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        葡萄果實(shí)中葡萄糖苷酶VvBG1具有較高的生理活性

        2012-01-22 20:31:01丁寧
        中國果業(yè)信息 2012年10期
        關(guān)鍵詞:原核糖苷酶果肉

        據(jù)《園藝學(xué)報》2012年第 6期《葡萄果實(shí) β-葡萄糖普酶基因克隆、原核表達(dá)及活性檢測》(作者董銀行等)報道,以“玫瑰香”葡萄著色期的果肉為試材,通過反轉(zhuǎn)錄技術(shù)克隆了ABA合成相關(guān)酶-葡萄糖苷酶基因VvBG1的1518bp編碼區(qū)核苷酸序列,其編碼1個含有505氨基酸的多肽。生物信息學(xué)分析表明,VvBG1含有1個跨膜區(qū)和糖基水解酶1超家族保守域。通過BamHⅠ和XhoⅠ限制性內(nèi)切酶將除去信號的編碼區(qū)克隆到原核表達(dá)載體pET28a(+)中,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌表達(dá)菌株BL21(DE3),成功誘導(dǎo)并純化了 VvBG1融合蛋白。經(jīng)過透析復(fù)性和超濾濃縮得到了0.8mg·mL-1可溶的融合蛋白。通過純化蛋白葡萄果肉均漿液孵育試驗(yàn)和GC-MSABA含量分析證實(shí)了葡萄果實(shí)中β-葡萄糖苷酶VvBG1具有較高的生理活性。

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