張冬冬，徐官根，李曉英，，董志國(guó)，葛紅星，董迎輝，林志華，張 倩

（1.淮海工學(xué)院，江蘇省海洋生物技術(shù)重點(diǎn)建設(shè)實(shí)驗(yàn)室，連云港 222005；2.浙江萬(wàn)里學(xué)院，寧波 315100；3.連云港海浪水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，連云港 222045）

文蛤（Meretrix meretrix Linnaeus）是一種肉質(zhì)鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富的埋棲型雙殼經(jīng)濟(jì)貝類，廣泛分布于我國(guó)的沿海地區(qū)［1－3］。近年，隨著國(guó)外如日韓市場(chǎng)的緊俏及國(guó)內(nèi)海產(chǎn)品市場(chǎng)需求增大，文蛤產(chǎn)業(yè)呈現(xiàn)供不應(yīng)求現(xiàn)象。但人工養(yǎng)殖仍舊依賴野生苗種，由于未經(jīng)選育，易出現(xiàn)種質(zhì)退化、生長(zhǎng)緩慢、疾病頻發(fā)等問(wèn)題，導(dǎo)致人工養(yǎng)殖難度加大，產(chǎn)業(yè)發(fā)展緩慢［4］。對(duì)此，浙江萬(wàn)里學(xué)院從江蘇南通文蛤野生種群選育出文蛤“萬(wàn)里”新品種（系）。該新品種（系）中，“萬(wàn)里紅”表現(xiàn)出生長(zhǎng)速度快、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的特點(diǎn)；“萬(wàn)里2號(hào)”品系呈現(xiàn)出繁殖力好、抗逆性強(qiáng)的特點(diǎn)，可有效解決當(dāng)前文蛤良種化之路［5］。目前，該品系商品貝在國(guó)家貝類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系連云港綜合試驗(yàn)站的養(yǎng)成比較已獲初步成果［6］，但對(duì)于稚貝的中間培育技術(shù)與生長(zhǎng)性能比較尚未見(jiàn)報(bào)道，開(kāi)展稚貝養(yǎng)殖性能評(píng)估對(duì)于文蛤新品種（系）苗種繁育企業(yè)的養(yǎng)殖及成貝推廣具有現(xiàn)實(shí)的應(yīng)用價(jià)值。

本研究以文蛤“萬(wàn)里”新品種（系）生長(zhǎng)性能養(yǎng)殖比較研究為基礎(chǔ)，探索“萬(wàn)里”新品種（系）稚貝在連云港地區(qū)池塘養(yǎng)殖模式，比較其不同季節(jié)生長(zhǎng)速度，篩選適合當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖的苗種，以期推動(dòng)當(dāng)?shù)匚母蝠B(yǎng)殖良種化進(jìn)程，實(shí)現(xiàn)“萬(wàn)里”新品種（系）養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 苗種來(lái)源

試驗(yàn)所用兩個(gè)文蛤“萬(wàn)里”新品種（系）苗種來(lái)自浙江省象山縣寧波甬盛水產(chǎn)種業(yè)有限公司繁育。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將“萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”共計(jì)沙苗1 000萬(wàn)粒，分別投放到連云港板橋地區(qū)同一池塘不同區(qū)域并做好標(biāo)記。放養(yǎng)密度每平方米約1 000粒，放養(yǎng)苗種規(guī)格詳見(jiàn)表1。放苗時(shí)間為2016年12月10日－2017年12月10日，試驗(yàn)周期12個(gè)月，每個(gè)月采樣一次。

1.3 取樣與測(cè)量

試驗(yàn)期間，每個(gè)月10號(hào)測(cè)量水溫、鹽度和pH值等水質(zhì)指標(biāo)；同時(shí)，設(shè)3個(gè)平行，每個(gè)平行隨機(jī)選取多個(gè)地點(diǎn)測(cè)量50個(gè)樣品，采用游標(biāo)卡尺（精度0.02 mm）測(cè)量樣品的殼長(zhǎng)、殼高和殼寬，采用天平（精確到0.000 1 g）測(cè)量體質(zhì)量，該數(shù)據(jù)用于分析文蛤生長(zhǎng)性能。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

增長(zhǎng)量 Δ＝（W2－W1）／（t2－t1）

式中：t1和t2分別表示各階段測(cè)量初始時(shí)間和結(jié)束時(shí)間，W1、W2為相對(duì)應(yīng)時(shí)間稚貝的初始體質(zhì)量和結(jié)束時(shí)體質(zhì)量，測(cè)量方法參照李松榮［7］。

通過(guò)Excel統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算殼長(zhǎng)、殼高、殼寬以及體質(zhì)量的均值和標(biāo)準(zhǔn)差并繪制柱狀圖和折線圖（鑒于2016年12月10日－2017年3月10日低溫期間，文蛤基本停止生長(zhǎng)，并且個(gè)體太小，文中圖表數(shù)據(jù)從2017年3月10日開(kāi)始繪制），采用SPASS17.0 edition軟件進(jìn)行多重比較，分析各組之間差異顯著性，以P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 水質(zhì)指標(biāo)

試驗(yàn)期間，水溫方面，100～250 d期間（3－8月），水溫不斷升高，至250 d時(shí)（8月10日），達(dá)到最高值27℃；250 d之后，開(kāi)始緩慢降溫。鹽度方面，整個(gè)養(yǎng)殖周期鹽度維持在26～31之間，隨著水溫的升高，池塘鹽度逐漸從31降到25，后隨著溫度降低，鹽度從25逐步升至28。pH值方面，全程pH值變化不大，在7.98～8.6之間波動(dòng)，呈弱堿性。

2.2 殼長(zhǎng)

稚貝在養(yǎng)殖100～160 d期間，“萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”殼長(zhǎng)無(wú)顯著性差異（P＞0.05）（圖1）；160～340 d期間，“萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”都呈現(xiàn)較快的增長(zhǎng)趨勢(shì)。其中在160～220 d，“萬(wàn)里2號(hào)”殼長(zhǎng)增長(zhǎng)率高于“萬(wàn)里紅”（P＜0.05）；在220～280 d，“萬(wàn)里2號(hào)”殼長(zhǎng)增長(zhǎng)率低于“萬(wàn)里紅”；在280～340 d期間，兩個(gè)品種（系）增長(zhǎng)趨勢(shì)較緩。

表1 苗種數(shù)據(jù)Tab.1 Data of clam seedling

表2 采樣點(diǎn)溫度、鹽度和pH數(shù)據(jù)Tab.2 Data of temperature，salinity and pH in sample points

圖1 “萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”殼長(zhǎng)生長(zhǎng)指標(biāo)Fig.1 Shell length of two experimental strains of M.meretrix注：同一養(yǎng)殖時(shí)間字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），否則為差異顯著（P＜0.05）Note：The same culture time with the same letter means insignificant difference（P ＞0.05），otherwise significant difference（P＜0.05）

2.3 殼高

稚貝在養(yǎng)殖100～160 d期間，“萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”殼高無(wú)顯著性差異（P＞0.05）（圖2）；在160～280 d期間，“萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”都呈現(xiàn)較快的增長(zhǎng)趨勢(shì)，其中在160～220 d期間，“萬(wàn)里2號(hào)”殼高生長(zhǎng)趨勢(shì)比“萬(wàn)里紅”快，但在220～280 d期間，“萬(wàn)里紅”又表現(xiàn)更快的增長(zhǎng)趨勢(shì)。且在220 d與280 d時(shí)，“萬(wàn)里2號(hào)”殼高顯著大于“萬(wàn)里紅”（P＜0.05）；第340天時(shí)，兩個(gè)品種（系）殼高無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

圖2 “萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”殼高生長(zhǎng)指標(biāo)Fig.2 Shell height of two experimental strains of M.meretrix注：同一養(yǎng)殖時(shí)間字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），否則為差異顯著（P＜0.05）Note：The same culture time with the same letter means insignificant difference（P ＞0.05），otherwise significant difference（P＜0.05）

2.4 殼寬

稚貝在100～160 d期間，“萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”殼寬無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；在160～280 d時(shí)，“萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”殼寬都呈現(xiàn)較快的增長(zhǎng)趨勢(shì)，且在220 d與280 d時(shí)，“萬(wàn)里2號(hào)”殼寬顯著大于“萬(wàn)里紅”（P＜0.05）；在160～220 d期間，“萬(wàn)里2號(hào)”殼寬生長(zhǎng)比“萬(wàn)里紅”快，但在220～280 d期間，“萬(wàn)里紅”又表現(xiàn)更快的增長(zhǎng)趨勢(shì)。第340天，兩個(gè)品種（系）殼寬無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

圖3 “萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”殼寬生長(zhǎng)指標(biāo)Fig.3 Shell width of two experimental strains of M.meretrix注：同一養(yǎng)殖時(shí)間字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），否則為差異顯著（P＜0.05）Note：The same culture time with the same letter means insignificant difference（P ＞0.05），otherwise significant difference（P＜0.05）

2.5 體質(zhì)量

前期100～160 d，兩個(gè)品種（系）稚貝體質(zhì)量生長(zhǎng)無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；在中后期（160～340 d），兩個(gè)品系體質(zhì)量均呈現(xiàn)較快的增長(zhǎng)趨勢(shì)。在220 d與280 d時(shí)，“萬(wàn)里2號(hào)”體質(zhì)量顯著大于“萬(wàn)里紅”（P＜0.05）；在160～220 d期間，“萬(wàn)里2號(hào)”比“萬(wàn)里紅”增長(zhǎng)略快，但在220～340 d期間，“萬(wàn)里紅”體質(zhì)量增速逐漸增大，直至340 d時(shí)反超“萬(wàn)里2號(hào)”，兩者末期體質(zhì)量無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

2.6 日增質(zhì)量

為了更充分的反映兩個(gè)品種（系）稚貝的生長(zhǎng)發(fā)育速度以及更深入研究季節(jié)對(duì)其生長(zhǎng)影響，對(duì)具有代表性的活體質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行了進(jìn)一步的細(xì)化分析，抽取增長(zhǎng)較明顯階段5－11月（160～340 d）期間的每月數(shù)據(jù)，將稚貝活體日增質(zhì)量制成折線圖（圖5）。

稚貝在5月份期間，日增質(zhì)量無(wú)顯著性差異；在6－8月，隨著水溫的增加，“萬(wàn)里紅”日增質(zhì)量明顯上升，而“萬(wàn)里2號(hào)”在6月中旬至7月中旬階段增長(zhǎng)遲緩，7月中旬至8月增長(zhǎng)迅速。兩者至8月份都呈現(xiàn)最高值，且“萬(wàn)里紅”日增質(zhì)量是“萬(wàn)里2號(hào)”的1.2倍。8月之后，隨著氣溫下降，日增質(zhì)量出現(xiàn)明顯下降。其中6－7月，“萬(wàn)里2號(hào)”日增質(zhì)量顯著大于“萬(wàn)里紅”；而8－10月，“萬(wàn)里紅”日增質(zhì)量顯著大于“萬(wàn)里2號(hào)”。

圖4 “萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”體質(zhì)量生長(zhǎng)指標(biāo)Fig.4 Weight of two experimental strains of M.meretrix注：同一養(yǎng)殖時(shí)間字母相同表示差異不顯著（P＞0.05），否則為差異顯著（P＜0.05）Note：The same culture time with the same letter means insignificant difference（P ＞0.05），otherwise significant difference（P＜0.05）

圖5 “萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”5－11月日增質(zhì)量比較Fig.5 Growth rate of two experimental groups of M.meretrix from May to November

3 討論

3.1 貝類不同品種（系）、殼色與生長(zhǎng)相關(guān)性

不同品種（系）的貝類生長(zhǎng)性能一般存在顯著差異。比如董志國(guó)等［8］研究發(fā)現(xiàn)三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）不同群體及后代生長(zhǎng)性能不同，張躍環(huán)等［9］發(fā)現(xiàn)菲律賓蛤仔 （Ruditapes philippinarum）海洋紅品系與斑馬蛤品系差異明顯。本試驗(yàn)中，稚貝在160～220 d養(yǎng)殖期間，“萬(wàn)里2號(hào)”的殼長(zhǎng)、殼高、殼寬和體質(zhì)量都顯著大于“萬(wàn)里紅”，在220～280 d養(yǎng)殖期間，“萬(wàn)里紅”生長(zhǎng)性能增速又大于“萬(wàn)里2號(hào)”。280 d后，“萬(wàn)里紅”生長(zhǎng)性能逐漸與“萬(wàn)里2號(hào)”縮小差距直至趨于一致。同一養(yǎng)殖環(huán)境兩個(gè)品種（系）稚貝出現(xiàn)這種明顯的階段性生長(zhǎng)差異，課題組之前試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)成貝同一池塘養(yǎng)殖環(huán)境出現(xiàn)“萬(wàn)里2號(hào)”前期生長(zhǎng)顯著大于“萬(wàn)里紅”現(xiàn)象，而后期正好相反［6］，顧向飛［10］通過(guò)比較“萬(wàn)里紅”與其它殼色文蛤生長(zhǎng)性狀也發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)速度存在明顯的季節(jié)差異性。課題組猜測(cè)這種差異性可能因?yàn)椤叭f(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”選育指標(biāo)及遺傳基因不同，導(dǎo)致“萬(wàn)里2號(hào)”具有耐低溫性，對(duì)前期低溫的新環(huán)境具有更強(qiáng)的適應(yīng)性，而“萬(wàn)里紅”具有耐高溫性，“萬(wàn)里紅”在中后期生長(zhǎng)具有更大的優(yōu)勢(shì)。這種同一物種不同品種（系）對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力的差異現(xiàn)象在牡蠣（Ostrea gigas）的研究中也有報(bào)道［11］。

已有研究表明貝類的殼色與生長(zhǎng)性能存在一定的關(guān)聯(lián)性，同一物種但殼色不同的貝類在同一環(huán)境中會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)差異［12］。NEWKIRK［13］研究發(fā)現(xiàn)貽貝（Mytilus edulis）高溫時(shí)藍(lán)色個(gè)體生長(zhǎng)速度比棕色個(gè)體快10%～20%，鄧岳文等［14］研究發(fā)現(xiàn)華貴櫛孔扇貝（Chlamys nobibis）桔黃殼色群體的生長(zhǎng)顯著大于紫褐殼色群體，閆喜武等［15］研究發(fā)現(xiàn)菲律賓蛤仔兩道紅品系生長(zhǎng)大于斑馬蛤顏色品系。本試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，紅殼色“萬(wàn)里紅”與黃殼色“萬(wàn)里2號(hào)”生長(zhǎng)存在差異。鑒于連云港本地尚未見(jiàn)有專業(yè)從事文蛤養(yǎng)殖，且研究發(fā)現(xiàn)江蘇選育的紅殼色與黃殼色“萬(wàn)里”品種（系）生長(zhǎng)速度均要大于未經(jīng)選育的普通野生品種［16］，所以本試驗(yàn)未與本地野生種群做比較。但一般研究認(rèn)為殼色屬于質(zhì)量性狀，生長(zhǎng)性能屬于數(shù)量性狀。所以要想解釋清楚殼色與生長(zhǎng)的具體關(guān)聯(lián)性機(jī)理，還需要借助分子生物學(xué)手段進(jìn)一步分析。

3.2 不同季節(jié)相同環(huán)境下貝類早期生長(zhǎng)差異性

溫度和鹽度適宜與否是影響稚貝生長(zhǎng)的重要因素［17－19］。曹伏君等［20］研究發(fā)現(xiàn)文蛤稚貝適宜生存溫度在4～36℃，最適生長(zhǎng)溫度在24～27℃，最適生長(zhǎng)鹽度在15～23。本研究中不同季節(jié)溫度及鹽度差異使得稚貝在不同季節(jié)也具有不同的生長(zhǎng)表現(xiàn)。稚貝在100～160 d（3－5月）養(yǎng)殖期，“萬(wàn)里紅”與“萬(wàn)里2號(hào)”生長(zhǎng)較緩慢，這除了與稚貝前期攝食能力弱、代謝慢有關(guān)，也可能因?yàn)闇囟鹊陀绊懫渖L(zhǎng)；在160～340 d（5－11月）期間，稚貝兩個(gè)品系都呈現(xiàn)高速增長(zhǎng)趨勢(shì)，尤其5－8月，稚貝日增長(zhǎng)量不斷增加，直至8月達(dá)到頂峰。而肖國(guó)強(qiáng)等［21］關(guān)于文蛤不同群體自繁和互交F1代稚貝試驗(yàn)結(jié)果顯示，7－9月日生長(zhǎng)量不大，9－11月處于高速生長(zhǎng)期，本試驗(yàn)結(jié)果（5－11月高速生長(zhǎng)期）與其基本吻合。但肖國(guó)強(qiáng)等［21］反映9－10月中旬達(dá)到高峰期，而本研究高峰期在8月，這種差異可能有3個(gè)原因：其一，可能其稚貝規(guī)格較小、選育子代數(shù)不同導(dǎo)致對(duì)季節(jié)敏感性有差異。其二，也可能是由于杭州與連云港兩地區(qū)同時(shí)期水溫不同，因?yàn)楸驹囼?yàn)中8月份水溫處于稚貝最適生長(zhǎng)溫度，鹽度接近最適生長(zhǎng)鹽度；而其試驗(yàn)時(shí)杭州最適水溫和鹽度可能在9－10月。其三，不排除本地池塘8月蝦料投喂增多導(dǎo)致浮游生物及單胞藻餌料豐富的影響［22］。8－11月，隨著溫度降低，pH值增加，日增長(zhǎng)量明顯下降，11月過(guò)后基本停止生長(zhǎng)，這正表明稚貝在冬季低水溫條件下，只能維持其最低的生命活動(dòng)狀態(tài)，基本處于休長(zhǎng)期。因此，通過(guò)整個(gè)生長(zhǎng)曲線反映出這兩個(gè)品種文蛤在連云港沿海養(yǎng)殖具有春冬季（11－5月）遲緩、夏秋季（5－11月）生長(zhǎng)迅速的規(guī)律，這與肖國(guó)強(qiáng)等［21］關(guān)于季節(jié)對(duì)稚貝的生長(zhǎng)規(guī)律影響結(jié)論基本一致。

4 小結(jié)

1）前期“萬(wàn)里2號(hào)”生長(zhǎng)性能顯著大于“萬(wàn)里紅”，但是后期相反，所以二者均可在連云港推薦養(yǎng)殖。

2）可以利用不同季節(jié)生長(zhǎng)曲線信息，盡可能在5月份生長(zhǎng)節(jié)點(diǎn)前，將養(yǎng)殖密度、養(yǎng)殖環(huán)境調(diào)控到適宜條件以迎接快速生長(zhǎng)期。