激時，應(yīng)激信號刺激導(dǎo)致下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸興奮，促進了Cort的分泌。因此，肉雞血液中Cort含量變化可作為應(yīng)激反應(yīng)的重要標(biāo)志[16]。孫培明[17]研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞遭受熱應(yīng)激時，HSP70會大量產(chǎn)生，從而提高機體的熱耐受，對機體的恢復(fù)起到重要作用。本試驗中，30℃組較25℃組血清CK活力和Cort水平顯著增高，較20℃和25℃組肝臟和胸肌HSP70含量極顯著增加，說明30℃環(huán)境引起了肉雞的熱應(yīng)激反應(yīng)，造成機體激素分泌及其相關(guān)代謝失調(diào)。

3.4 環(huán)境溫度對黃羽肉雞抗氧化功能的影響 當(dāng)環(huán)境溫度過高時，機體遭受熱應(yīng)激，體內(nèi)細(xì)胞氧化自由基及其活性衍生物（稱活性氧，ROS）急劇增加，ROS數(shù)量超過抗氧化體系還原能力，從而造成機體氧化應(yīng)激。自由基的清除主要依靠體內(nèi)各類抗氧化酶，包括SOD、CAT和GSH-Px等[18]。MDA是氧自由基引發(fā)的機體脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物[19]。多數(shù)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，熱應(yīng)激可造成血漿和肝臟中MDA含量顯著升高[20-21]。另有研究表明，熱應(yīng)激會顯著降低肝臟GSH-Px活力[22]。本試驗中，30℃組血清T-AOC水平和GSH-Px活力較20℃和25℃組顯著降低，MDA含量明顯升高。30℃組肝臟T-AOC水平和T-SOD活力較20℃組均顯著下降，這與前人的研究結(jié)果相一致，說明30℃高溫已經(jīng)引起肉雞的熱應(yīng)激，顯著降低了機體的抗氧化功能，28℃環(huán)境對機體的應(yīng)激損傷并不明顯。

4 結(jié) 論

在本試驗條件下，黃羽肉雞生長后期的適宜環(huán)境溫度為20～25℃，30℃環(huán)境對肉雞造成熱應(yīng)激，影響其消化和抗氧化功能，降低肉雞的生產(chǎn)性能。