高宏軍

摘要：隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展以及工業(yè)化、城市化進(jìn)程的推進(jìn)，水資源污染問題越來(lái)越嚴(yán)重，與此同時(shí)，人們對(duì)于生活飲用水的水質(zhì)要求也越來(lái)越高。目前，我國(guó)的飲用水中存在大量的微生物，其中，部分微生物對(duì)人們的身體健康有一定的威脅，因此，飲用水必須嚴(yán)格地進(jìn)行消毒殺菌處理，并應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格的微生物檢測(cè)，檢測(cè)達(dá)標(biāo)后方可輸配給終端用戶。

關(guān)鍵詞：生活飲用水、微生物檢驗(yàn)

生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)對(duì)人們的飲水安全有著極為重要的作用，通過科學(xué)、有效的微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法，可保證水源的水質(zhì)合格、水處理達(dá)標(biāo)。但是，在生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)過程中，若存在不合理之處，則會(huì)一定程度地影響微生物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，進(jìn)而也容易造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果誤差，無(wú)法給生活飲用水的安全提供有力的保障。

一、生活飲用水微生物檢驗(yàn)的闡述

生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)主要是指為了保證人們的飲水安全，對(duì)經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等一系列處理后的飲用水進(jìn)行的一項(xiàng)微生物檢驗(yàn)方法。根據(jù)我國(guó)生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)（GB5749-85）中的規(guī)定，其飲用水中的微生物含量不得超過如下數(shù)字：總大腸菌群≤3個(gè)/L，細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè)/mL，糞大腸菌群于100mL水樣中不得檢出等等。目前常見的生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法包括有：濾膜法、酶底物法、多管發(fā)酵法、平皿計(jì)數(shù)法等，在實(shí)際的生活飲用水微生物檢驗(yàn)中，檢驗(yàn)人員根據(jù)微生物類型的不同，所選擇的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法也會(huì)有所不同。 而生活飲用水微生物的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)步驟大多如下。1.樣本采集。具有代表性的采集需要檢驗(yàn)的生活飲用水水樣，采集過程中必需注意無(wú)菌操作，且要保證采集的水樣能夠在采集后的 4 h 之內(nèi)進(jìn)行檢驗(yàn)，以免其因置放時(shí)間過長(zhǎng)而發(fā)生變化或污染。2.實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。根據(jù)所要檢驗(yàn)的水中微生物類型的不同，選擇最適宜、最準(zhǔn)確、最科學(xué)的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法。3.結(jié)果分析。通過對(duì)生活飲用水中各種微生物及時(shí)、有效的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果分析，便可得知飲用水中微生物的實(shí)際情況，這對(duì)早期處理或控制微生物超標(biāo)或含有致病性微生物的生活飲用水帶來(lái)的十分積極的作用。

二、檢驗(yàn)總大腸菌群的方法

首先，多管發(fā)酵法：測(cè)定總大腸菌群的多管發(fā)酵法最為適合居民日常生活飲用水以及水源的檢測(cè)。測(cè)試的儀器以及檢驗(yàn)步驟如下：1.多管發(fā)酵法應(yīng)用的儀器：多管發(fā)酵法中需要使用的儀器包含了：天平、分度吸管、培養(yǎng)箱、錐形瓶、小倒管、冰箱、顯微鏡、平皿、試管、載玻片。2.檢驗(yàn)步驟：（1）取出10ml的水樣放到10ml的雙料乳糖蛋白胨的培養(yǎng)液里面，然后取出1ml的水樣放到10ml的單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液里面，再取出1ml的水樣放到9ml的滅菌生理鹽水里面，均勻混合后吸取出1ml（也就是0.1ml的水樣）加入到10ml的單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液里面，每一種稀釋度都要接種5管。把已經(jīng)處理好的飲用水，還要經(jīng)常的做出檢驗(yàn)，每天都定時(shí)檢驗(yàn)一次，還可以直接接種5份的10ml的水樣進(jìn)行雙料培養(yǎng)基，每種10ml。（2）水源如果檢驗(yàn)出污染嚴(yán)重，就需要加大稀釋度，每種標(biāo)準(zhǔn)稀釋度都要接種5管，總共接種水樣為15管。接種不足1ml的水樣時(shí)，就需要10倍的稀釋，取其中的1ml進(jìn)行接種，然后逐次增稀，換用帶有滅菌刻度的吸管。（3）將接種好的試管放置在恒溫的培養(yǎng)箱中，經(jīng)過24個(gè)小時(shí)的培養(yǎng)，如果沒有產(chǎn)生出氣產(chǎn)酸，就說(shuō)明沒有總大腸菌群，但是如果產(chǎn)出了酸產(chǎn)氣，就可以繼續(xù)的進(jìn)行檢測(cè)。（4）對(duì)產(chǎn)出的酸產(chǎn)氣試管中，轉(zhuǎn)種到伊紅美藍(lán)瓊脂板上，在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行24小時(shí)的培養(yǎng)，查看菌落形態(tài)，將其中具有特征的菌落作革蘭氏染色、證實(shí)試驗(yàn)以及鏡檢。（5）經(jīng)過了染色鏡確定了是革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，然后接種乳糖蛋白胨進(jìn)行培養(yǎng)，防止恒溫箱中培養(yǎng)24個(gè)小時(shí)，產(chǎn)出了酸氣者，就肯定是有總大腸菌群。其次，濾膜法：總大腸菌群檢測(cè)的濾膜法一般都是用微孔徑的濾膜進(jìn)行水樣的過濾，把過濾膜貼附在乳糖上進(jìn)行恒溫的24小時(shí)培養(yǎng)，將形成的菌落中的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌然后對(duì)飲用水中的總大腸菌群做出檢測(cè)。1.培養(yǎng)基與試劑：濾膜法選用培養(yǎng)基與試劑主要是品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基以及乳糖蛋白胨的培養(yǎng)液。2.濾膜法使用的試驗(yàn)儀器：濾器、濾膜（孔徑0.45微米）、抽濾設(shè)備、天平、分度吸管、培養(yǎng)箱、錐形瓶、小倒管、冰箱、顯微鏡、平皿、試管、載玻片、無(wú)齒鑷子。3.試驗(yàn)步驟：（1）滅菌。主要是分為濾膜濾器兩種滅菌方法。（2）過濾水樣。使用無(wú)菌鑷子將滅菌濾膜的邊緣部分夾取起來(lái)把粗糙的表面朝上，然后放在滅菌好的濾床之上，將濾器固定好，往濾器中加入100ml的水樣，將濾器的閥門打開進(jìn)行抽濾。（3）培養(yǎng)。過濾完水樣之后抽氣5秒后，將濾器閥門關(guān)上，使用滅菌鑷子移放到品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基之上，濾膜截留好的細(xì)菌面要朝上，相互緊貼不可以存有氣泡，倒置平皿放入恒溫箱中進(jìn)行24小時(shí)的培養(yǎng)。

三、多管發(fā)酵法與濾膜法的對(duì)比

多管發(fā)酵法是采用MPN進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果的表示，這是以統(tǒng)計(jì)學(xué)中的理論對(duì)水體中的大腸桿菌密度以及衛(wèi)生質(zhì)量的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)的方法一樣，但是可以進(jìn)行反復(fù)的檢測(cè)，能夠發(fā)現(xiàn)結(jié)果要比實(shí)際的數(shù)值大，但是反復(fù)的實(shí)施檢測(cè)，那差異會(huì)因此而變小，其中細(xì)菌的含量值估算，絕大部分是因?yàn)橄♂尪扔诛@示著陽(yáng)性也會(huì)顯示著陰性，所以實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，一定要根據(jù)水樣檢驗(yàn)的實(shí)際需求來(lái)制定重復(fù)的數(shù)量，應(yīng)該根據(jù)數(shù)據(jù)要求的準(zhǔn)確度來(lái)制定。多管發(fā)酵法更實(shí)用于多種類型的樣品當(dāng)然也包括了底泥，可惜操作的步驟卻又繁瑣，使用的時(shí)間又過于的長(zhǎng)；濾膜法就比較適用于那些包含著少量雜質(zhì)的水樣，可是操作的方法卻相對(duì)的簡(jiǎn)單快捷，所以多管發(fā)酵法就可以被廣泛的使用，并且是采用最多的方法，并且數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度又特別高。多管發(fā)酵法相對(duì)于濾膜法的數(shù)據(jù)結(jié)果實(shí)施統(tǒng)計(jì)學(xué)的比較，濾膜法的結(jié)果就比較的精密，兩種的測(cè)試方法得到的結(jié)果能夠提供出水質(zhì)的基本情況，但是檢驗(yàn)數(shù)值卻不同，所以進(jìn)行水源的水質(zhì)做出檢測(cè)過程中，就應(yīng)該預(yù)期到大部分的濾膜數(shù)據(jù)都會(huì)遺落在多管發(fā)酵法的試驗(yàn)的界限內(nèi)。

總之，相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員，應(yīng)該加強(qiáng)對(duì)我國(guó)當(dāng)下生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)中容易出現(xiàn)的質(zhì)量問題進(jìn)行詳細(xì)分析，并采取積極、科學(xué)、有效的措施控制微生物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，以保證質(zhì)量的穩(wěn)定性與良好性，進(jìn)而為我國(guó)生活飲用水的檢測(cè)與正常、安全使用奠基堅(jiān)實(shí)地基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1]馮錫凱，馮智勤.加強(qiáng)生活飲用水檢驗(yàn)的必要性與迫切性[J]中國(guó)科技縱橫，2010，（24）：239

[2]湯云木，常育，石晶等.淺析水中微生物對(duì)水質(zhì)的影響及防治對(duì)策[J]科技風(fēng)，2010，（20）：257

[3]祝美云，李厚強(qiáng).純凈水中微生物的控制[J].食品科技，2007，32（5）：218-220